两种分光光度法测定马来酸氯苯那敏的含量

建立了两种快速、直接的分光光度法检测马来酸氯苯那敏含量。方法是基于在Clark-Lubs缓冲溶液中,马来酸氯苯那敏能与赤藓红B(方法 A)或孟加拉玫瑰红(方法 B)之间发生反应,引起体系的吸光度发生变化。通过测量体系在560 nm和577 nm处的吸光度变化值,得到的结果显示,方法 A即赤藓红B体系在560nm处的吸光度差值与1.00~10.00 mg·L^(-1)浓度范围内马来酸氯苯那敏呈线性关系(ΔA=0.125C+0.028 3,相关系数为0.999 6),检出限为0.222 8 mg·L^(-1)。方法 B即孟加拉玫瑰红体系在577 nm处的吸光度差值与1.00~16.00 mg·L^(-1)浓度范围内马来酸氯苯那敏呈线性关系(ΔA=0.086 1C-0.012 8,相关系数为0.999 2),检出限为0.3571 mg·L^(-1)。

饮料和糖果中5种非法添加色素的检测

采用聚酰胺吸附法提取样品溶液的色素,用乙醇-氨水-水混合溶液解吸,用高效液相色谱-二极管阵列检测器测定。采用ODS柱分离,以甲醇和硫酸铵溶液为流动相进行洗脱,在520nm波长处检测。亮黑、荧光素钠、红色2G、荧光桃红和孟加拉玫瑰红的质量浓度在1.0～10.0mg/L范围内与其色谱峰面积的线性关系良好(r=0.999),在1、2、5mg/kg添加水平时的平均回收率在82.95%～95.43%范围内,RSD值在1.99%～5.95%范围内。方法检出限为1.0mg/kg。该方法准确度高,分离效能好,结果稳定可靠,适合于饮料和糖果中亮黑、荧光素钠、红色2G、荧光桃红和孟加拉玫瑰红的测定。

毛细管电泳-激光诱导荧光分离检测红枣中四种色素成份

建立了毛细管电泳-激光诱导荧光法同时测定红枣中的罗丹明6G、藏红T、孟加拉玫瑰红和荧光桃红B四种工业染料的方法。对电泳介质的种类、浓度、p H值及分离电压和进样量等因素进行了优化。在0.01 mol·L^-1硼砂-30%乙腈（p H=9.5）条件下,可在8 min内实现罗丹明6G、藏红T、孟加拉玫瑰红和荧光桃红B的分离检测。线性范围分别为7.2-407.2、70.2-350.8、101.8-1017.6和41.5-705.2 ng·m L^-1,检出限分别为3.7、38.2、64.4和20.9 ng·m L^-1,回收率分别为101.8%、98.3%、97.7%和103.0%。可用于红枣中四种工业染料的分离检测。

两例小熊猫疑似布鲁菌感染的鉴别诊断

为了研究小熊猫这类野生动物是否存在布鲁菌感染,采用虎红平板凝集试验(RBPT)、试管凝集试验(SAT)及BCSP31-PCR对成都大熊猫繁育研究基地小熊猫保护研究中心产房饲养的小熊猫进行了布鲁菌病的血清学及分子生物学调查。结果表明:有2只小熊猫RBPT检测阳性,表示疑似布鲁菌感染,而进一步采用SAT及BCSP31-PCR诊断为阴性,排除了RBPT检测为阳性的2只小熊猫感染布鲁菌的可能性。说明RBPT存在假阳性结果,临床诊断此病时应结合分子生物学技术等进行鉴别诊断。

三种商品化光敏剂诱导小鼠免疫原性细胞死亡的效果比较

目的研究二氢卟吩e6(Ce6)、中性红(NR)以及虎红钠盐(RB)3种商品化光敏剂的光敏性质、光动力治疗(PDT)效果及诱导免疫原性细胞死亡(ICD)能力,筛选出最高效的ICD诱导剂用于抗肿瘤免疫治疗。方法溶液实验:利用不同的活性氧(ROS)荧光探针评估溶液中3种光敏剂的光敏能力。细胞实验:探针检测肿瘤细胞内ROS生成能力;CCK-8细胞毒性试验比较3种光敏剂的细胞杀伤效果以及生物相容性;检测细胞表面暴露的钙网蛋白(ecto-CRT),高迁移率族蛋白1(HMGB1)以及培养基上清三磷酸腺苷(ATP)浓度评估3种药物的ICD诱导能力。动物实验:建立BALB/c小鼠4T1皮下肿瘤模型,10 d后分别在瘤内注射Ce6和NR(30μL,5 mg/mL),2 h后白光光照处理(10 min,400 mW/cm^(2)),监测小鼠体质量及肿瘤组织体积变化。14 d后取材,通过流式细胞技术分析肿瘤组织中CD8^(+)T细胞及脾脏组织CD8^(+)T的IFN-γ因子分泌量;通过HE染色和TUNEL组织染色分析肿瘤组织中细胞凋亡情况。结果在3种光敏剂中,Ce6的ROS产生能力最高,且显示出最强的肿瘤细胞杀伤效果;ecto-CRT、HMGB1荧光成像及胞外ATP含量显示Ce6相对于NR和RB具有更好的ICD诱导能力。动物实验显示,Ce6和NR组小鼠在光动力治疗后肿瘤体积显著变小,其中Ce6肿瘤治疗效果明显好于NR及PBS组。流式结果显示Ce6与NR组瘤内CD8^(+)T细胞占比分别为12.7%和6.1%,脾脏组织IFN-γ+CD8^(+)T细胞占比分别为7.1%和2.8%,两组之间差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色和TUNEL染色显示相对于PBS组,两个治疗组肿瘤组织有明显核凋亡情况,且Ce6的治疗效果明显强于NR。结论3种光敏剂中Ce6的ROS生成效率最高,光动力效果最好,诱导ICD能力最强,并且在肿瘤治疗中能明显提升CD8^(+)T细胞的数量及功能,能相对高效的启动适应性免疫应答,抑制肿瘤生长。