冬虫夏草及其近缘品中铅、镉、砷污染评价及人体健康累积风险评估方法探索

目的:对冬虫夏草及其近缘品中铅(Pb)、镉(Cd)、砷(As)的残留量进行测定,探索符合冬虫夏草及相关产品使用特点的污染评价及人体健康风险评估方法。方法:基于冬虫夏草及其近缘品中Pb、Cd、As的残留量监测数据,综合运用单因子污染指数法、尼梅罗综合指数法、金属污染指数法对冬虫夏草及其近缘品进行重金属污染评价,计算重金属日暴露量,分别采用危害指数法和更加精确的靶器官毒性剂量法对Pb、Cd、As联合暴露产生的健康风险进行累积风险评估。结果:污染评价结果说明,冬虫夏草及其近缘品中As的污染应引起关注,不同品种污染程度为冬虫夏草(繁育品)=蛹虫草<冬虫夏草(野生品)<香棒虫草<亚香棒虫草;人体健康风险评估结果表明,对于心血管和神经系统,1批冬虫夏草(野生品)全草中Pb、Cd、As联合暴露产生的累积健康风险需被进一步关注。结论:冬虫夏草及其近缘品重金属污染评价,以及人体健康风险评估方法,可为中药安全性评价及相关限量标准的制修订提供参考。

复合零假设下的修正Berk-Jones检验

首先给出带估计参数的上界型和积分型两种修正Berk-Jones拟合优度检验统计量,接着在复合零假设下研究了这两种检验统计量的渐近分布.所得结论可以为进一步讨论非参数似然比拟合优度检验提供较好的理论基础.

修正Berk-Jones检验统计量在零假设下的极限分布

讨论上界型修正Berk-Jones(RBJ)拟合优度检验统计量在简单零假设下的极限分布后,给出一种新的积分型RBJ检验统计量,并研究这种统计量在简单零假设下的极限分布,然后对这两种RBJ型检验与其他常用检验的功效进行模拟比较。模拟结果显示,两种RBJ型检验在我们所作的大多数模拟情况下不比常用的拟合优度检验差。

Makowski—Berkes不等式的变形

本世纪六十年代初,A.Makowski和J.Berkes给出了不等式 （（ak+bk+ck）/3）1/k≤31/2R,（1）对每个三角形成立的充要条件; k≤ln9-ln4/ln4-ln3.（2） 当k】0时,我们将（1）等价变形: ak+bk+ck/3≤(31/2abc/4△)k,（3）

银耳皂角米果冻的配方优化

银耳和皂角米都是具有营养与保健功能的食品。以银耳、皂角米、蔗糖等为主要原料,添加卡拉胶、魔芋胶等辅料制作银耳皂角米果冻。采用单因素试验及Box-behnken方法进行相关研究分析,得到最优配方如下:银耳添加量19.06%,皂角米添加量6.53%,复配胶为卡拉胶、魔芋胶(卡拉胶、魔芋胶=2∶2)添加量为0.41%,柠檬酸添加量1%(配成10%的溶液),蔗糖添加量12%,银耳皂角米果冻色泽均匀、表面光滑、弹性良好、酸甜适宜,具有银耳皂角米的独特风味。

一种特殊虫草与冬虫夏草的表型和DNA条形码特征比较分析及鉴别方法研究

目的:通过对子座和虫体部分进行表型与DNA条形码序列分析,探讨一种发现于四川的特殊冬虫夏草(以下简称特殊虫草)与常见冬虫夏草的区别。方法:体视显微镜观察虫草样品的外部特征;聚合酶链式反应(PCR)扩增得到真菌部位内转录间隔区(ITS)序列和宿主蝙蝠蛾昆虫的细胞色素氧化酶Ⅰ(COⅠ)序列;利用CodonCode Aligner和MEGA软件进行序列分析,建立邻接(NJ)系统进化树;对ITS序列进行限制性内切酶图谱分析,寻找具有鉴别意义的酶切位点,并通过PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)鉴别进行验证。结果:特殊虫草与常见冬虫夏草相比,虫体头部的颜色明显不同;子座真菌的ITS序列存在7个差异位点,虫体COⅠ序列存在56个差异位点,基于ITS序列及COⅠ序列的NJ系统进化树分析均显示,两者不能聚为一支;在两者差异区域,冬虫夏草存在1个XhoⅠ的酶切位点,因此其ITS序列的PCR产物可被限制性内切酶XhoⅠ切割为2个片段,特殊虫草不能被XhoⅠ切割,所以酶切前后的PCR产物在琼脂糖凝胶图上没有变化,通过该方法可对两者进行鉴别。结论:发现了一种特殊虫草,其与常见冬虫夏草的真菌子座和宿主蝙蝠蛾昆虫部分均有明显不同,并为鉴别两者提供了有效方法。

基于高通量测序的人工培殖冬虫夏草僵虫颜色变化转录组分析

目的:探索人工培殖冬虫夏草Cordyceps sinensis(BerK.)Sacc.外观品质形成的分子基础。方法:以重庆和康定人工培殖冬虫夏草僵虫为材料,利用Illumina Hiseq 2500高通量测序技术进行转录组测序分析,基于差异倍数(FC)和错误发现率(FDR)筛选差异表达基因,具体筛选条件为|log2FC|>1、FDR<0.05。结果:共获得21942个转录本,利用DEGSeq筛选获得1575个差异表达基因,其中上调表达基因626个、下调表达基因949个;基因本体(GO)数据库和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析结果显示,这些差异表达基因主要集中于氨基酸代谢、折叠-分选-降解、糖代谢、转运和分解代谢、辅酶因子和微生物代谢等途径;筛选到66个颜色变化差异表达基因,包含46个氧化还原酶活性相关基因、12个过氧化物酶体相关基因、3个单加氧酶活性调节相关基因、3个黑化反应相关基因、2个活性氧代谢相关基因,其中tyr1、TYR基因可能是冬虫夏草僵虫颜色变化的关键功能基因。结论:利用高通量测序技术和生物信息分析获得了人工培殖冬虫夏草僵虫转录组信息特征,为阐明人工培殖冬虫夏草僵虫颜色变化的调控机制研究提供参考。

青海省冬虫夏草蕴藏量及产地适宜性区划分析系统的设计与实现

目的:预测青海省冬虫夏草产区资源蕴藏量和产地适宜性区划分析,设计“青海省冬虫夏草蕴藏量及产地适宜性区划分析系统”。方法:基于地理信息技术的组件式开发方式,以最大信息熵模型和青海省冬虫夏草蕴藏量的核心算法搭建C/S架构分析系统。结果:形成了以冬虫夏草采样点的空间分布和密度数据为依据,以生态环境因子库为基础,能够对冬虫夏草进行多维度、定量化、空间化分析的“青海省冬虫夏草蕴藏量及产地适宜性区划分析系统”。结论:建立的分析系统可预测青海省冬虫夏草的资源蕴藏量,并对青海省冬虫夏草进行产地适宜性区划分析。

冬虫夏草与虫草菌丝体的研究进展与前景

冬虫夏草属麦角菌科虫草属真菌类,是冬虫夏草菌寄生于蝙蝠蛾幼虫体内而产生的子座及其寄主幼虫尸体的复合物。天然冬虫夏草味甘性平,甘平质润,作用平和,补益肾肺,其功效缓和、滋而不腻,具有很好的益补作用。本文就冬虫夏草生长特性、产生过程、其寄主蝙蝠蛾、冬虫夏草无性型、冬虫夏草的主要化学成分及药理作用、人工培育与发酵等进行阐述,探讨用低成本高药效性的虫草菌丝发酵产物替代昂贵的天然冬虫夏草的可行性,以期为研发工作提供参考。

碱溶性银耳粗多糖的提取及其清除自由基作用的研究

本实验研究了碱溶性银耳粗多糖(crude alkai-soluble tremella polysaccharide,CATP)的提取及其清除自由基的作用。利用响应面软件进行实验设计,确定最佳提取方案为:提取时间3.56h,NaOH浓度0.76mol/L,液固比81.89。同时考察了碱溶性银耳粗多糖和水溶性银耳粗多糖(tremella polysaccharide,TP)对DPPH(二苯代苦肼基自由基)、羟基自由基、超氧自由基的清除作用。结果表明,碱溶性银耳粗多糖具有良好的抗氧化能力,并且随着多糖浓度的增高抗氧化性增强。

银耳碱提多糖抗氧化活性的研究

目的对从银耳孢子发酵物中用碱液提取得到的4个多糖组份的抗氧化活性进行研究。方法采用清除羟基自由基实验、清除超氧阴离子自由基实验、抗H2O2诱导的红细胞氧化溶血实验考察4个多糖组份的抗氧化活性。结果在H2O2引起的红细胞溶血试验中,以蒸馏水溶血率为100%,TFFB-A、TFFB-B、TFFB-C、TFFB-D溶血率分别为21.4%、31.2%、28.5%、25.6%;在对超氧阴离子自由基(O2.)的清除作用实验中,TFFB-A、TFFB-B、TFFB-C、TFFB-D最大清除率分别为21.4%、28.4%、36.6%、53.0%;在清除羟基自由基实验中,TFFB-A、TFFB-B、TFFB-C、TFFB-D的EC50分别为233.6mg/L、603mg/L、191mg/L、195mg/L。结论4个多糖组分均具有一定的清除.OH、O2.和抑制红细胞溶血的活性。

冬虫夏草(Cordyceps sinensis)的随机扩增多态DNA及其遗传分化

本文对来自青藏高原3个区域5个具有代表性地方的13个冬虫夏草(Cordyceps sinensis[Berk.] Sacc.)样本进行随机扩增多态DNA(RAPD)分析。19个随机引物获得的RAPD谱带清晰并呈现多态,单个引物获得的RAPD片段数在3～10个之间。该19个引物在每个样本中扩增的RAPD片段总数平均约为65个。基于遗传距离分析,受试的13个冬虫夏草样本中,来自同一地方的样本间遗传差异甚微,同一区域不同地方的样本间遗传差异较大,不同区域的样本间遗传差异最大。这说明冬虫夏草地理群体间存在着遗传分化。应用UPGMA和NJ方法构建的分子系统树显示,来自5个地方的冬虫夏草实际上可以归并为显著不同的3个组,对应于样本来源的3个区域,提示RAPD标记在冬虫夏草群体中有显著的地区特异性。我们的结果还表明,冬虫夏草地理群体间的遗传差异度与地理距离呈正相关。因此,RAPD作为有效的遗传标记,可用于研究冬虫夏草的遗传多样性、起源以及系统演化等。

冬虫夏草抗肿瘤作用研究进展

综述冬虫夏草抗肿瘤作用及化学成分的研究进展 ,分析了冬虫夏草抗肿瘤活性成分及其作用机制。

芽孢杆菌对黄瓜霜霉病的防治效果研究

经黄瓜霜霉病孢子囊萌发抑制试验明确,芽孢杆菌菌株Z-X-3、Z-X-10对黄瓜霜霉病菌有较强拮抗作用。离体叶片法和温室防病试验表明,两菌株对黄瓜霜霉病有较好的防治效果,相对保护效果分别达46.42％、41.55％;治疗效果分别达46.30％、44.44％,高于农药克霜氰的31.81％、37.03％。

古尼虫草多糖提取分离及初步分析

本文用30%乙醇溶液作提取剂,从古尼虫草菌丝体中提取多糖,提取液经去脂、去蛋白、醇析后得两种粗多糖CPS-50,CPS-70。利用DEAE-Sephadex A-25柱色谱对两种粗多糖进行分离纯化,得纯多糖CPS-1,CPS-2。苯酚-硫酸法测定糖含量,紫外光谱分析证明其纯度,红外光谱显示其具有多糖类的特征吸收峰。多糖降解后经薄层分析表明,降解的虫草多糖由葡萄糖或(和)甘露糖组成。

毛细管区带电泳法测定冬虫夏草中的腺苷、腺嘌呤和尿嘧啶

建立了毛细管区带电泳法测定天然和人工冬虫夏草中腺苷、腺嘌呤和尿嘧啶含量的分析方法。采用15mmol L硼砂 +14mmol L磷酸二氢钠 +5 %(V V)甲醇 (pH =9.5 )作为缓冲体系 ,在电压为 18kV和检测波长为 2 5 4nm的条件下 ,冬虫夏草提取液中的腺苷、腺嘌呤和尿嘧啶实现了基线分离。定量分析表明 ,3种成分的校正峰面积与质量浓度呈较好的线性关系 (r≥ 0 .9991)。考察了缓冲溶液的pH值、浓度及有机改性剂对腺苷、腺嘌呤和尿嘧啶迁移行为的影响。

冬虫夏草人工培殖的研究概况

概述了冬虫夏草菌种的繁殖、虫种的繁育、菌和虫的结合以及冬虫夏草代用品的研究现状;探讨了人工培殖冬虫夏草2种模式的优、缺点;提出了目前冬虫夏草人工培殖存在的问题和未来的发展方向,以期为研究冬虫夏草的人工培殖提供理论参考。

银耳碱提多糖抗氧化活性的研究

目的对从银耳孢子发酵物中用碱液提取得到的4个多糖组分TFFB-A、TFFB-B、TFFB-C、TFFB-D的抗氧化活性进行研究。方法采用清除羟基自由基(·OH)、清除超氧阴离子自由基(O2)、抗H2O2诱导的红细胞氧化溶血试验,考察4个多糖组分的抗氧化活性。结果TFFB-A、TFFB-B、TFFB-C、TFFB-D的溶血率分别为21.4%,31.2%,28.5%,25.6%;最大清除率分别为21.4%,28.4%,36.6%,53.0%;EC50分别为233.6,603,191,195mg/L。结论4个多糖组分均具有一定的清除·OH、O2和抑制红细胞溶血的活性。

古尼虫草抗肿瘤活性成分的提取分离及活性测定

虫草是一类珍贵的生物资源,本实验对古尼虫草菌丝体甲醇提取物的抗肿瘤活性成分进行了研究。通过甲醇浸提、正己烷、乙酸乙酯萃取得到古尼虫草甲醇粗提物0.6194g,其得率为2.06%。将得到的甲醇粗提物用乙醚:正己烷:甲醇=5:5:1的溶液为洗脱剂进行硅胶柱层析分离纯化,获得3个组分(FB1、FB2、FB3)。通过红外光谱和核磁共振H谱对分离组分FB3进行了初步检测,结果显示为甾体类化合物。采用MTT比色法检测分离组分FB3的抗肿瘤活性,发现其对MCF-7和HL-7702细胞株有抑制作用,最强抑制率达84.54%。

鸡枞菌多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的探讨鸡枞菌多糖(TAP)对环磷酰胺所致免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法以黄芪多糖(APS)为阳性对照,用不同剂量的TAP对免疫抑制小鼠进行腹腔注射,检测其腹腔巨噬细胞吞噬功能,免疫器官指数、血清溶血素、T淋巴细胞亚群、细胞因子、脾淋巴细胞增殖等免疫指标。结果 TAP在5～20 g.L-1浓度范围内不同程度增强巨噬细胞吞噬功能及提高免疫器官指数,且有剂量依赖性;20 g.L-1TAP可明显降低免疫低下小鼠CD4+/CD8+比值,并使IL-2、IFN-γ水平分别上升312.3%和88.1%,同时降低IL-4水平;TAP能明显提高脾淋巴细胞增殖能力。结论 TAP可提高免疫抑制小鼠体液及细胞免疫功能,且效果优于APS。