过表达Bestrophin 3对皮质类固醇诱导的股骨头坏死保护作用及其机制

目的探讨与评价过表达Bestrophin 3对皮质类固醇诱导的股骨头坏死(osteonecrosis of the femoral head,ONFH)保护作用及其机制。方法根据纳入标准和排除标准选取本院于2017年2月至2017年12月期间就诊的ONFH患者术后股骨头骨组织50例作为观察组,股骨颈骨折患者自愿捐赠的股骨头骨组织50例作为对照组,采集两组标本的骨髓基质细胞,使用PCR方法检测骨髓基质细胞Bestrophin 3的表达水平。利用分子生物学手段构建Bestrophin 3不同表达水平的细胞株,通过MTT检测细胞生存率方法比较不同细胞株中细胞生存率。结果观察组中的股骨头骨组织Bestrophin 3相对表达量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。高表达Bestrophin 3的细胞株细胞生存率比较高,差异有统计学意义(P<0.05),且细胞生存率与Bestrophin 3表达量呈正相关(P<0.01)。结论Bestrophin 3在皮质类固醇性股骨头坏死骨组织中的呈现高表达状况,Bestrophin 3表达量与细胞生存率呈正相关,高表达Bestrophin 3对细胞具有保护作用。

Bestrophin 3在激素性股骨头坏死中的作用评价

目的:探讨与评价Bestrophin 3在激素性股骨头坏死(Osteonecrosis of the femoral head,ONFH)中的作用。方法:研究时间为2017年8月-2018年6月,收集河北医科大学第一医院收治的股骨颈骨折患者自愿捐赠的股骨头骨组织32例作为对照组,激素性股骨头坏死患者术后股骨头骨组织32例作为观察组,采集两组标本的骨髓基质细胞,使用PCR方法检测骨髓基质细胞Bestrophin 3的表达水平。结果:观察组中的股骨头骨组织Bestrophin 3 mRNA相对表达量高于对照组,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Bestrophin 3作为一种氯离子通道抑制剂,在激素性股骨头坏死组织中的呈现高表达状况。

Bestrophin 3高表达促进人肝癌细胞株HepG2的凋亡

目的:研究Bestrophin 3高表达对人肝癌细胞株HepG2凋亡能力的影响,并初步探讨其作用机制。方法:将Bestrophin 3腺病毒以感染复数(multiplicity of infection,MOI)10、20、40、80转染HepG2细胞株,Western blotting检测转染细胞内Bestrophin 3的表达,确定最佳MOI值。设对照组(未转染病毒)、LacZ组(转染携带LacZ的对照腺病毒载体)、Ad-Best3组(以最佳MOI值转染Bestrophin 3腺病毒),CCK-8法和流式细胞术分别检测Bestrophin 3过表达对HepG2细胞增殖、凋亡的影响,Western blotting检测Bestrophin 3过表达对HepG2细胞内Bcl-2、Bax以及细胞色素C表达的影响,JC-1染色观察Bestrophin 3过表达对HepG2细胞线粒体膜电位的影响。结果:Bestrophin 3腺病毒转染HepG2细胞的最佳MOI为40,转染后细胞过表达Bestrophin 3。Ad-Best3组的细胞存活率显著低于对照组和Lac Z组[(79.37±1.76)%vs(98.67±3.02)%、(99.67±3.25)%,均P<0.05],而其细胞凋亡率显著升高[(29.47±2.37)%vs(5.47±0.37)%,(4.95±0.44)%,均P<0.05]。AdBest3组HepG2细胞内Bcl-2的蛋白表达显著减少,Bax的蛋白表达显著增加,导致Bcl-2/Bax比值显著降低(0.32±0.047 vs1.00±0.00,P<0.05);Ad-Best3组HepG2细胞的线粒体膜电位显著降低[(0.64±0.09)%vs(1.00±0.00)%,P<0.05],同时线粒体中细胞色素C明显减少(P<0.05),而细胞质中细胞色素C水平显著升高(P<0.05)。结论:过表达Bestrophin 3可能通过促使线粒体释放细胞色素C从而促进肝癌细胞株HepG2的凋亡。

血管平滑肌细胞的容积调节Cl^-通道生物学特性及功能研究进展

血管平滑肌细胞容积调节Cl^-通道(VRCC)通过PI3K/Akt信号通路促进细胞的增殖反应,通过线粒体信号通路保护细胞凋亡,通过JNK/P38/MAPK信号通路促清道夫受体表达和摄取ox-LDL功能增强导致巨噬细胞形成,参与动脉粥样硬化。VRCC通过促进细胞增殖、细胞迁移和外基质积聚,抑制细胞凋亡,参与脑血管重构。VRCC分子基础复杂,至今仍未完全明了。VRCC在不同的细胞和组织是多样性的,而不是一个单一的广泛存在的通道,可由细胞类型和组织特异性亚单位成分组成,在血管平滑肌细胞LRRC8A和ClC-3可能是两个不同的VRCC上的亚单位成分。ClC-3容积调节Cl^-通道受integrin-Src通路使ClC-3上284位酪氨酸磷酸化以及Rho/Rh A-ROCK通路使ClC-3第543位苏氨酸磷酸化两条不同通路调节。