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Gengnianchun recipe inhibits apoptosis of pheochromocytoma cells from beta-amyloid 25-35 insult, better than monotherapies and their compounds 被引量:1
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作者 Jun Li Wenjun Wang +1 位作者 Dajin Li Wenjiang Zhou 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2011年第36期2815-2821,共7页
This study aims to determine and compare the protective effects of Gengnianchun recipe drug serum and compounds of its representative drug monotherapies against sympathetic nerve pheochromocytoma cell line PC12 cells ... This study aims to determine and compare the protective effects of Gengnianchun recipe drug serum and compounds of its representative drug monotherapies against sympathetic nerve pheochromocytoma cell line PC12 cells damaged by beta-amyloid 25-35 at the cellular apoptosis and related signal pathway levels. PC12 cells cultured with medicated rat serum showed enhanced cell viability and reduced cellular apoptosis rates compared with those of monotherapies and their compounds. Furthermore, Gengnianchun recipe up-regulated expressions of anti-apoptotic protein Bcl-2, estrogen receptor-beta and phosphorylated extracellular-signal-regulated kinase 1/2; and down-regulated expressions of pro-apoptotic proteins Bax and caspase-3. Gengnianchun recipe was superior to representative drug monotherapies, such as paeoniflorin, berberine, timosaponin A-III, icariine and their compounds in protecting PC12 cells. Mitogen-activated protein kinase blocker and estrogen receptor antagonist were found to reverse the above effects of Gengnianchun recipe. The experimental findings indicate that, Gengnianchun recipe protects PC12 cells from beta-amyloid 25-35 insult; its inhibitory effect on apoptosis may be achieved through the mitogen-activated protein kinase and estrogen receptor pathways. 展开更多
关键词 Gengnianchun recipe Alzheimer's disease apoptosis medicated serum beta-amyloid 25-35 estrogen receptor mitogen-activated protein kinase
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Aβ31-35和ApoE4对体外大鼠基底前脑神经元存活和生长的协同作用 被引量:6
2
作者 郭文平 阮奕文 +2 位作者 周丽华 谢瑶 姚志彬 《解剖学报》 CSCD 北大核心 2000年第3期193-197,I001,共5页
目的 探讨 β-淀粉样蛋白 (Aβ)和载脂蛋白 (Apo E4)对基底前脑神经元存活和生长的影响 ,研究Alzheimer病 (AD)发病的细胞分子机制。 方法 体外培养基底前脑神经细胞 ,MTT法和免疫细胞化学方法结合体视学分析 ,观察 Aβ31- 35和 Apo... 目的 探讨 β-淀粉样蛋白 (Aβ)和载脂蛋白 (Apo E4)对基底前脑神经元存活和生长的影响 ,研究Alzheimer病 (AD)发病的细胞分子机制。 方法 体外培养基底前脑神经细胞 ,MTT法和免疫细胞化学方法结合体视学分析 ,观察 Aβ31- 35和 Apo E4对基底前脑神经元存活及胞体和突起生长的影响。 结果  (1) MTT法测得的 Aβ- 31- 35 +Apo E4组的 A值 ,与对照组比较明显减小 (P<0 .0 5 ) ,说明神经元的存活力降低 ,存活数量减少 ;(2 )Aβ31- 35 +Apo E4组的神经元胞体最长径和最短径明显低于对照组和 Apo E4组 (P<0 .0 5 ) ;平均突起长度也明显低于对照组、Apo E4组和 Aβ31- 35 (10 μmol/ L)组 (P<0 .0 1) ;(3) Aβ31- 35 (2 0 μm ol/ L)组平均突起长度比对照组、Apo E4组和 Aβ31- 35 (10 μmol/ L)组明显减小 (P<0 .0 1) ;(4) Aβ31- 35 +Apo E4组和 Aβ31- 35 (2 0 μm ol/ L)组的胆碱能神经元最长突起长度、总突起长度及平均突起长度均明显低于对照组 (P<0 .0 1) ;且这两组的 Ch AT阳性神经元的胞体平均灰度也明显低于对照组 (P<0 .0 5 ) ,说明 Ch AT的活性下降。单独 Apo E4对基底前脑神经元的存活和生长均无明显影响。 结论  Aβ31- 35 +Apo E4比单独 Aβ31- 展开更多
关键词 基底前脑 胆碱能神经元 早老性痴呆 31-35
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Aβ_((31-35))和ApoE_4对培养大鼠海马神经元的存活和生长的影响 被引量:4
3
作者 郭文平 周丽华 +1 位作者 谢瑶 姚志彬 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期261-264,共4页
为探讨β-淀粉样蛋白 ( Aβ)和载脂蛋白 E4( Apo E4)对培养大鼠海马神经元的作用 ,本文采用了神经细胞培养、MTT比色法、免疫组化及图象分析等技术进行了研究。结果显示 :( 1) MTT法测得 Aβ( 3 1 - 3 5) ( 10 μmol/ L) +Apo E4( 10 μ... 为探讨β-淀粉样蛋白 ( Aβ)和载脂蛋白 E4( Apo E4)对培养大鼠海马神经元的作用 ,本文采用了神经细胞培养、MTT比色法、免疫组化及图象分析等技术进行了研究。结果显示 :( 1) MTT法测得 Aβ( 3 1 - 3 5) ( 10 μmol/ L) +Apo E4( 10 μg/ ml)和 Aβ( 3 1 - 3 5)( 2 0μmol/ L ) +Apo E4( 10μg/ ml)的 OD值 ,分别为 0 .197± 0 .0 2 1和 0 .191± 0 .0 2 4,明显低于对照组 ( 0 .2 2 9± 0 .0 3,P<0 .0 5 )。( 2 )这两组神经元胞体的最长径分别为 ( 10 .0 7± 1.98)μm和 ( 10 .0 1± 1.6 8)μm;最短径分别为 ( 6 .40± 0 .77)μm和 ( 6 .2 8± 0 .89) μm,明显低于对照组、Apo E4组、Aβ( 3 1 - 3 5) 组的最长径和最短径 ( P<0 .0 5 ) ;其突起平均长度分别为 ( 2 6 .36± 7.73) μm和 ( 2 3.86± 7.2 9)μm,明显低于对照组 ( 30 .88± 9.79)μm、Apo E4组 ( 30 .6 0± 7.30 )μm以及 Aβ( 3 1 - 3 5) ( 10μmol/ L )组 ( 2 8.34± 4.40 )μm( P<0 .0 5 )。 ( 3) Aβ( 3 1 - 3 5) ( 2 0 μmol/ L)组的突起平均长度为 ( 2 6 .81± 5 .42 ) μm,也明显低于对照组 ( 30 .88± 9.79) μm和Apo E4组 ( 30 .6 0± 7.30 )μm ( P<0 .0 5 )。本研究结果提示 ,Aβ( 3 1 - 3 5) +Apo E4对神经元的抑制作用较 Aβ( 展开更多
关键词 Β-淀粉样蛋白 载脂蛋白E4 海马 大鼠 神经元 存活 生长 AD 病理
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β-淀粉样蛋白31-35和载脂蛋白E4对大鼠海马神经元存活和生长的影响 被引量:1
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作者 郭文平 周丽华 +2 位作者 阮奕文 谢瑶 姚志彬 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期197-201,共5页
目的 :研究 β 淀粉样蛋白 (Betaamyloidpritein ,Aβ)与载脂蛋白E4(ApolipoproteinE ,ApoE4)对神经元的共同作用 ,探讨老年性痴呆发病的细胞分子机制。材料与方法 :体外培养神经细胞 ,采用MTT比色法和免疫组化标记 ,结合图像分析技术 ... 目的 :研究 β 淀粉样蛋白 (Betaamyloidpritein ,Aβ)与载脂蛋白E4(ApolipoproteinE ,ApoE4)对神经元的共同作用 ,探讨老年性痴呆发病的细胞分子机制。材料与方法 :体外培养神经细胞 ,采用MTT比色法和免疫组化标记 ,结合图像分析技术 ,研究Aβ3 1 3 5和ApoE4对海马神经元存活和生长的作用。结果 :(1 )Aβ3 1 3 5(1 0 0 μmol/L) +ApoE4(1 0 μg/ml)和Aβ3 1 3 5(2 0 μmol/L) +ApoE4(1 0 μg/ml)的OD值 ,分别为 0 .1 97± 0 .0 2 1和 0 .1 91± 0 .0 2 4,明显低于对照组 0 .2 2 9± 0 .0 0 3 μm(P <0 .0 5 )。 (2 )这两组神经元胞体的最长径分别为 1 0 .0 7± 1 .98μm和 1 0 .0 1± 1 .68μm ;最短径分别为 6.40± 0 .77μm ,6.2 8± 0 .89μm ,明显低于对照组 1 2 .73± 3 .0 0 μm、7.0 5± 1 .0 4μm ,Aβ3 1 3 5组 1 2 .0 9± 2 .45 μm、7.0 1± 1 .0 2 μm ,最长径和最短径 (P <0 .0 5 ) ;(3 )两组神经元突起平均长度分别为 2 6.3 6± 7.73 μm和2 3 .86± 7.2 9μm ,明显低于对照组 3 0 .88± 9.79μm、2 8.3 4± 4.40 μm ,P <0 .0 5。 (4 )Aβ3 1 3 5(2 0 μmol/L)组的平均突起长度 (2 6.81± 5 .42 μm) ,明显低于对照组和ApoE4组 3 0 .60± 7.3 0 μm(P <0 .0 5 )。 展开更多
关键词 海马 Β-淀粉样蛋白 载脂蛋白E4 神经元 老年性痴呆
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β-淀粉样蛋白31-35片段对海马神经元分离膜片Ca^(2+)激活大电导钾通道的抑制 被引量:8
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作者 祁金顺 乔健天 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期198-204,共7页
为了确定β-淀粉样蛋白(AβP)在影响神经元电生理特性并导致神经毒作用时的最短活性序列,实验采用膜片钳技术,在急性分离的大鼠海马CAI区锥体细胞的“内面向外”式膜片上,观察了AβPR的31-35和25-35片段对Ca... 为了确定β-淀粉样蛋白(AβP)在影响神经元电生理特性并导致神经毒作用时的最短活性序列,实验采用膜片钳技术,在急性分离的大鼠海马CAI区锥体细胞的“内面向外”式膜片上,观察了AβPR的31-35和25-35片段对Ca2+激活大电导钾(BK)通道活动的影响。结果显示,浴液中给予 5μmol/L的AβP 31-35后,BK通道的平均开放概率(Po)和开放频率在1~3min内分别减少了85.8%(P<0.01)和72.1%(P<0.01);平均开放时间减少了41.1%(P<0.01);平均电流幅度则无明显改变(P>0.05);给子同样摩尔浓度的AβP 25-35后,BK通道平均Po减少了85.5%(P<0.01),平均开放时间减少了51.4%,(P<0.05)。结果提示,两种AβP片段对海马神经元BK通道具有抑制作用,这可能与AβP的神经毒性作用有关;AβP31-35片段可能是AβP分子中影响细胞电生理特性的最小活性序列。 展开更多
关键词 Β-淀粉样蛋白 AβP31-35 C^2+a激活 大电导钾通道 海马神经元 膜片钳
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雷帕霉素改善Aβ31-35所致小鼠昼夜节律紊乱 被引量:1
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作者 王昌图 张蕊 +4 位作者 原媛 赵今 任亚楠 王丽 王晓晖 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期653-659,共7页
目的:观察大环内酯类抗生素雷帕霉素(Rapa)对β-淀粉样蛋白31-35(Aβ31-35)引起的C57BL/6小鼠昼夜节律紊乱及小鼠海马神经元细胞系HT22中Per2表达异常的影响。方法:选取6~8周雄性C57BL/6小鼠进行跑轮行为学实验,分析Rapa在改善Aβ31-3... 目的:观察大环内酯类抗生素雷帕霉素(Rapa)对β-淀粉样蛋白31-35(Aβ31-35)引起的C57BL/6小鼠昼夜节律紊乱及小鼠海马神经元细胞系HT22中Per2表达异常的影响。方法:选取6~8周雄性C57BL/6小鼠进行跑轮行为学实验,分析Rapa在改善Aβ31-35所致小鼠昼夜节律紊乱中的作用。将HT22神经细胞随机分为对照组、Aβ31-35组、Rapa预处理组和Rapa单独处理组,CCK-8法检测细胞活力。采用real-time PCR法检测上述各组细胞于circadian time(CT)4、CT8、CT12、CT16、CT20和CT24的Per2 mRNA表达水平,通过Western blot方法检测Per2 mRNA表达差异最大时点CT16的PER2蛋白表达水平。结果:与对照组相比,Aβ31-35引起小鼠昼夜节律紊乱,自由运转周期显著延长;Rapa预处理后,小鼠的昼夜节律紊乱情况有所改善,自由运转周期显著降低。Aβ31-35引起HT22细胞活力显著降低且具有剂量依赖性;Rapa预处理后有效逆转Aβ31-35诱导的HT22细胞存活率下降(P<0.05)。经Aβ31-35处理后,HT22细胞Per2的mRNA水平在CT16处较对照组明显降低;Rapa预处理后Per2的mRNA异常表达得到显著改善。与对照组相比,Aβ31-35组CT16时Per2蛋白水平显著降低;与Aβ31-35组相比,Rapa预处理组Per2蛋白水平在一定程度上升高(P<0.05)。结论:Rapa可以有效缓解Aβ31-35所致C57BL/6小鼠昼夜节律紊乱,并有效改善Aβ31-35所致HT22细胞中Per2的异常表达。 展开更多
关键词 昼夜节律 雷帕霉素 β-淀粉样蛋白31-35 Per2蛋白
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人参皂苷Rb1通过JNK/p38 MAPK途径减轻Aβ_(25-35)诱导的胎鼠皮层神经元tau蛋白过度磷酸化 被引量:35
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作者 宋锦秋 陈晓春 +4 位作者 张静 黄天文 曾育琦 沈杰 陈丽敏 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期29-34,共6页
探讨在Aβ25-35(beta-amyloid peptide(25-35),Aβ25-35)诱导的拟阿尔茨海默病样胎鼠皮层神经元tau蛋白过度磷酸化中,人参皂苷Rb1对tau蛋白磷酸化及JNK/p38 MAPK的可能作用。应用蛋白免疫印迹和免疫细胞化学染色的方法,观察tau蛋白磷酸... 探讨在Aβ25-35(beta-amyloid peptide(25-35),Aβ25-35)诱导的拟阿尔茨海默病样胎鼠皮层神经元tau蛋白过度磷酸化中,人参皂苷Rb1对tau蛋白磷酸化及JNK/p38 MAPK的可能作用。应用蛋白免疫印迹和免疫细胞化学染色的方法,观察tau蛋白磷酸化和JNK(c-jun N-terminal kinase)/p38 MAPK的表达情况。凝聚态Aβ25-35(20μmol.L-1)作用于皮层神经元12 h,tau蛋白的磷酸化水平明显增高,同时JNK/p38 MAPK的总量及其活性形式——磷酸化JNK/p38 MAPK的蛋白表达水平也增加,人参皂苷Rb1可以减轻tau蛋白的磷酸化水平及JNK/p38MAPK的蛋白水平。人参皂苷Rb1可通过JNK/p38 MAPK途径减轻Aβ25-35诱导的tau蛋白过度磷酸化。 展开更多
关键词 人参皂苷RB1 Β淀粉样蛋白25-35 TAU蛋白 磷酸化 JNK/p38 MAPK
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凝聚态Aβ_(25~35)可通过JNK/p38 MAPK途径诱导胎鼠皮层神经元Tau蛋白过度磷酸化 被引量:7
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作者 宋锦秋 陈晓春 +4 位作者 张静 黄天文 曾育琦 沈杰 陈丽敏 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期532-536,共5页
目的 探讨JNK/p38MAPK在p淀粉样蛋白多肽片段25-35(Aβ25-35)诱导的阿尔茨海默病(AD)样胎鼠皮层神经元Tau蛋白过度磷酸化中的作用。方法 应用蛋白免疫印迹和免疫细胞化学染色的方法,观察Tau蛋白磷酸化和JNK/p38丝裂原活化的蛋白... 目的 探讨JNK/p38MAPK在p淀粉样蛋白多肽片段25-35(Aβ25-35)诱导的阿尔茨海默病(AD)样胎鼠皮层神经元Tau蛋白过度磷酸化中的作用。方法 应用蛋白免疫印迹和免疫细胞化学染色的方法,观察Tau蛋白磷酸化和JNK/p38丝裂原活化的蛋白激酶(JNK/p38MAPK)的表达情况。结果凝聚态Aβ25-35(20μmol/L)作用于皮层神经元12h,Tau蛋白sep396、Ser199/202、Thr205位点的磷酸化水平明显增高,同时JNK/p38MAPK的总量及其活性形式.磷酸化JNK/p38MAPK的蛋白表达水平也增加。结论 Aβ25-35可通过激活JNK/p38MAPK使Tau蛋白的磷酸化水平增高。 展开更多
关键词 β淀粉样蛋白多肽片段25-35 JNK/p38丝裂原活化的蛋白激酶 TAU蛋白 阿尔茨海默病 免疫印迹 免疫细胞化学 大鼠
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半枝莲黄酮对复合Aβ_(25-35)引起线粒体膜Bcl-2、Bax、Bcl-xL及Bak异常的干预作用 被引量:14
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作者 赵泓翔 郭可 +2 位作者 崔亚迪 吴晓光 商亚珍 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期2262-2266,共5页
目的:探讨半枝莲黄酮(SBF)对大鼠脑室注射β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)结合三氯化铝(Al Cl3)及重组人转化生长因子β1(rh TGF-β1)(复合Aβ25-35)引起的皮层细胞线粒体膜凋亡相关蛋白异常的干预作用。方法:雄性SD大鼠手术当天脑室注射1... 目的:探讨半枝莲黄酮(SBF)对大鼠脑室注射β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)结合三氯化铝(Al Cl3)及重组人转化生长因子β1(rh TGF-β1)(复合Aβ25-35)引起的皮层细胞线粒体膜凋亡相关蛋白异常的干预作用。方法:雄性SD大鼠手术当天脑室注射10 ng rh TGF-β1,手术第2天开始脑室分别于上午注射Aβ25-35(4μg/d,连续注射14 d)、下午注射1%Al Cl3(3μL/d,连续注射5 d)建立神经损伤模型。术后第49天模型成功大鼠随机分为模型对照组和3个剂量SBF组。药物组大鼠分别连续灌胃SBF(35、70和140 mg/kg)36 d,每日1次。大鼠末次给药60 min后断头处死,蛋白印迹法测定各组大鼠皮层细胞线粒体膜Bcl-2、Bax、Bcl-x L和Bak的蛋白表达水平。结果:大鼠脑室注射复合Aβ25-35可使大鼠皮层细胞线粒体膜Bcl-2和Bcl-x L蛋白表达水平明显降低(P<0.05),使Bax和Bak蛋白表达水平明显增加(P<0.01)。然而,35、70和140 mg/kg SBF灌胃36 d,可以不同程度地逆转复合Aβ25-35所致上述改变。结论:脑室注射Aβ25-35联合Al Cl3和rh TGF-β1可引起线粒体膜凋亡因子Bcl-2、Bax、Bcl-x L和Bak异常改变,SBF能够逆转上述凋亡因子异常改变。 展开更多
关键词 半枝莲黄酮 Β-淀粉样蛋白25-35 三氯化铝 重组人类转化生长因子-β1 线粒体凋亡通路
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吡格列酮对Aβ_(25-35)引起的皮层神经元损伤保护作用部分机制的研究 被引量:3
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作者 董燕 丁奇 +3 位作者 金英 隋海娟 刘卓 闫恩志 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1652-1657,共6页
目的研究吡格列酮对抗淀粉样β蛋白片段25-35(Amyloid-β,Aβ25-35)所致培养皮层神经元损伤作用的机制。方法取培养7d大鼠乳鼠大脑皮层神经元,Aβ组加入Aβ25-35(20μmol.L-1)作用24h;吡格列酮组和各种阻断剂组,先加入吡格列酮(0.1、1... 目的研究吡格列酮对抗淀粉样β蛋白片段25-35(Amyloid-β,Aβ25-35)所致培养皮层神经元损伤作用的机制。方法取培养7d大鼠乳鼠大脑皮层神经元,Aβ组加入Aβ25-35(20μmol.L-1)作用24h;吡格列酮组和各种阻断剂组,先加入吡格列酮(0.1、1、10μmol.L-1)或各种阻断剂作用1h,然后加入Aβ25-35(20μmol.L-1)作用24h;正常对照组加入等量培养基。MTT法测定细胞存活率;免疫荧光染色法测定活性的caspase-3细胞内定位;Westernblot检测活性的caspase-3表达水平;Griess法测定培养细胞上清液中一氧化氮(NO)含量。结果神经元经NSE和NF200免疫荧光鉴定,其阳性率可达90%以上。Aβ25-35(20μmol.L-1)可使神经元细胞存活率下降、caspase-3表达明显增加,同时神经元培养液中的NO含量也明显增加。吡格列酮可明显抑制Aβ25-35诱导的神经元细胞存活率下降、抑制caspase-3表达的增加,吡格列酮还可明显抑制Aβ25-35诱导的神经元培养液中NO含量增加,且呈浓度依赖性。GW9662(10μmol.L-1)能明显对抗吡格列酮对Aβ25-35诱导的神经元细胞存活率下降、活性的caspase-3表达增加、NO增加的抑制作用。SP600125(5μmol.L-1)、SB203580(20μmol.L-1)和SMT(1mmol.L-1)可明显对抗Aβ25-35诱导的神经元细胞存活率下降及培养液中NO含量增加。结论吡格列酮能够明显的抑制Aβ25-35引起的皮层神经元损伤作用,这种作用可能与激活PPARγ受体、抑制JNK信号传导通路和p38MAPK信号传导通路有关。 展开更多
关键词 吡格列酮 淀粉样-β蛋白 阿尔采末病 一氧化氮 C-JUN氨基末端激酶 神经元
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水溶性β-淀粉样蛋白25-35片段诱致大鼠嗜铬细胞瘤细胞凋亡 被引量:8
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作者 邵梅 陈生弟 刘振国 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2002年第1期24-28,共5页
目的 探讨β-淀粉样蛋白 ( Aβ)在形成淀粉样沉积前对体外培养的 PC1 2细胞的毒性作用。方法 应用流式细胞仪检测 Aβ的剂量依赖性毒性 ;应用 DNA琼脂糖凝胶电泳、DNA末端标记和电镜判断 Aβ损伤细胞的途径。结果 流式细胞仪检测发... 目的 探讨β-淀粉样蛋白 ( Aβ)在形成淀粉样沉积前对体外培养的 PC1 2细胞的毒性作用。方法 应用流式细胞仪检测 Aβ的剂量依赖性毒性 ;应用 DNA琼脂糖凝胶电泳、DNA末端标记和电镜判断 Aβ损伤细胞的途径。结果 流式细胞仪检测发现随着 Aβ2 5 -35浓度的增加 ,PC1 2细胞的死亡率增加 ;加入 1 0 μmol/L Aβ2 5 -35 2 4 h后 ,经 TUNEL发现细胞核着色 ,并可见细胞核碎片 ;DNA琼脂糖凝胶电泳可见间隔 1 80~ 2 0 0 bp左右的梯度条带 ;电镜显示细胞核浓缩 ,胞浆内有空泡形成 ,胞浆内细胞器完好。结论  Aβ在形成纤维状沉积前即对神经细胞有毒性作用 ,可促进神经细胞的凋亡。 展开更多
关键词 可溶性淀粉样蛋白25-35片段 大鼠嗜铬细胞瘤细胞 凋亡 阿尔茨海默病
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脂氧素A4对Aβ_(25-35)所致N2a细胞损伤的保护作用初探 被引量:1
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作者 武强 吴乐 +4 位作者 濮捷 崔敏 徐志鹏 刘琴 陈芳 《神经损伤与功能重建》 2017年第4期283-285,289,共4页
目的:初步探讨脂氧素A4(LXA4)对β-淀粉样蛋白25-35(Aβ_(25-35))损伤N2a细胞的保护作用及其机制。方法:用不同浓度Aβ_(25-35)处理N2a细胞,建立阿尔茨海默病(AD)细胞损伤模型,通过细胞形态学观察、CCK-8法和Hoechst 33258染色来评价细... 目的:初步探讨脂氧素A4(LXA4)对β-淀粉样蛋白25-35(Aβ_(25-35))损伤N2a细胞的保护作用及其机制。方法:用不同浓度Aβ_(25-35)处理N2a细胞,建立阿尔茨海默病(AD)细胞损伤模型,通过细胞形态学观察、CCK-8法和Hoechst 33258染色来评价细胞模型是否构建成功。细胞分为对照组、模型组(20μmol/L Aβ_(25-35))和LXA4保护组(50、100、200 nmol/L)。采用CCK-8法检测N2a细胞的活性;荧光酶标仪检测N2a细胞内活性氧(ROS)水平;ELISA法检测细胞培养上清中白介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。结果:20μmol/L Aβ_(25-35)处理N2a细胞24 h可建立细胞损伤模型。LXA4保护组的细胞存活率均较模型组显著升高。与模型组相比,200 nmol/L LXA4保护组细胞内ROS水平显著降低(P<0.01);200 nmol/L LXA4保护组IL-10水平显著高于模型组(P<0.01);200 nmol/L LXA4保护组的TNF-α水平显著低于模型组(P<0.01)。结论:LXA4对Aβ_(25-35)损伤N2a细胞具有保护作用,其机制可能是抑制ROS水平以及调节炎症因子的表达。 展开更多
关键词 脂氧素A4 N2A细胞 Β-淀粉样蛋白25-35 阿尔茨海默病
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Aβ_(25~35)对培养主动脉血管平滑肌细胞的毒性研究 被引量:2
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作者 周小英 张微微 《北京医学》 CAS 2007年第4期224-227,共4页
目的探讨β-淀粉样蛋白25~35(amyloid-beta protein25~35,Aβ25~35)对体外培养血管平滑肌细胞(VSMC)的毒性作用。方法实验分对照组(生理盐水组)和Aβ25~35组(浓度分别为10、20、50、100μmol/L),分别培养1、3、10d,光镜下观察VSMC... 目的探讨β-淀粉样蛋白25~35(amyloid-beta protein25~35,Aβ25~35)对体外培养血管平滑肌细胞(VSMC)的毒性作用。方法实验分对照组(生理盐水组)和Aβ25~35组(浓度分别为10、20、50、100μmol/L),分别培养1、3、10d,光镜下观察VSMC形态学改变;MTT法检测细胞活力;检测乳酸脱氢酶(LDH)活力。结果VSMC在浓度为20μmol/L的Aβ25~35孵育3d后即出现退行性改变,细胞存活率下降,LDH活力增高,其程度均呈Aβ25~35浓度、孵育时间依赖性。结论Aβ25~35可致VSMC形态学改变、存活率降低、LDH活力增高,有细胞毒性作用。 展开更多
关键词 淀粉样β蛋白25~35 血管平滑肌细胞 活力 存活率 乳酸脱氢酶
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氯胺酮上调GSK-3β活性加重Aβ_(25-35)诱导的大鼠PC12细胞Tau蛋白过度磷酸化 被引量:2
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作者 许杰 张蕊 +3 位作者 岳云 左萍萍 杨楠 纪超 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2011年第5期509-514,共6页
目的探讨氯胺酮对凝聚态Aβ25-35诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)Tau蛋白过度磷酸化的影响及可能作用的机制。方法将培养的PC12细胞随机分为对照组(C)、10μmol/L Aβ25-35(A组)、1 mmol/L氯胺酮(K组)、氯胺酮和Aβ25-35(AK组),... 目的探讨氯胺酮对凝聚态Aβ25-35诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)Tau蛋白过度磷酸化的影响及可能作用的机制。方法将培养的PC12细胞随机分为对照组(C)、10μmol/L Aβ25-35(A组)、1 mmol/L氯胺酮(K组)、氯胺酮和Aβ25-35(AK组),作用时间均为6 h。MTT比色法测定细胞活力,蛋白免疫印迹检测Tau蛋白不同磷酸化位点和糖原合成激酶3β(GSK-3β)在Ser9位点的磷酸化(p-GSK-3βSer9)相对于GSK-3β的表达水平,用GSK-3β特异性抑制剂氯化锂(LiCl)干预。结果 AK组的细胞存活率显著低于其余组;Tau蛋白在Ser396、Ser404和Thr231位点的磷酸化水平显著高于A组(P<0.05)。LiCl可通过增加p-GSK-3βSer9的表达抑制上述变化。结论氯胺酮通过上调GSK3β的活性增加Aβ25-35诱导的大鼠PC12细胞Tau蛋白过度磷酸化。 展开更多
关键词 氯胺酮 TAU蛋白 PC12细胞 β淀粉样蛋白多肽片段25-35 GSK-3Β
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咪达唑仑对凝聚态Aβ25-35诱导的大鼠PC12细胞Tau蛋白过度磷酸化和凋亡蛋白的影响
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作者 许杰 张蕊 +3 位作者 岳云 左萍萍 杨楠 刘雁勇 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期334-339,共6页
目的探讨咪达唑仑对凝聚态Aβ25~35诱导的大鼠PC12细胞Tau蛋白过度磷酸化的影响及凋亡相关蛋白表达的变化。方法将培养的PC12细胞随机分为4组:对照组(C组);10μmol/L Aβ25~35(A组);20μmol/L咪达唑仑(M组);咪达唑仑和Aβ25~35(MA组)... 目的探讨咪达唑仑对凝聚态Aβ25~35诱导的大鼠PC12细胞Tau蛋白过度磷酸化的影响及凋亡相关蛋白表达的变化。方法将培养的PC12细胞随机分为4组:对照组(C组);10μmol/L Aβ25~35(A组);20μmol/L咪达唑仑(M组);咪达唑仑和Aβ25~35(MA组),作用时间均为6小时。四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞活力;用免疫印迹法和免疫细胞化学染色,观察咪达唑仑对Aβ25~35诱导的PC12细胞不同磷酸化位点Tau蛋白的表达、凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax)的表达和PC12细胞形态的变化。结果咪达唑仑作用于凝聚态Aβ25~35诱导的PC12可使凋亡相关蛋白Bax表达增高,Bcl-2表达降低。Tau蛋白Ser396、Ser404位点磷酸化水平显著增高(P<0.05)。结论咪达唑仑可增强凝聚态Aβ25~35诱导的大鼠PC12细胞Tau蛋白的过度磷酸化和细胞凋亡蛋白表达的增加。 展开更多
关键词 咪达唑仑 Bcl-2/Bax TAU蛋白 PC12细胞 β淀粉样蛋白多肽片段25~35 免疫印迹法 大鼠
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二十二碳六烯酸降低β淀粉样蛋白25-35致大鼠皮质神经元损伤
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作者 刘丽莉 王永 +2 位作者 胡为民 李世芳 张记君 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2011年第12期1346-1350,共5页
目的观察二十二碳六烯酸(DHA)对β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)致原代培养大鼠皮质神经元损伤的保护作用。方法原代培养Wistar大鼠皮质神经元,先后给予不同剂量的DHA(20、50和100μmol/L)及Aβ25-35(25μmol/L),用CCK-8比色法观察神经元... 目的观察二十二碳六烯酸(DHA)对β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)致原代培养大鼠皮质神经元损伤的保护作用。方法原代培养Wistar大鼠皮质神经元,先后给予不同剂量的DHA(20、50和100μmol/L)及Aβ25-35(25μmol/L),用CCK-8比色法观察神经元存活率,用激光扫描共聚焦显微镜观察细胞内游离钙离子浓度。结果 1)与对照组相比,Aβ25-35使细胞存活率明显下降(31%±6%,P<0.05);使细胞内游离钙离子浓度明显升高(249%±12%,P<0.05);2)孵育DHA可降低Aβ25-35引起的神经元存活率明显下降及细胞内游离钙离子浓度升高。结论 Aβ致细胞内钙超载是Aβ产生神经毒作用的一个方面,而DHA可部分拮抗Aβ25-35的神经毒作用。 展开更多
关键词 二十二碳六烯酸(DHA) β淀粉样蛋白25—35(Aβ25-35) 钙离子(Ca2+) 皮质神经元
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[Gly14]-humanin拮抗Aβ_(31-35)引起的大鼠空间学习记忆损伤 被引量:6
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作者 原丽 韩维娜 +3 位作者 李少凤 刘晓杰 武美娜 祁金顺 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期625-632,共8页
淀粉样β蛋白(Amyloid β protein,Aβ)与阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)发病机理密切相关,拮抗Aβ神经毒性或清除脑内沉积的Aβ已成为一个主要的AD治疗策略。本研究采用Morris水迷宫技术,探讨了海马内注射Aβ31-35对大鼠空间... 淀粉样β蛋白(Amyloid β protein,Aβ)与阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)发病机理密切相关,拮抗Aβ神经毒性或清除脑内沉积的Aβ已成为一个主要的AD治疗策略。本研究采用Morris水迷宫技术,探讨了海马内注射Aβ31-35对大鼠空间学习记忆行为的影响,并在此基础上研究了[Gly14]-humanin(HNG)拮抗Aβ的神经保护作用及其可能机制。结果显示,双侧海马注射2.0nmol的Aβ31-35后,大鼠定位航行试验中寻找水下平台的平均逃避距离较对照组明显延长;撤除平台后空间探索试验中目标象限内的游泳距离占游泳总距离的百分比明显下降;HNG(0.2和2.0nmol)预处理拮抗了Aβ31-35所致的逃避距离延长和游泳距离百分比下降;给予酪氨酸激酶抑制剂Genistein(40nmol)则几乎完全阻断HNG的抗Aβ效应。以上结果表明,HNG可以剂量依赖性保护大鼠的空间学习记忆免受Aβ伤害,其机制可能与激活内源性酪氨酸激酶途径有关,提示HNG上调酪氨酸激酶信号转导对AD患者认知功能的改善具有重要意义。 展开更多
关键词 [Gly14]-humanin 31-35 MORRIS水迷宫 空间学习记忆
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Neuroprotective effects of ginsenoside Rb1 on hippocampal neuronal injury and neurite outgrowth 被引量:15
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作者 Juan Liu Jing He +3 位作者 Liang Huang Ling Dou Shuang Wu Qionglan Yuan 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2014年第9期943-950,共8页
Ginsenoside Rb1 has been reported to exert anti-aging and anti-neurodegenerative effects. In the present study, we investigate whether ginsenoside Rb1 is involved in neurite outgrowth and neuroprotection against damag... Ginsenoside Rb1 has been reported to exert anti-aging and anti-neurodegenerative effects. In the present study, we investigate whether ginsenoside Rb1 is involved in neurite outgrowth and neuroprotection against damage induced by amyloid beta(25–35) in cultured hippocampal neurons, and explore the underlying mechanisms. Ginsenoside Rb1 significantly increased neurite outgrowth in hippocampal neurons, and increased the expression of phosphorylated-Akt and phosphorylated extracellular signal-regulated kinase 1/2. These effects were abrogated by API-2 and PD98059, inhibitors of the signaling proteins Akt and MEK. Additionally, cultured hippocampal neurons were exposed to amyloid beta(25–35) for 30 minutes; ginsenoside Rb1 prevented apoptosis induced by amyloid beta(25–35), and this effect was blocked by API-2 and PD98059. Furthermore, ginsenoside Rb1 significantly reversed the reduction in phosphorylated-Akt and phosphorylated extracellular signal-regulated kinase 1/2 levels induced by amyloid beta(25–35), and API-2 neutralized the effect of ginsenoside Rb1. The present results indicate that ginsenoside Rb1 enhances neurite outgrowth and protects against neurotoxicity induced by amyloid beta(25–35) via a mechanism involving Akt and extracellular signal-regulated kinase 1/2 signaling. 展开更多
关键词 nerve regeneration ginsenoside Rb1 hippocampal neurons neurite outgrowth apoptosis amyloid beta protein(25–35 growth-associated protein-43 Hoechst-33258 staining PD98059 API-2 Akt and ERK1/2 signaling NSFC grant neural regeneration
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Protective effects of MCI-186 on oxidative damage in a cell model of Alzheimer's disease 被引量:5
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作者 Ming Yu Shujuan Li +3 位作者 Wenhui Leng Han Chen Yingquan Wu Lirong Yan 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2010年第16期1226-1230,共5页
Oxidative stress has an important role in the development of Alzheimer's disease (AD). Beta amyloid protein 25-35 (Aβ25-35) can generate oxygen free radicals, and MCI-186 (3-methyl-l-phenyl-2-pyrazolin-5-one, e... Oxidative stress has an important role in the development of Alzheimer's disease (AD). Beta amyloid protein 25-35 (Aβ25-35) can generate oxygen free radicals, and MCI-186 (3-methyl-l-phenyl-2-pyrazolin-5-one, edaravone) can specifically eliminate hydroxyl radicals. The present study introduced Aβ25-35 into PC12 cells to establish a cell model of AD, and investigated the neuroprotective effects of MCI-186 on AD. Results showed that MCI-186 had a positive effect on the prevention and treatment of AD by inhibiting protein oxidative products, advanced glycation end products, lipid oxidative end products and DNA oxidative damage in PC12 cells induced by Aβ25-35. 展开更多
关键词 MCI-186 (edaravone) oxidative stress damage beta amyloid protein 25-35 pheochromocytoma (PC12) cells Alzheimer's disease neurodegenerative diseases neural regeneration
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多奈哌齐对Aβ25-35诱导神经毒性的保护作用 被引量:4
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作者 杨红旗 李学 +2 位作者 蒋秋焕 马建军 徐军 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1209-1213,共5页
目的观察胆碱酯酶抑制剂多奈哌齐对Aβ25-35诱导的神经毒性的影响及其可能机制。方法PCI2细胞常规培养,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测0、0.5、1、5、10、20、50μmol/β -淀粉样蛋白(AB)β25-35或多奈哌齐对细胞活力的影响;1、5、1... 目的观察胆碱酯酶抑制剂多奈哌齐对Aβ25-35诱导的神经毒性的影响及其可能机制。方法PCI2细胞常规培养,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测0、0.5、1、5、10、20、50μmol/β -淀粉样蛋白(AB)β25-35或多奈哌齐对细胞活力的影响;1、5、10、20、50μmol/L多奈哌齐预处理细胞2h后再加入20μmol/L Aβ25-35同时设正常对照组和单纯Aβ25-35组,MTT法检测各组细胞活力和乳酸脱氢酶(LDH)含量的变化;10μmol/L蛋白激酶C(PKC)的抑制剂GF109203X作用细胞30min后加入10μmol/L多奈哌齐,同时设正常对照组、单纯GF109203X组和多奈哌齐组.Western blotting检测各组磷酸化PKC(P.PKC)、磷酸化PKC底物(P-MARCKSl的表达;免疫荧光染色检测10μmol/L多奈哌齐作用2h和正常对照细胞PKCα、PKC∑亚型的表达。结果5、10、20、50μmol/L的Aβ25-35作用于PCI2细胞24h后可以引起细胞活力下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与正常对照组比较,20μmol/LAβ25-35组细胞活力下降、LDH释放增加;与Aβ25-35组比较,Aβ25-35+5、10、20、50μmol/L多奈哌齐组细胞活力增加,LDH释放下降,差异有统计学意义(P〈0.05)。Westem blotting检测结果显示.与正常对照组相比,10μmo/L多奈哌齐组P-PKC和P-MARCKS的表达增加;与多奈哌齐组相比较,GFl09203X+多奈哌齐组P-PKC和P-MARCKS的表达降低,差异有统计学意义(P〈0.05);免疫荧光染色证实正常对照组PKCα和PKC∑较多地在细胞浆内表达,多奈哌齐组PKCα和PKC∑在膜部分表达增多。结论多奈哌齐可以拮抗Aβ25-35的神经毒性作用,激活PKC表达可能是其发挥保护作用的机制之一。 展开更多
关键词 多奈哌齐 Β-淀粉样蛋白25-35 阿尔茨海默病 蛋白激酶C
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