表面等离子体共振（SPR）生物传感器技术的进展—BIACORE J的应用

SPR生物传感器技术正在持续发展着.瑞典BIACORE公司新近推出了用于生物分子间相互作用日常分析的新型号仪器,BIACORE J.应用抗体/蛋白质A及配位基/受体等体系进行了BIACORE J用于活性浓度和键合亲和力测定的考核.结果表明了仪器的高灵敏度和键合响应的重现性.该型号仪器易于操作,并可用于多种领域,SPR技术也因而成为被广泛采用的研究工具.

基于表面等离子共振的新型生物传感技术及其在生命科学中的应用

生物分子的活性功能是通过分子之间的相互作用来体现的,了解这种相互作用的过程对于生命科学领域的研究及揭示生命发生发展的基本机制具有重要的意义。基于表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)的新型生物传感技术——BIAcore(biomolecular interaction analysis)是研究生物分子相互作用的理想工具。它可以实时跟踪检测生物分子间结合、解离的整个过程,已被广泛应用于蛋白质组学、信号转导、新药开发、遗传学分析和食品检测等领域,并且显示出广阔的应用前景。

免疫学技术及其应用

内容简介：本书首先介绍了天然免疫和获得性免疫中免疫细胞（包括单核巨噬细胞、DC、NK、T细胞、B细胞等）、免疫分子（包括抗体、补体、细胞因子、HLA、TLR等）的理论背景和研究方法。然后介绍了免疫学相关实验技术，如免疫标记技术、流武细胞检测和分选技术、免疫相关分子生物学技术、蛋白质电泳技术、凋亡检测技术等的原理和应用，并融合了免疫学最新前沿技术，如RNA干扰技术、miRNA技术、蛋白质相互作用、BIAcore技术、激光扫描共聚焦显微镜技术、动物疾病模型、

茶叶中杀冥硫磷含量的测定

杀螟硫磷是有机农药中的一种,在蔬菜类农作物的加工中常用杀螟硫磷作为主要的农药和杀虫剂。而农药的大量使用也使得蔬菜的叶片中残留有大量的杀螟硫磷,对人体健康造成了严重影响。因此本文以茶叶为例,采用基于单链抗体的BIAcore技术,对茶叶叶片中杀螟硫磷含量进行了检测,检测结果表明该方式的样品平均回收率在94.5%~101.3%,RSD≤2.2%,这说明此方式具有较好的检测能力,可以用于叶片类蔬菜农作物中的杀螟硫磷含量检测。

地龙对肺纤维化小鼠肺组织中纤维化因子TGF-β1及α-SMA表达的影响

探究地龙对博来霉素诱导的肺纤维化小鼠纤维化因子TGF-β1及α-SMA表达的影响。通过Biacore技术初步检测地龙与纤维化因子TGF-β1的结合力,并采用体内药效学加以验证。将60只雌雄各半的C57小鼠随机分为空白组,模型组,地龙高、中、低剂量组,醋酸泼尼松组;除空白组外(予以气管内注射0.08 m L·kg^-1氯化钠注射液),其余5组予以气管内注射博来霉素4 mg·kg^-1来复制肺纤维化模型。药物治疗14 d后,采用Masson染色、免疫组化、RT-PCR技术检测TGF-β1及α-SMA的表达。Biacore实验结果显示,地龙提取液在体外与TGF-β1蛋白有较好的结合,结合值达到619.3;Masson结果显示,与模型组相比,地龙高、中、低剂量组纤维素沉积均有不同程度减轻;RT-PCR结果显示,不同剂量的地龙提取液在一定程度上均能降低TGF-β1和α-SMA蛋白及mRNA的表达,且呈现一定的剂量依赖性。综上所述,地龙可通过与靶蛋白TGF-β1结合从而抑制α-SMA的表达来延缓肺纤维化进程。

黄芩苷对肺纤维化小鼠组织中纤维化因子TGF-β1及mmp2,timp2表达的影响

考察通过Biacore试验从芩百清肺浓缩丸垂钓的黄芩苷对博来霉素诱导的肺纤维化小鼠纤维化因子TGF-β1及mmp2,timp2表达的影响。采用Biacore技术检测芩百清肺浓缩丸与TGF-β1是否存在特异性结合,通过Biacore垂钓法,富集、再生和回收与TGF-β1结合的亲和活性成分,然后运用超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS)技术对回收到的样品分析鉴定单体成分是否为黄芩苷,再次运用Biacore对鉴定后的单体成分黄芩苷进行亲和力动力学分析加以验证,并采用体内药效学加以验证。将健康雌雄各半BALB/c小鼠30只任意分为3组,黄芩苷组、模型组、空白组;空白组予以气管内注射氯化钠注射液(0.08 mL·kg^-1),黄芩苷组、模型组复制肺纤维化模型(气管内注射4 mg·kg^-1博来霉素)。将上述4组小鼠饲养14 d后,运用免疫组化法确定因子在细胞中的位置及TGF-β1与mmp2,timp2蛋白的变化,RT-PCR法检测TGF-β1及mmp2,timp2 mRNA的表达。Biacore亲和力分析结果显示,芩百清肺浓缩丸与TGF-β1蛋白的结合响应峰值达到1524.0 RU,存在特异性结合。Biacore垂钓法钓取芩百清肺浓缩丸中与TGF-β1亲和的活性成分,运用UPLC-Q-TOF-MS,并对照数据库,显示化合物为黄芩苷,SPR亲和力动力学分析确定了黄芩苷与TGF-β1的亲和常数(KD)为1.62006μmol·L^-1,表明黄芩苷与TGF-β1存在稳定结合,验证了垂钓结果。免疫组化结果显示,与模型组相比,黄芩苷组纤维素沉积有显著减轻;从RT-PCR分析看出,与模型组相比,黄芩苷组能降低TGF-β1及mmp2,timp2 mRNA的表达。黄芩苷与靶蛋白TGF-β1结合能够抑制mmp2,timp2的表达,推延肺纤维化进程。