鬼针草(Bidens bipinnata L.)多倍体的诱变

我们用改良琼脂法对鬼针草（ＢｉｄｅｎｓｂｉｐｉｎｎａｔａＬ．）进行多倍体诱变，其诱变率达５５％。多倍体后代Ｂ—９７的生物学特征与对照相比有显著差异。Ｂ—９７叶片面积是对照叶面积的１．５—２倍；果实长度比对照增大１７．５％；气孔器长度约是对照的１．５倍。Ｂ—９７结实极度下降。

HPLC法测定鬼针草总黄酮部位中芦丁的含量

目的建立鬼针草总黄酮部位中芦丁的HPLC含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,流动相为乙腈-四氢呋喃-冰乙酸-水(15.5∶5.5∶0.1∶117.5);流速1.0 ml/min;柱温30℃;检测波长360 nm。结果芦丁在75-376μg/ml的范围内线性关系良好,方程为:Y=16 262X-10 726,相关系数r=0.999 1;日内、日间精密度RSD均小于2.5%;平均回收率均为95.5%。结论该法准确、简便、重现性好,可用于鬼针草总黄酮部位中芦丁的含量控制。

鬼针草茎、叶微生物发酵前后总黄酮HPLC色谱图的比较研究

对鬼针草茎、叶经微生物发酵前后总黄酮HPLC色谱图进行了分析比较。采用Welch materials-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.2%甲酸水溶液进行梯度洗脱,检测波长360 nm,得HPLC色谱图,再对各色谱图的各色谱峰的相对率进行分析比较。结果鬼针草茎、叶发酵前后HPLC指纹图谱有较明显的改变,各吸收峰相对率也有较显著的改变。微生物发酵使鬼针草总黄酮中某些化学成分发生了生物转化,其化学成分的组成有较显著的变化。

鬼针草煎液对S180荷瘤小鼠抑瘤率及IL-2、TNF-a影响的研究

目的探讨鬼针草对S180荷瘤小鼠的治疗机制。方法将50只清洁级昆明小鼠制成S180实体瘤模型,分为模型组、CTX组、鬼针草高剂量组、鬼针草中剂量组、鬼针草低剂量组,给药14 d,第15 d后摘眼球取血,处死小鼠,用放射免疫法检测血清中IL-2、TNF-a的含量。结果鬼针草煎液有一定的抑瘤作用,能增加S180荷瘤小鼠血清IL-2、TNF-α的含量。结论鬼针草抗肿瘤的机制是可能增加了S180荷瘤小鼠血清IL-2、TNF-α的含量,与改善荷瘤小鼠的免疫功能有关。

鬼针草植物HPLC指纹图谱研究

目的建立鬼针草植物的HPLC指纹图谱,为鬼针草药材的品种鉴定质量控制提供依据。方法采用迪马Diamonsil 5U(C18,250×4.6mm)色谱柱,以乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0m L·min-1,检测波长为360nm,柱温为25℃:进样量为20μL。结果建立了10批鬼针草的HPLC指纹图谱,确立了17个共有峰,多数峰可以达到较好分离。并对种间相似度进行了比较。结论该方法稳定性、重复性好,建立的指纹图谱可为鬼针草药材的质量评价提供依据。

鬼针草提取物通过TGF-β1/Smad3/Angptl4信号保护急性胰腺炎大鼠肺损伤的实验研究

目的:探究鬼针草提取物在急性胰腺炎大鼠肺损伤中的保护作用。方法:随机将大鼠分为8组:对照(Sham)组,模型(SAPLI)组,鬼针草提取物低(50mg/kg)、中(100mg/kg)、高(200mg/kg)剂量组,鬼针草提取物+TGF-β1组(外源性TGF-β1),鬼针草提取物+empty vector组、鬼针草提取物+Angptl4plasmid vector组。大鼠实验结束后12h,检测各组肺湿干重比(W/D),血清淀粉酶(AMY)活性,肺组织髓过氧化物酶的活性(MPO),炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β的分泌水平,RT-PCR和western blot分别检测TGF-β1、Smad3、Angptl4的mRNA和蛋白表达水平。结果:和Sham组比较,SAPLI组AMY、MPO活性、肺湿干重比、TNF-α、IL-6、IL-1β的水平和TGF-β1、Smad3、Angptl4的表达水平显著升高,而鬼针草提取物可使上述指标下降(P<0.05);注射外源性TGF-β1蛋白或过表达Angptl4可逆转TFB的肺损伤保护作用。结论:鬼针草提取物对急性胰腺炎大鼠相关性肺损伤有保护作用,这与阻断TGF-β1/Smad3/Angptl4信号通路有关。

中药鬼针草化学成分的研究

目的:研究鬼针草治疗糖尿病的有效化学成分。方法:采用80%乙醇渗漉提取,硅胶,反相硅胶,Sephadex-LH20柱层析分离纯化,化学反应和波谱分析鉴定其化学结构。结果:从鬼针草中得到槲皮素(Ⅰ)、金丝桃苷(Ⅱ)、槲皮素-7-O-鼠李糖苷(Ⅲ)、6,7,3’,4’-四羟基橙酮(Ⅳ)、4,5-双咖啡sg酰奎宁酸(Ⅴ)、豆甾醇-3-O-葡萄糖苷(Ⅵ)、3,4-二羟基苯甲酸乙酯(Ⅶ)、奥卡宁(Ⅷ)、木犀草素(Ⅸ)。结论:以上化合物除奥卡宁、金丝桃苷外,其余7个化合物均为首次从鬼针草中分离得到。

鬼针草总黄酮抗大鼠免疫性肝纤维化作用及部分机制研究

目的探讨鬼针草总黄酮(TFB)抗大鼠免疫性肝纤维化的作用及机制。方法SD大鼠随机分为正常组、模型组、TFB大、中、小剂量组和秋水仙碱阳性药对照组,采用腹腔注射猪血清诱导肝纤维化模型。造模后,给药组分别灌服相应的受试药物,正常组和模型组灌服等量的生理盐水。ELISA法测定大鼠血清透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原酶(PCⅢ)、Ⅳ型胶原酶(CⅣ)含量;取固定部位肝组织做病理组织学检查;免疫组织化学技术测定肝组织中α-SMA蛋白的表达;RT-PCR技术测定肝组织中TGF-β1mRNA的表达情况。结果TFB能明显降低肝纤维化大鼠血清中HA、LN、PCⅢ、CⅣ含量;病理组织学检查结果显示TFB组肝脏组织结构明显改善,肝纤维化程度减轻;TFB大、中剂量组明显抑制肝组织中α-SMA蛋白和TGF-β1mRNA的表达。结论TFB对猪血清所致大鼠免疫性肝纤维化有明显治疗作用,其机制可能与降低TGF-β1mRNA表达进而抑制肝星状细胞活化有关。

鬼针草总黄酮对急性炎症的保护作用及可能机制研究

目的:研究鬼针草总黄酮(TFB)对急性炎症的保护作用与可能机制。方法:二甲苯诱导急性小鼠耳肿胀,检测耳肿胀度和血清TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8含量;氟氏完全佐剂诱导佐剂性关节炎(AA)大鼠原发性炎症,检测足肿胀度和血清TNF-α、IL-1、IL-2、IL-6、IL-8含量,HE染色观察炎症关节病理学变化,免疫组织化学法检测关节软骨组织ASIC1a蛋白。结果:小鼠急性耳肿胀和AA大鼠原发性炎症中,模型组动物血清TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8含量均明显升高,TFB(100、200mg/kg)灌胃给药能降低小鼠耳肿胀度和血清TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8含量,TFB(67、133mg/kg)可以升高AA大鼠血清IL-2的含量。TFB灌胃给药可以使AA大鼠关节炎性细胞减少,改善病理变化。在AA大鼠原发性炎症中模型组大鼠关节软骨组织ASIC1a表达明显升高,TFB(67、133mg/kg)组ASIC1a的表达明显降低。相关性分析结果显示,AA大鼠原发性炎症中ASIC1a与血清TNF-α、IL-1、IL-8含量呈正相关。结论:TFB对急性炎症具有保护作用,其抗炎机制可能与调节炎症介质释放有关。

鬼针草药材的生药学鉴定

目的对安徽民间习用药材鬼针草进行生药学鉴定,为其制定质量标准提供参考依据。方法对原植物的药用部位进行直观、显微和薄层鉴别。结果原植物的外观、显微特征与金盏银盘相符。结论安徽民间习用鬼针草药材为鬼针草属植物金盏银盘。

鬼针草总黄酮对肝纤维化大鼠肝星状细胞TGF-β1信号传导通路的影响

目的研究外源性转移生长因子-β1(transforming growth factor betal,TGF-β1)对肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)的激活作用,观察鬼针草总黄酮(total flavonoids of Bidens Bipinnata L,TFB)对HSC中smad2/7和Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达的影响,以探讨TFB抗肝纤维化的作用及分子机制。方法采用Collagenase Ⅳ胶原酶原位肝灌注法分离HSC,MTT法观察TFB对TGF-β1刺激下HSC增殖的作用,ELISA法检测HSC自分泌TGF-β1和产生Ⅰ型胶原的影响;RT-PCR法观察分析TFB对TGF-β1刺激下HSC中smad2/7和Ⅰ型胶原基因表达的影响;Westernblot法观察TFB对TGF-β1刺激下HSC中smad2蛋白表达的影响。结果TGF-β1明显促进HSC增殖、自分泌TGF-β1和产生胶原,促进HSCsmad2、Ⅰ型胶原mRNA及smad2蛋白的表达,明显抑制smad7mRNA表达(P<0.05),TFB作用后,TGF-β1刺激的HSC中smads2mRNA、蛋白和Ⅰ型胶原mRNA表达受到抑制,smad7mRNA表达明显上调。结论TFB抗肝纤维化作用可能与其阻断HSCTGF-β1通路进而阻断HSC的活化、增殖有关。

柳叶鬼针草总黄酮对四氯化碳所致小鼠急、慢性肝损伤的保护作用

目的:采用四氯化碳(CCl4)腹腔注射制备小鼠急、慢性肝损伤模型,探讨柳叶鬼针草(TFB)总黄酮对肝损伤的保护作用及其作用机制。方法:60只ICR小鼠随机分为对照组、模型组、阳性药护肝片(4g·kg-1)组及TFB高、中、低(120、60和30mg·kg-1)剂量组,每组10只。采用腹腔注射不同剂量及不同给药次数给予CCl4分别制备小鼠急、慢性肝损伤模型,观察肝脏指数、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平,以及肝脏组织病理形态学变化。结果:与模型组比较,TFB(120、60和30mg·kg-1)及阳性药护肝片(4g·kg-1)组小鼠肝脏水肿明显减轻(P<0.05或P<0.01),血清AST及ALT活性明显降低(P<0.05或P<0.01),血清SOD活性升高,MDA含量降低(P<0.05或P<0.01),肝脏组织病理损害明显改善。结论:TFB对CCl4所致小鼠急、慢性肝损伤具有明显保护作用,其作用机制可能与抗氧化损伤有关。

正交设计法优选鬼针草中总黄酮的提取工艺研究

目的对从鬼针草中提取鬼针草总黄酮的工艺进行优化。方法采用L9(34)正交设计,以鬼针草总黄酮含量为考察指标,考察乙醇浓度、提取时间、乙醇用量、提取次数4个因素对提取的影响。结果最佳提取工艺为12倍量80%乙醇提取2次,1 h/次。结论该工艺经实验重现性好,对进一步的工艺开发有较好的参考价值。

鬼针草有效成分的研究(Ⅱ)

目的研究鬼针草Bidensbipinnata的地上部分的化学成分。方法采用硅胶、ODS柱色谱分离并结合SephadexLH-20和HPLC分离纯化,通过理化鉴定和波谱分析鉴定其化学结构。结果从鬼针草的正丁醇部位得到6-O-β-D-吡喃葡萄糖基-6,7,3′,4′-四羟基噢(海生菊苷)()、6-O-(6″-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基)-6,7,3′,4′-四羟基噢()、槲皮素3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷()、槲皮素3-O-α-L-鼠李糖苷()、异奥卡宁-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷()、七叶苷()、(E)2-己烯基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷()、正己烷基O-β-D-吡喃葡萄糖苷()、异戊基O-β-D-吡喃葡萄糖苷()、正丁基O-α-D-呋喃果糖苷()、正丁基O-β-D-呋喃果糖苷()、正丁基O-β-D-吡喃果糖苷()。结论以上12个化合物中除海生菊苷和异奥卡宁-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷外,其他10个化合物均为首次从鬼针草中分离得到。

鬼针草提取物对实验性高脂血症大鼠血脂和NO及NOS的影响

目的研究鬼针草不同提取物对实验性高脂血症大鼠血脂和NO及NOS的影响。方法健康雄性SD大鼠随机分为5组:①正常对照组;②模型对照组;③洛伐他汀对照组,洛伐他汀2 mg/(kg.d)灌胃;④鬼针草乙酸乙酯萃取物组,5 g/(kg.d)灌胃;⑤鬼针草水提取物组,5 g/(kg.d)灌胃,正常组和模型组每日给予等体积生理盐水。除正常组喂饲普通饲料外,其余各组均喂饲高脂饲料。10周末处死动物,分离血清,检测血脂、MDA、SOD、NO、NOS。制备腹主动脉切片,HE染色观察形态学改变。结果与模型组比较,鬼针草提取物组TC、LDL-C、MDA、NO和NOS显著降低,HDL-C、SOD明显升高。鬼针草提取物组HDL-C明显高于洛伐他汀组。模型组大鼠主动脉血管内壁不光滑,血管内膜脂质沉积,鬼针草提取物组血管内膜无明显的脂质沉积。结论鬼针草提取物能够降低高脂血症大鼠血脂水平并保护血管内皮,具有较好的防治动脉粥样硬化的作用。

大孔树脂对鬼针草总黄酮的吸附分离特性研究

目的:研究7种不同类型大孔吸附树脂对鬼针草总黄酮的吸附及解吸特性,筛选出适合分离纯化鬼针草总黄酮的大孔吸附树脂。方法:以鬼针草总黄酮含量为指标,采用静态吸附法、动态吸附法比较不同树脂对总黄酮的吸附量、解吸率及吸附动力学的影响。结果:在静态吸附和动态吸附试验中均以HPD l00比较适合于鬼针草总黄酮的分离纯化。结论:大孔吸附树脂HPD l00对鬼针草总黄酮具有良好的吸附分离性能,吸附快、解吸容易,性能优于其他树脂。

鬼针草90%醇提物对U_(14)荷瘤小鼠的抑瘤效应

以U14细胞株接种小鼠制成荷瘤模型,研究鬼针草90%醇提物对荷瘤小鼠的抑瘤效应。结果表明,90%鬼针草醇提物通过提高机体免疫力抑制小鼠肿瘤生长。

大孔吸附树脂纯化鬼针草总黄酮的工艺研究

目的研究大孔吸附树脂分离纯化鬼针草总黄酮的工艺。方法以鬼针草总黄酮吸附量、总黄酮含量和总黄酮回收率为考察指标,从吸附分离特性对树脂进行筛选和工艺优化。结果HPD100树脂对鬼针草总黄酮有良好的吸附分离性能,其吸附分离鬼针草总黄酮的工艺条件为：原液上样浓度为1-1.5g/L,调pH为4,以2BV/h的吸附速率进行吸附,最大上样量以总黄酮计为4.99g/L树脂。吸附后先以4BV水洗去杂质,再用4BV的70%乙醇以4BV/h的速率进行洗脱。在此条件下进行吸附、洗脱,树脂可重复使用5次。结论HPD100树脂在所确定的工艺条件下,可较好的吸附分离鬼针草总黄酮。

鬼针草不同提取物对醛糖还原酶的抑制作用

为了从鬼针草中发现治疗糖尿病合并症的天然物质 ,对鬼针草 5种不同提取物对人醛糖还原酶筛选实验结果表明

鬼针草化学成分的研究(Ⅰ)

目的 研究鬼针草 Bidens bipinnata地上部分的化学成分。方法 采用硅胶、ODS柱色谱并结合 HPL C分离纯化 ,通过理化鉴定和波谱分析鉴定其化学结构。结果 从鬼针草的醋酸乙酯部位得到水杨酸 ( )、9,12 ,13 -三羟基 -10 ,15-十八碳二烯酸 ( ) 9,12 ,13 -三羟基 -10 -十八烯酸 ( )、苄基 -O-β-D-吡喃葡萄糖苷 ( )、苯乙基 -O-β-D-吡喃葡萄糖苷 ( )、(Z) -3 -己烯基 -O-β-D-吡喃葡萄糖苷 ( )、丁香酚苷 ( )、3 -甲基 -2 -(2 -戊烯基 ) -4-O-β-D-吡喃葡萄糖基 -△ 2 -环戊烯酮 ( )。结论 以上 8个化合物中除水杨酸外 ,其余 7个化合物均为首次从鬼针草中分离得到。