藏药薰倒牛的活性物质研究

从植物藏药薰倒牛（ＢｉｅｂｅｒｓｔｅｉｎｉａｈｅｔｅｒｏｓｔｅｍｏｎＭａｘｉｍ．）中首次分离得７个化合物，经化学方法和光谱解析鉴定为：β－谷甾醇（Ⅰ）、胡萝卜甙（Ⅱ）、伞形花内酯（Ⅲ）、５，７，３′－三羟基－８，４′，５′－三甲氧基黄酮（Ⅳ）、木犀草素－７－葡萄糖甙（Ⅴ）、槲皮素－７－葡萄糖甙（Ⅵ）和Ｎ－３－甲基－２－丁烯基脲（Ⅶ）。其中Ⅳ和Ⅶ是二个新的天然产物。药理实验表明化合物Ⅶ有镇痛、降压等活性。

藏药熏倒牛化学成分研究

利用色谱对藏药熏倒牛进行化学成分研究。从藏药熏倒牛(Biebersteinia heterostemonMaxim.)中分离鉴定了6个化合物,采用波谱技术分别鉴定为hypolaetin 7-O-β-xylopyranoside(1)、山羊豆碱(2)、反式-4-羟基山羊豆碱(3)、甘露糖醇(4)、伞形花内脂(5)、槲皮素(6)。对化合物1的1H、13C NMR信号进行了准确归属,化合物1～4均为首次从该植物中分离得到。

藏药熏倒牛提取物的抑菌杀虫活性研究

为了探讨藏药熏倒牛乙醇提取物不同极性溶剂萃取部位的抑菌杀虫活性,将熏倒牛乙醇提取物依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,所得各萃取部位及水余液部位通过抑菌圈法测定抑菌活性部位,对活性部位采用二倍稀释法测定最低抑菌浓度,采用改良任氏法测定杀灭滴虫活性部位及最低有效杀虫浓度。结果表明熏倒牛乙醇提取物的乙酸乙酯部位对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和阴沟肠杆菌有强抑制作用,最低抑菌浓度为0.125 mg/m L,对变形杆菌、粪肠球菌和白色念珠菌的抑制作用也比较强,最低抑菌浓度为0.25 mg/m L。石油醚部位和乙酸乙酯部位对阴道滴虫有明显抑制作用,最低有效杀虫浓度分别为0.5、0.25 mg/m L。说明熏倒牛乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位有较强的抑菌杀虫作用,是熏倒牛的抑菌杀虫活性部位。

藏药薰倒牛的化学成分研究

目的：研究传统藏药薰倒牛Biebersteinia heterostemon的化学成分。方法：运用正相及反相硅胶柱色谱分离纯化,采用现代波谱与X-ray单晶衍射等方法鉴定化合物的结构。结果：从全草中分离纯化出3个化合物,其结构分别鉴定为山羊豆碱（galegine,1）,顺式-4-羟基山羊豆碱（cis-4-hydroxygalegine,2）,反式-4-羟基山羊豆碱（trans-4-hydroxygalegine,3）。其中化合物3的结构还得到X-ray单晶衍射的证实。结论：化合物1-3均为首次从该植物中分离得到。

藏药熏倒牛质量标准研究

目的建立熏倒牛药材的质量标准。方法对熏倒牛药材进行性状鉴别及显微鉴别。采用高效液相色谱法(HPLC)测定熏倒牛药材中木犀草素的含量,流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液(48∶52),检测波长350 nm。结果药材显微结构中导管、腺毛及非腺毛较多,还可见纤维束散在或成束分布,存在花粉粒,叶表皮细胞中可见气孔等结构。药材平均含水量为9.80%,木犀草素平均含量为0.745 mg/g。结论本试验建立的含量测定方法可用于熏倒牛药材的质量控制。

药理效应法对藏药熏倒牛不同提取工艺的评价

目的:研究藏药熏倒牛的提取工艺。方法:采用小鼠耳廓二甲苯致炎、小鼠热板法致痛实验,观察熏倒牛不同工艺提取物对抗炎、镇痛作用的影响。结果:熏倒牛传统水煎工艺提取物、传统水煎醇沉工艺提取物、醇提工艺提取物均有抑制二甲苯致小鼠耳肿胀的作用,均可提高小鼠热板法致痛的痛阈(P<0.01),但醇提取物的抗炎、镇痛效果明显优于水煎提取物和水煎醇沉提取物(P<0.01)。结论:熏倒牛乙醇提取物的抗炎、镇痛作用显著,其药理效应明显优于水煎和水煎醇沉工艺。

藏药薰倒牛RP—HPLC指纹图谱的研究

本文建立薰倒牛RP-HPLC指纹图谱，为中药材质量控制提供有效的方法。采用Hypersil-ODS C18（250×4．6mm，5μm）色谱柱；以甲醇-0．4％磷酸溶液-乙腈为流动相梯度洗脱，流速1mL／min，柱温25℃，检测波长252nm。以20个共有峰为评价指标，精密度和重复性试验中共有峰相对保留时间和相对峰面积RSD均小于2．5％，9批样品相似度≥0．819，采用聚类分析将不同产地的药材分成4类。该方法简便稳定可靠，可以有效用于薰倒牛原料的质量控制，为薰倒牛的进一步开发利用提供参考。

藏药熏倒牛籽油中脂肪酸成分分析

目的通过GC技术,对藏药熏倒牛种子油脂肪酸成分进行定性定量分析.方法 采用FFAP弹性毛细管柱（50m×0.24mm i.d）,程序升温法,柱温150～240℃,升温速度5℃/min,FID检测器温度280℃,高纯氮气42ml/min,尾吹50ml/min,氢气9.9×10pa,空气8.0×10pa.结果藏药熏倒牛种子油脂肪酸成分得以定性,主要为棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸.不饱和脂肪酸为88.44％,其中亚油酸含量为73.04％.结论通过对藏药熏倒牛种子油脂肪酸成分的分析,为藏药熏倒牛资源的开发利用提供科学依据.

熏倒牛化学成分研究

目的:研究熏倒牛Biebersteinia heterostemon Maxim.的化学成分。方法:利用各种色谱手段进行分离纯化,并通过^(1)H、^(13)C-NMR等波谱技术进行结构鉴定。结果:从熏倒牛全草中共分离得到11个化合物,分别鉴定为:dihydrodehydrodiconiferyl alcohol(1)、erythro-4,7,9,9′-tetrahydroxy-3,3′,5′-trimethoxy-8-O-4′-neolignan(2)、threo-4,7,9,9′-tetrahydroxy-3,3′,5′-trimethoxy-8-O-4′-neolignan(3)、伞形花内酯(4)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(5)、2,3-dihydro-2-(4′-O-β-D-glucopyranosyl-3′-methoxy-phenyl)-3-hydroxymethyl-5-(3-hydroxypropyl)-7-methoxybenzofuran(6)、hypolaetin-8,3′-dime(7)、茵芋苷(8)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(9)、(6S,9S)-roseoside(10)、hedyotisol A(11)。结论:除化合物4、9外,其余化合物为首次从熏倒牛属植物中分离得到。

基于HPLC-Q-TOF-MS/MS技术的藏药熏倒牛化学成分分析

目的:利用高效液相色谱-四级杆串联飞行时间质谱(HPLC-Q-TOF-MS)在负离子模式下对藏药熏倒牛中的化学成分进行分析和鉴定。方法:采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C_(18)柱(3.0 mm×150 mm,1.8μm);以0.1%甲酸的乙腈(A)和0.1%甲酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱;流速为0.250 mL·min^(-1);进样体积:2μL;柱温为35℃;以电喷雾(ESI)离子源,负离子模式下采集数据,通过分析质谱数据和元素组成,结合文献数据对照,分析推测所含化合物。结果:通过分子离子峰和二级高分辨质谱数据结合文献数据鉴定了熏倒牛全草中的25个化合物,包括1个脂环族有机酸类、2个香豆素类、2个多酚类、1个蒽醌类及19个黄酮类化合物。结论:UPLC-Q-TOF-MS/MS技术为鉴别藏药熏倒牛药材中的化学成分提供快捷、准确的方法,其主要化学成分为黄酮醇类、异黄酮类、蒽醌类,并从该植物中首次鉴定出了14个黄酮类成分,可为熏倒牛药材的药效物质基础研究和质量控制提供参考。

藏药熏倒牛的研究现状与进展

熏倒牛为牻牛儿苗科熏倒牛属植物,是一种传统藏药,其主要分布在我国甘肃、青海、宁夏六盘山西坡、四川西北部(诺尔盖)等地区。近年来对熏倒牛活性成分的研究证明其具有抑菌、抗炎镇痛、镇静解痉、抗氧化、降血糖降血压等作用。本文对熏倒牛的研究进行分析和总结,从化学成分、药理作用、毒理学、质量标准等方面进行了综述,为其后续的进一步开发提供科学依据。

藏药“芒涧”基原植物及其生药学鉴别

目的:对藏药“芒涧”基原植物进行调查,并对其中的熏倒牛和臭蚤草两种植物进行生药学鉴别研究,为完善其质量标准提供依据。方法:通过文献追踪研究藏药“芒涧”基原植物,并通过性状观察、显微鉴别、HPLC等研究熏倒牛和臭蚤草生药学特性。结果:“芒涧”基原植物在多数文献中记载不一,主要涉及巴塘紫菀、熏倒牛、臭蚤草及垂头菊属多种植物。其中臭蚤草叶全缘,瘦果近圆柱形;根横切面皮层和木质部细胞排列紧密,无裂隙;茎表皮外被腺毛和非腺毛;叶上下表皮均有2~3层厚角细胞。熏倒牛完整叶片展开为三回羽状全裂,蒴果不开裂,种子近肾形;根皮层多裂隙;茎横切面髓大,成空腔;叶上下表皮细胞排列疏松。臭蚤草粉末为土灰褐色,偶见菊糖结晶;熏倒牛粉末为深黄绿色,多纤维。HPLC图谱显示臭蚤草和熏倒牛成分差异明显。结论:臭蚤草与熏倒牛性状、显微特征、HPLC图谱均可显示其独特鲜明的植物形态、组织构造及成分差异,可为二者的生药学鉴定和质量控制提供依据。

藏药熏倒牛种子及其萌发特性研究

目的熏倒牛是一种常用的藏药植物,目前其栽培品罕见,野生资源破坏严重。本试验研究了熏倒牛种子的外观形态及萌发特性,为其应用开发和有效保护提供理论依据。方法观察熏倒牛种子外观性状特征,测定其千粒重、含水量和吸水率,并通过用不同浸种温度、不同发芽温度及3种不同植物生长素(GA 3、IAA、NAA)处理熏倒牛种子,采用培养皿滤纸法,研究其种子萌发特性。结果熏倒牛干燥种子千粒重为2.929 g,含水量为5.84%;吸水率为53.2%。熏倒牛种子萌发的最适温度为25℃;最佳浸种温度为40℃,GA 3、IAA、NAA 3种植物激素在一定浓度范围内,对熏倒牛种子的萌发均有促进作用,影响效果表现为GA 3>IAA>NAA,即GA 3促进作用最强,以GA 3180 mg·L^-1为最适浓度,发芽率和发芽势分别达到58%和53%,幼苗根长达到4.1 cm。结论该研究能够为熏倒牛的应用开发提供基础资料,针对其种子休眠机制的分析和萌发特性还应进一步深入研究。

藏药熏倒牛主要活性物质的其他来源及药理作用分析

采用文献和主成分分析方法,研究了藏药熏倒牛主要活性物质的其他来源和现代药理作用,最后总结归纳出藏药熏倒牛的现代药理作用。结果表明,藏药熏倒牛10种主要的活性物质,广泛分布于菊科、伞形科、芸香科、瑞香科、桑科、唇形科、毛茛科和大戟科等60个科的196种植物中,特别是伞形花内酯、β-石竹烯、β-谷甾醇等几种活性物质,在其他植物中的分布十分广泛;藏药熏倒牛的现代生理作用,主要体现在抗氧化、防衰老、抗癌、消炎、抑菌、护肝、降压、驱虫、杀虫和镇痛等方面。因此,对藏药熏倒牛主要化学成分的现代药理学研究,可为该藏药资源的充分开发利用,提供理论依据。

藏药熏倒牛活性成分研究进展

文章运用文献分析方法,综述了藏药熏倒牛主要活性成分及含量的研究进展,结果显示,国内外研究者从藏药熏倒牛中已分离鉴定出黄酮类、苯丙素类等7类化合物105种,其中主要活性物质有β-石竹烯、甘香稀、β-榄香酮、2-(3′,4′-dihydroxy-phenyl)-1,3-benzodioxole-5-aldehyde、木犀草素、伞形花内酯-7-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素、伞形花内酯、山羊豆碱、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、5,7,3′-三羟基-8,4′,5′三甲氧基黄酮、木犀草素-7-葡萄糖苷、β-谷甾醇等13种。研究者通过MCI柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、HPLC分离等技术,测定了伞形花内酯-7-O-β-D-葡萄糖苷、2-(3′,4′-dihydroxy-phenyl)-1,3-benzodioxole-5-aldehyde、β-石竹烯、木犀草素等10种主要活性物质的含量。截止目前,藏药熏倒牛药材化学质量控制标准尚未建立,对具体靶向活性成分及药理作用有待进一步深入研究。

薰倒牛提取成分的抗氧化活性研究

选用2,2’-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)法,2,2-二苯基-1-苦味肼基自由基(DP PH)法和油脂稳定指数法(OSI)3种体外抗氧化法对薰倒牛提取成分的抗氧化活性进行综合分析,并与2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)阳性对照物进行了比较。结果显示,薰倒牛不同提取成分的抗氧化活性不同:乙醇提取成分和乙酸乙酯提取成分的抗氧化活性明显,优于正己烷提取成分抗氧化活性。且在测试试验条件下浓度越大,抗氧化性能越强。

反相高效液相色谱法测定藏药薰倒牛中木犀草素及槲皮素含量

目的建立藏药熏倒牛中木犀草素及槲皮素的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）法,以SB-C18为填充剂,甲醇-0.4%磷酸水溶液（48∶52）为流动相,检测波长为350 nm,建立了一种可同时测定藏药熏倒牛药材中木犀草素与槲皮素含量的方法。结果木犀草素回归方程为Y=8.97×107X+1.06×105（R=0.999 9,n=5）,线性范围为6.0836.48μg/m L,平均加样回收率为97.69%,RSD为1.56%;槲皮素回归方程为Y=6.91×107X+7.77×103（R=0.999 8,n=5）,线性范围为2.5619.2μg/m L,平均加样回收率为98.31%,RSD为1.41%。结论该方法简便、快速、准确,可用于同时测定熏倒牛中木犀草素、槲皮素的含量及药材质量控制。

熏倒牛中黄酮类成分研究

目的研究熏倒牛Biebersteinia heterostemon全草的化学成分。方法采用色谱技术进行分离纯化，根据波谱数据并参考文献鉴定其化学成分结构。结果从熏倒牛95％乙醇提取物的正丁醇萃取部位分离得到10个黄酮类化合物，分别鉴定为香叶木苷（1）、芹菜素-7-O-芦丁糖苷（2）、金圣草黄素-7-O-槐糖苷（3）、木犀草素-7-O-芸香糖苷（4）、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基（1→2）-β—D-吡喃葡萄糖苷（5）、芹黄素7-O-槐糖苷（6）、槲皮素-3-0-β-D-吡喃葡萄糖苷（7）、6-hydroxyluteolin（8）、木犀草苷（9）、海波拉亭-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（10）。结论化合物1、3、5-8、10为首次从熏倒牛中分离得到。

藏药熏倒牛HPLC特征图谱及4个成分的含量测定

目的:利用高效液相色谱法建立藏药熏倒牛的特征图谱,同时测定伞形花内酯、异槲皮苷、木犀草素、芹菜素4个成分的含量。方法:以伞形花内酯、异槲皮苷、木犀草素、芹菜素为目标化合物,采用CAPCELL PAK-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇(A)-0.1%磷酸水(B)为流动相进行梯度洗脱(0~25 min,16%A→40%A;25~30 min,40%A;30~45 min,40%A→62%A;45~51 min,62%A→80%A;51~55 min,80%A;55~56 min,80%A→16%A;56~60 min,16%A),流速为1 mL·min^(-1),柱温为30℃,检测波长为320 nm,利用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012.130723版本)”建立9批熏倒牛的特征图谱,同时对熏倒牛中的4个成分进行测定。结果:建立的HPLC熏倒牛特征图谱中共有27个共有峰,9批熏倒牛样品的相似度介于0.612~0.985之间。9批样品中伞形花内酯、异槲皮苷、木犀草素、芹菜素4个成分的含量分别在63.986~580.347、55.361~259.068、16.489~86.714、20.231~37.108μg·g^(-1)之间。结论:该方法稳定可行,可用于规范和控制藏药熏倒牛的质量。

藏药熏倒牛化学成分研究

目的研究藏药熏倒牛Biebersteinia heterostemon地上部分化学成分。方法采用硅胶、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20、半制备高效液相色谱等方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果从熏倒牛醋酸乙酯部位中分离得到13个化合物,分别鉴定为伞形花内酯(1)、5,7,3′-三羟基-8,4′,5′-三甲氧基黄酮(2)、木犀草素(3)、槲皮素(4)、原儿茶酸甲酯(5)、芹菜素(6)、格链孢酚(7)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(8)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(9)、(+)-去氢催吐萝芙木醇(10)、β-谷甾醇(11)、4′-methoxytricetin(12)、3′,4′,5,8-四羟基黄酮-7-O-β-吡喃葡萄糖苷(13)。结论化合物3、5~7、10、11~13为首次从该植物中分离得到,其中5、7、10、12、13为首次从该属植物中分离得到。