改良Bielschowsky银染色复染法对牙本质神经的观察

改良Ｂｉｅｌｓｃｈｏｗｓｋｙ银染色复染法对牙本质神经的观察汪竹平田济溪王铎肖水清银染色是研究牙本质神经分布的传统方法，由于牙本质中嗜银纤维的干扰，使染色背景常呈灰黑色，难以突出神经纤维而影响观察效果。为淡化染色背景，本文采用改良的Ｂｉｅｌｓｃｈｏｗｓ...

一种改良Bielschowsky染色法显示触觉小体和游离神经末梢的方法

神经末梢是周围神经纤维的终末部分，包括感觉神经末梢和运动神经末梢，分布广泛并且形成多种多样的末梢装置，如：触觉小体、环层小体、游离神经末梢、肌梭、运动终板等。显示神经末梢的方法通常采用硝酸银浸染色法^[1]，氯化金浸染法和美蓝超生体染色法3类^[2]。以Bielschowsky氏法为代表的银浸染色法，主要用于显示神经细胞、神经原纤维、轴索、神经末梢，其最大特点是在显微镜下可控制其反应程度，效果较好。

Bielschowsky氏染色改良法显示网状纤维

显示网状纤维最常用的方法是银浸染法.银浸染技术早在1904年由Bielschowsky氏用于神经原纤维的研究,后经多次改良,发展为各种氨银液浸染法.例如：改良Bielschowsky氏法,Perdrau氏法,Foot氏法,Gomori氏法,Wilder氏法,Gorden-Sweets氏法,James氏法等十多种.

Bielschowsky氏改良法(摘要)

BielSchowsry 氏法是神经轴索、树突及细胞内原纤维网染色的良好方法,用以鉴别神经源性肿瘤及神经胶质瘤。但该法染色时间长,氨性银液要新鲜配制。我们在实践中发现把4%硝酸银液改为10%,使常温下染色时间缩短,一半,配制多时的氨性银液亦可使用,节省试剂。

先天性上斜肌不全麻痹手术前后Bielschowsky歪头试验的变化

目的 探讨先天性上斜肌不全麻痹手术前、后Bielschowsky歪头试验的变化。 方法根据患眼原在位的垂直斜视度数 ,按照麻痹性斜视的手术原则 ,采用常规手术方式 ,减弱麻痹肌的直接拮抗肌和配偶肌 ,即减弱患眼的下斜肌和对侧眼的下直肌 ,治疗 38例单眼先天性上斜肌不全麻痹患者。手术前、后采用三棱镜遮盖法定量进行Bielschowsky歪头试验 ,检查患者原在位和头部向双侧倾斜时患眼的垂直斜视度数。以头部向患眼侧倾斜时患眼的垂直斜视度数高于头部向健眼侧倾斜时患眼的垂直斜视度数的数值≥ 5 0 △ 为Bielschowsky歪头试验阳性。结果 术前全部患眼的垂直斜视度数原在位为 3 0 △ ～ 2 5 0 △ ,平均为 11 0 △ ;头部向患眼侧倾斜时为 15 0 △ ～ 4 0 0 △ ,平均为 2 3 0 △ ;头部向健眼侧倾斜时为 0 0 △ ～ 10 0 △ ,平均为 2 5 △ ,Bielschowsky歪头试验均为阳性。术后全部患眼原在位的垂直斜视度数为 0 0 △ ～ 5 0 △ ,平均为 2 0 △ ;4例患者Bielschowsky歪头试验转为阴性 ,34例仍为阳性 (89 5 % )。结论 采用减弱患眼下斜肌和对侧眼下直肌方法治疗先天性上斜肌不全麻痹 ,术后患者Bielschowsky歪头试验的转阴率较低。以其作为手术疗效的评价标准值得探讨。

改良Bielschowsky氏银浸染色法在癫痫患者脑组织标本神经元染色中的应用

目的探讨改良Bielschowsky氏银浸染色法在癫痫患者脑组织标本神经元染色中的应用。方法对83例癫痫患者脑组织的冰冻切片行常规HE染色、未改良Bielschowsky氏银浸染色法及改良Bielschowsky氏银浸染色法,观察和评估镜下切片质量。结果改良Bielschowsky氏银浸染色法脱片、皱褶等情况减少,所显示出的神经元轴突和树突呈棕黑色,背景为淡棕色。改良Bielschowsky氏银浸染色法切片评分优于未改良Bielschowsky氏银浸染色法[(99.8±0.4)分vs.(88.4±1.9)分](P<0.05)。结论改良Bielschowsky氏银浸染色法效果稳定,有进一步推广的临床应用价值。

淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方对阿尔采末病转基因动物模型的学习记忆能力及病理学影响

目的观察淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方对APPswe/PS1ΔE9双转基因小鼠的学习记忆能力及病理学影响。方法 6月龄♂APPswe/PS1ΔE9双转基小鼠20只,随机分为模型组和复方组。复方组灌胃给予淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方3个月,模型组给予等量生理盐水。6月龄♂C57BL/6J小鼠10只为阴性对照组。灌胃结束后,采用Morris水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力情况,并于水迷宫后灌注处死各组小鼠,采用改良Bielschowsky银染法以及尼氏染色法观察小鼠大脑组织病理学变化。结果水迷宫定位航行实验结果显示,APPswe/PS1ΔE9双转基因小鼠的逃避潜伏期与C57对照组小鼠相比明显延长(P<0.05),复方组小鼠的逃避潜伏期与模型组小鼠相比明显缩短(P<0.05);空间探索实验结果显示,APPswe/PS1ΔE9双转基因小鼠与C57对照组小鼠相比跨台次数减少(P<0.05),复方组小鼠跨台次数与模型组小鼠相比明显增多(P<0.05)。APPswe/PS1ΔE9双转基因小鼠的游泳速度与C57对照组小鼠相比增大(P<0.05),复方组小鼠的游泳速度与模型组小鼠相比差异无显著性(P>0.05)。改良Bielschowsky银染法结果显示,C57对照组小鼠大脑皮质未见明显改变,神经原纤维排列有序、稀疏。模型组小鼠大脑皮质神经原纤维增粗、肿胀,密集成宽带状,深染,神经纤维缠结明显,分布有大量老年斑,复方组小鼠大脑皮质神经纤维缠结情况减轻,可见少量老年斑。尼氏染色结果显示,C57对照组小鼠海马各区神经细胞排列整齐且密集,胞质中尼氏体丰富,大脑皮层尼氏小体呈深蓝色,细胞核淡蓝色,背景略呈浅蓝色;模型组小鼠神经元水肿,细胞数量减少,排列稀疏,细胞间隙增大,胞质内尼氏体减少,分界不清,染成淡蓝色;复方组小鼠较模型组小鼠神经元水肿减轻,细胞数量增多,排量相对整齐,分界清晰。结论APP/PS1双转基因AD小鼠能够较好地模拟AD患者的表现及病理过程,提供有效的实验动物模型。淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方可以有效地改善APP/PS1双转基因AD模型小鼠的学习记忆能力,减轻其大脑皮质神经纤维缠结、老年斑以及神经元水肿等改变。

新型复合式老年痴呆动物模型的建立

目的建立一种新的复合式老年性痴呆(AD)大鼠模型,用于AD及其治疗药物的研究。方法选用雄性正常老年Wistar大鼠,左侧侧脑室一次性注射5μL聚集态的Aβ25-35,制备AD动物模型。通过水迷宫试验、脑组织Aβ免疫组化染色和银染色,比较AD模型大鼠和正常老年大鼠的差异。结果模型组大鼠的逃避潜伏期明显延长(P<0.01);免疫组化结果示模型组海马、额叶和颞叶Aβ阳性细胞数增加,平均灰度值显著降低(P<0.01),且染出了脑淀粉样血管病变(CAA)、老年斑(SP)和小胶质细胞;模型组Bielschowsky染色可见星形胶质细胞,但并未见到典型的NFTs。结论老年大鼠加左侧侧脑室一次性注射聚集态的Aβ25-35所致的AD模型在一定程度上模拟了AD的发病特点,可以作为AD及其治疗药物研究的一种新模型。

阿尔茨海默病转基因动物模型的学习记忆能力改变及病理学观察

目的观察APPswe/PS1ΔE9双转基因小鼠的学习记忆功能及其病理学改变。方法 9月龄雄性APPswe/PS1ΔE9双转基因小鼠和9月龄雄性C57BL/6J小鼠各10只,采用Morris水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力情况,并于水迷宫后灌注处死各组小鼠,采用改良Bielschowsky银染法以及尼氏染色法观察小鼠大脑组织病理学变化。结果水迷宫定位航行实验结果显示,APPswe/PS1ΔE9双转基因小鼠的逃避潜伏期与C57对照组小鼠相比明显延长(P<0.05);空间探索实验结果显示,APPswe/PS1ΔE9双转基因小鼠与C57对照组小鼠相比跨台次数减少(P<0.05)。改良Bielschowsky银染法结果显示,C57对照组小鼠大脑皮质未见明显改变,神经原纤维排列有序、稀疏。APPswe/PS1ΔE9双转基因小鼠大脑皮质神经原纤维肿胀,密集成宽带状,可见神经纤维缠结,有老年斑散在分布。尼氏染色结果显示,C57对照组小鼠海马各区神经细胞排列密集、整齐,胞浆中尼氏体丰富,大脑皮质尼氏小体呈深蓝色,细胞核淡蓝色,背景略呈浅蓝色;APPswe/PS1ΔE9双转基因小鼠神经元水肿,细胞数量减少,排列稀疏,细胞间隙增大,胞浆内尼氏体减少,分界不清,染成淡蓝色。结论 APPswe/PS1ΔE9双转基因AD小鼠能够较好的模拟AD患者的表现及病理过程,提供有效的实验动物模型。

银染法观察甲状腺激素人工神经促进周围神经再生的研究

目的 用Bielschowsky神经纤维银染法观察再生有髓神经通过PDLLA T3 支架材料的情况及大鼠有髓再生神经纤维的数量。方法 SD大鼠 5 4只 ,分成PDLLA T3 、PDLLA组和自体移植组 3组 ,同只大鼠右侧坐骨神经为正常对照。培养新生大鼠坐骨神经的雪旺细胞 ,将其种植在PDLLA T3 和PDLLA材料上备用 ,每只大鼠左侧坐骨神经经手术造成 1cm缺损 ,然后分别用以上 3组材料进行移植修复 ,在伤后 2周、1个月、2个月 3个时相点收集标本进行神经银染 ,染色结果通过图象分析仪进行分析 ,统计数据行t检验。结果 伤后 2周时各组均见新生的神经纤维通过神经移植段 ,各组之间无显著性差异 ,直到伤后 1个月 ,2个月后 ,PDLLA T3 组好于PDLLA组 ,差异有显著性 ,P <0 .0 5。自体移植组髓神经增加明显 ,高于其他 2组 ,差异有显著性 ,P <0 .0 5 ,但低于正常值。结论 Bielschowsky神经纤维银染法观察大鼠神经再生效果满意 ,新生的神经纤维可以通过PDLLA T3 ,效果好于PDLLA。