两歧双歧杆菌在荷瘤鼠模型中的靶向定植及对巨噬细胞的免疫激活

目的:证实两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum,B.bifidum KLDS2.9502)在荷瘤裸鼠模型中的靶向定植作用,检测其对腹腔巨噬细胞的免疫刺激作用。方法:建立人胃癌移植瘤裸鼠模型,尾静脉注射B.bifidum KLDS2.9502,摘取心、肝、脾、肺、肾及瘤体组织,采用石蜡包埋技术和体外厌氧培养的方法,在光学显微镜下观察双歧杆菌在荷瘤裸鼠心、肝、脾、肺、肾和瘤组织中的生存和分布情况。提取腹腔巨噬细胞,在激光共聚焦显微镜下观察巨噬细胞核内DNA和RNA的表达;MTT法和中性红吞噬试验检测荷瘤裸鼠腹腔巨噬细胞的能量代谢能力和吞噬能力;硝酸还原酶法和ELISA法分别检测巨噬细胞分泌NO和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的量。结果:通过对组织石蜡切片鉴定、组织匀浆体外厌氧培养检测发现B.bifidum KLDS2.9502只存在并生长于瘤体组织中,并能刺激荷瘤鼠腹腔巨噬细胞能量代谢能力和吞噬能力的增强(P<0.05),显著提高巨噬细胞分泌NO[(103.48±0.26)μmol/L]和TNF-α[(45.32±0.85)pg/mL]的水平(P均<0.01)。结论:两歧双歧杆菌能特异性定植于荷瘤鼠的瘤体中,并免疫激活腹腔巨噬细胞,提高相关肿瘤细胞毒性因子NO和TNF-α分泌水平,提示其可作为一种靶向治疗肿瘤的转基因生物载体。

灵芝孢子粉和双歧杆菌对小鼠菌群失调的治疗作用

目的:研究灵芝孢子粉(GSP)、双歧杆菌(BB)对小白鼠肠道菌群失调的治疗作用。方法:用盐酸林可霉素注射液给实验小鼠灌胃0.36 g/kg连续6 d,建立小鼠菌群失调模型。将小鼠随机分成11组,每组10只,包括一个正常对照组(CG),一个菌群失调模型组(MIG)和9个治疗组(根据不同剂量和治疗方法建立的3个GSP治疗组,3个BB治疗组以及3个共同治疗组)。连续6 d后,处死小鼠,取直肠粪便并用生理盐水稀释成1×10-7、1×10-8、1×10-9三个稀释度,行有氧及厌氧培养48 h后作菌落计数,数据进行统计学处理。结果:成功建立了小鼠肠道菌群失调模型,MIG组的需氧菌和厌氧菌菌落计数均低于CG组,并且在经过GSP和BB治疗后小鼠肠道菌群数量明显得到恢复,其中高剂量灵芝孢子粉和高剂量双歧杆菌治疗组的效果最好,与CG组及相应中、低剂量组比较有统计学意义(P<0.05)。结论:GSP和BB对治疗因抗生素引起的肠道菌群失调有显著的作用。

双歧杆菌对大鼠肠上皮细胞Toll样受体2和Toll样受体4表达的影响

目的观察双歧杆菌对大鼠肠上皮細胞Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(ILR4)表达的影响,为双歧杆菌治疗新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC)提供理论依裾。方法选取50只健康SD大鼠,适应性喂养1周后采取TNBS法造模,将以上大鼠随机分为对照组与观察组,每组25只。对照组给予常规饲养,观察组在常规饲养的基础上给予双歧杆菌经口2 ml/d灌服,连续饲养3周后比较两组大鼠一般状况、肠黏膜大体评分、组织学评分与RTPCR检测结果。结果观察组大鼠一般状况总体要比对照组大鼠轻,且IOd后有缓解迹象;观察组大鼠肠黏膜大体评分、组织学评分低于对照组,大鼠肠组织中TLR2与TLR4表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论双歧杆菌能够抑制TLR2与TLR4的表达,减轻肠黏膜损伤程度,促进肠道正常生理功能的恢复,为双歧杆菌治疗NEC提供了实验支持。

老年男性冠心病患者肠道菌群结构特点的研究

目的初步探讨老年冠心病患者肠道菌群结构的特点及差异。方法选取2018年10月~2020年1月北京某三甲医院住院的老年男性患者66例,将血管狭窄≥50%的36例作为冠心病组,血管狭窄<30%的30例作为对照组,收集患者大便进行处理,采用16S rDNA高通量测序方法分析样本肠道菌群结构。结果Alpha多样性分析显示,冠心病组操作分类单元和Shannon指数高于对照组[(295.70±64.33)类vs(242.10±69.11)类,P=0.037;3.25±0.54 vs 2.33±0.56,P=0.020],Simpson指数低于对照组(0.08±0.03 vs 0.12±0.03,P=0.019);门层级水平,2组样本多样性无明显差异(P>0.05);冠心病组放线菌门细菌丰度较对照组增多、梭杆菌门细菌丰度较对照组减少(P<0.05,P<0.01),变形菌门较对照组减少,近统计学差异(P=0.0527)。属层级水平,2组多样性和物种丰度均有差异(P<0.05),冠心病组以双歧杆菌属和真杆菌属为主(P<0.05),对照组以志贺菌属和粪杆菌属丰度较高(P<0.05)。结论冠心病组肠道菌群的多样性更高,放线菌门、双歧杆菌属和真杆菌属相对丰度更高。

双歧杆菌治疗质子泵抑制剂致老年胃食管反流病患者肠道菌群紊乱的效果及对胃肠激素的影响

目的探究双歧杆菌对质子泵抑制剂(PPIs)药物致老年胃食管反流病(GERD)患者肠道菌群紊乱和胃肠激素水平的影响。方法选择2017年2月至2019年3月青海省中医院消化内科收治的78例长期服用PPIs的老年GERD患者纳入GERD组,30例同期查体的健康老年人作为研究对象(非GERD组),采用随机数字表法将GERD组患者分为观察组及对照组,观察组患者在常规使用PPIs基础上联合双歧杆菌三联活菌胶囊治疗,对照组维持PPIs药物治疗。比较GERD患者及非GERD组受试者肠道菌群数量差异及胃泌素(GAS)、胃动素(MOT)、5-羟色胺(5-HT)、血管活性肠肽(VIP)胃肠激素水平差异,分析观察组及对照组干预前后肠道菌群数量、胃肠激素水平及营养指标变化及差异。结果①GERD组患者双歧杆菌、乳酸杆菌数量显著低于非GERD组,肠球菌、葡萄球菌数量显著高于非GERD组(P<0.05);GERD患者血清GAS、5-HT、VIP等胃肠激素水平显著高于非GERD组,MOT水平显著低于非GERD组,差异有统计学意义(P<0.05)。②与基线时间点比较,观察组双歧杆菌、乳酸杆菌数量明显增加(P<0.05),大肠埃希菌、葡萄球菌数量明显降低(P<0.05),两组治疗后双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠埃希菌、葡萄球菌数量比较差异有统计学意义(P<0.05)。③治疗后观察组MOT水平均显著高于对照组(P<0.05);GAS、5-HT、VIP等激素水平显著低于对照组(P<0.05)。④治疗后观察组血红蛋白、白蛋白等营养功能指标显著优于对照组(P<0.05)。结论长期使用PPIs老年GERD患者存在肠道菌群失调现象,口服双歧杆菌三联活菌胶囊可纠正肠道菌群失调,改善胃肠道功能及机体营养水平。

双歧杆菌联合柳氮磺胺吡啶对溃疡型结肠炎患者炎性递质的影响

目的研究双歧杆菌联合柳氮磺胺吡啶对溃疡型结肠炎患者炎性递质的影响。方法选择河南省长葛市人民医院2014年11月—2015年10月收治的溃疡型结肠炎患者108例,按照随机数字表法分为对照组和治疗组,各54例。对照组仅采用柳氮磺胺吡啶治疗,治疗组采用双歧杆菌联合柳氮磺胺吡啶治疗,观察比较两组患者肠道菌群变化、血清炎性递质变化、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平及不良反应发生情况。结果治疗组患者肠球菌、乳酸杆菌、双歧杆菌值高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组血清及肠黏膜中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)、MDA均低于对照组,白介素10(IL-10)、SOD均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论双歧杆菌联合柳氮磺胺吡啶治疗溃疡型结肠炎疗效显著,能有效抑制炎性反应,提高治疗效果,减轻患者痛苦,可作为临床治疗溃疡型结肠炎的首选方法。

微生态制剂对溃疡性结肠炎患者治疗前后临床疗效观察

目的观察微生态制剂如枯草杆菌和屎肠球菌（美常安），双歧杆菌活菌抵制剂（丽珠肠乐）联合柳氮磺胺吡啶（SASP）片治疗轻、中度活动期溃疡性结肠炎（UC）的临床疗效和安全性。方法采用随机、对照设计，将30例轻、中度活动期UC患者分为：美常安联合SASP组（A组）10例、丽珠肠乐联合SASP组（B组）10例、SASP组（C组）10例，疗程均为4周。对3组患者治疗前后的大便菌群、临床症状总积分降低百分比、Suthedand疾病活动性指数、肠镜分级、组织学分级变化进行比较。结果大便菌群变化、临床症状总积分降低百分比，A、B组治疗前后为显效，C组治疗前后为有效。治疗前后3组（组内）Suthedand指数、肠镜分级积分、病理组织学分级积分变化均具有统计学意义。3组（组间）比较：Sutherland指数变化差值均数分别为5．400±1．848、5．500±2．273、2．500±0．527，A、B组间差异无统计学意义，与C组比较差异均有统计学意义；肠镜分级积分变化差值均数分别为1．800±0．422、2．100±0．316、0．800±0．432，A、B组间差异无统计学意义，与C组比较差异均有统计学意义；病理组织学分级积分变化差值均数分别为1．900±0．544、1．800±0．484、0．600±0．516。结论SASP加用微生态制剂治疗轻、中度活动期UC的临床疗效优于单用SASP，而SASP联合美常安，SASP联合丽珠肠乐两组间无明显差异，皆具有较好的安全性，具有临床推广价值。

原发性肝癌患者内毒素与肠道菌群变化的相关性研究

目的探讨原发性肝癌患者血液中的内毒素及粪便中肠道菌群的变化与原发性肝癌的相关性。方法采用实时荧光定量PCR方法检测双歧杆菌、乳酸杆菌、肠球菌、大肠杆菌在原发性肝癌组和正常组中的表达差异。检测内毒素在原发性肝癌组和正常组中的差别。结果大肠杆菌和肠球菌在原发性肝癌组明显增加和正常健康组比较差异有统计学意义(P <0. 05),双歧杆菌及乳酸杆菌在原发性肝癌组明显减少,和正常健康组比较差异有统计学意义(P<0.05)。原发性肝癌组血清中内毒素含量明显高于正常健康对照组,差异有统计学意义(P<O.05)。双歧杆菌、乳酸杆菌在原发性肝癌组增加,肠球菌、大肠杆菌在原发性肝癌组之间减少,内毒素含量变化在原发性肝癌组与肿瘤数量、肿瘤直径呈显著正相关。结论原发性肝癌患者中双歧杆菌、乳酸杆菌减少,肠球菌、大肠杆菌增加,这几种菌属的变化和内毒素的增加可能与原发性肝癌的发生有相关性。

评估丹尼斯克乳双歧杆菌Bi07及嗜酸乳杆菌NCFM对人体肠道消化系统微生态环境改善功效的研究

目的评估丹尼斯克乳双歧杆菌Bi07及嗜酸乳杆菌NCFM对人体肠道消化系统微生态环境改善效果。方法将符合要求的400名25～45岁志愿者根据男：女=1：1的比例随机分为安慰剂组、益生菌产品组2个组。所有400名志愿者，分别在试验第一天至最后一天服用对应产品，每天2次，分别于上午10点和下午4点服用，每次100g，持续3周。结果可有效改善人体肠道消化系统微生态环境，志愿者体内双歧杆菌、乳杆菌活菌数显著增加（P〈0．01），产气荚膜杆菌活菌数显著减少（P〈0．01）。结论连续服用丹尼斯克益生菌产品21d，每天200g，对人体肠道消化系统微生态环境的改善具有显著效果。

双歧四联活菌辅助治疗抑郁症疗效观察及作用机制研究

目的探讨双歧四联活菌辅助草酸艾司西酞普兰治疗抑郁症患者的临床疗效及其可能作用机制,为进一步临床研究提供依据。方法选取台州市第二人民医院2019年9月至2021年3月收治的抑郁症患者100例为观察对象,采用随机数字表法分为对照组和观察组,每组50例。对照组采用草酸艾司西酞普兰和安慰剂治疗,观察组采用草酸艾司西酞普兰联合双歧四联活菌治疗,两组治疗周期为9周。采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)和汉密尔顿焦虑量表(HAMA)对两组患者治疗前后心理状态进行评分,应用酶联免疫吸附法测定两组患者治疗前后血清皮质醇、炎性因子[白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)]水平。结果治疗后,两组心理状况评分均较治疗前显著下降,观察组HAMD评分[(10.78±2.03)分]、HAMA评分[(6.37±2.58)分]均显著低于对照组[(16.78±2.85)分、(13.23±2.95)分](t=11.40、13.38,均P<0.001)。治疗后,两组血清皮质醇、IL-1β、TNF-α水平均较治疗前显著下降,观察组血清皮质醇[(137.34±63.29)μg/L]、IL-1β[(14.38±6.08)ng/L]、TNF-α[(13.95±6.46)ng/L]均显著低于对照组[(181.22±59.27)μg/L、(25.94±6.92)ng/L、(20.44±6.24)ng/L](t=15.29、6.16、9.24,均P<0.001)。结论采用双歧四联活菌辅助草酸艾司西酞普兰治疗抑郁症可有效减轻患者抑郁、焦虑情绪,显著降低血清皮质醇及IL-1β、TNF-α水平。

益生菌制剂双歧杆菌联合地奈德乳膏治疗婴儿湿疹的临床研究

目的评价益生菌制剂双歧杆菌联合地奈德乳膏治疗婴儿湿疹的疗效。方法选取该院2018年8月至2019年7月儿保科门诊和儿科住院的湿疹患儿260例,按随机数字表法分为对照组和研究组。对照组采用地奈德乳膏及常规综合治疗,研究组在对照组基础上加用双歧杆菌口服。观察两组疗效、免疫功能改善及复发情况。结果治疗后2周对照组湿疹皮损严重度评分系统(SCORAD)评分(16.11±2.38)分,研究组(10.53±1.17)分,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后4周对照组(10.58±2.04)分,研究组(6.12±0.87)分,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后2周、4周、6个月研究组免疫异常比例小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后6个月,研究组复发20例,对照组复发48例,差异有统计学意义(χ^2=13.9192,P=0.0002)。两组在治疗与随访期间均未发现明显不良反应。结论益生菌制剂双歧杆菌联合地奈德乳膏治疗婴儿湿疹疗效明显,复发率低,安全性高。