肠炎沙门菌BigA蛋白自转运区段的原核表达与鉴定

为了从肠炎沙门菌C50041中克隆Big A蛋白自转运区段编码序列(big A-C),并原核表达该区段蛋白进行免疫原性分析,利用生物信息学手段初步预测Big A蛋白结构与功能信息,以PCR扩增big A-C序列,采用原核表达载体p ET30b(+),在大肠杆菌中表达肠炎沙门菌C50041的Big A蛋白自转运区段(Big A-C),经动物免疫和ELISA鉴定表达蛋白的免疫原性。结果显示,从肠炎沙门菌中克隆的大小为750 bp的big A-C序列,其原核融合表达产物His-Big A-C大小为35 ku。以蛋白免疫小鼠获得的抗血清可与肠炎沙门菌全菌抗原反应,证实big A-C序列编码的Big A-C具有免疫原性,预示其在肠炎沙门菌感染过程中发挥重要作用。