胆南星治疗癫痫有效成分及作用机制研究进展

胆南星作为临床中抗癫痫的常用中药之一,为制天南星的干燥块茎细粉与牛、羊或猪胆汁经加工后合成。胆南星味苦、微辛,性凉,入肝、脾、肺三经,具有清热燥湿化痰、祛风解痉定惊之功。随着现代医学的进步,胆南星化学成分及药理作用的挖掘得到进一步开展。相关实验证明,胆南星的有效成分主要包括以β-谷甾醇、豆甾醇、胆固醇为代表的甾醇类和以鹅去氧胆酸、脱氧胆酸、丙戊酸为主的胆汁酸类等,其主要通过调节神经递质、抗炎、抗氧化、抗惊厥、调控血脑屏障和胶质细胞等方式来发挥神经系统作用,可全方位、多角度抑制癫痫发作。该文通过查阅近10年相关文献,综述了胆南星治疗癫痫的相关有效成分及作用机制,为胆南星抗癫痫提供了科学依据,以期为临床药物的研发提供有益参考。

胆南星炮制工艺、化学成分及药理作用研究进展

为进一步优化胆南星炮制工艺,开发胆南星临床应用,在查阅了历代本草古籍、《中华人民共和国药典》、各省中药炮制规范等相关书籍,结合中国知网、万方数据、维普网、PubMed等数据库中的相关文献,对其中所载有关胆南星的炮制工艺、化学成分、药理作用及临床应用进行总结。胆南星传统炮制方法为发酵法、混合蒸制法及复制法,现代出现了利用微生物工程技术发酵的方法。胆南星化学成分包括多糖类、黄酮类、生物碱类、皂苷类、胆汁酸类等,具有解热抗炎、抗惊厥、镇痛、祛痰等药理作用。由于胆汁来源和炮制方法的不同,其所含的化学成分和药理作用有明显的区别,通过比较不同炮制方法、不同炮制条件下胆南星活性成分、药效学变化,为后续胆南星炮制工艺优化及其开发利用提供文献依据。

基于PKA信号通路探讨胆南星对MPTP诱导帕金森病模型小鼠的保护作用

目的 探讨胆南星对帕金森病(PD)模型小鼠的改善作用及可能机制。方法 将60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、胆南星低剂量组[0.39 g/(kg·d)]、胆南星高剂量组[1.56 g/(kg·d)]和阳性对照药左旋多巴片组[80 mg/(kg·d)],每组12只。除正常组小鼠注射等体积生理盐水外,其余各组连续5 d腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶[MPTP,35 mg/(kg·d)]建立亚急性PD模型;造模完成后连续给药治疗7 d,于造模前1 d、造模第5天和末次给药后进行爬杆实验和线悬挂测试。采用免疫荧光法检测小鼠脑黑质中酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元数量;采用酶联免疫吸附法检测小鼠血清中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平以及脑黑质中IL-1β、TNF-α、环氧合酶2(COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)水平;采用Western blot法检测小鼠脑黑质中cAMP依赖的蛋白激酶催化亚单位α(PKA C-α)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)以及铁蛋白重链多肽1(FTH1)蛋白的表达。结果 末次给药后,与正常组比较,模型组小鼠爬杆时间显著延长(P<0.01),线悬挂评分显著降低(P<0.01),脑黑质中TH阳性神经元数量显著减少(P<0.01),血清中IL-1β、TNF-α水平和脑黑质中IL-1β、TNF-α、COX-2、iNOS水平显著升高(P<0.01),脑黑质中GPX4、PKA C-α和FTH1蛋白表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,胆南星高剂量组小鼠上述指标水平均显著回调(P<0.05或P<0.01)。结论 胆南星能够改善MPTP诱导的PD模型小鼠运动能力障碍,减少脑黑质TH神经元死亡,对模型小鼠具有神经保护作用;这可能与其激活PKA信号通路来抑制神经炎症和神经元细胞铁死亡有关。

胆南星的炮制、成分分析及药理研究进展

胆南星是我国常用的传统中药,具有清热化痰、息风定惊的功效。本文通过查阅历代本草著作及相关文献资料,将历版《中国药典》与各地炮制规范进行深入比较,对胆南星的炮制历史沿革、现代炮制规范、主要成分及物质基础、炮制工艺、质量分析技术和药理作用进行梳理和归纳,为胆南星的进一步研究提供参考。

HPLC测定胆南星中猪去氧胆酸的含量

目的:建立胆南星中猪去氧胆酸含量测定方法,为其质量控制提供方法。方法:用HPLC-蒸发光散射检测测定样品的猪去氧胆酸含量。色谱和检测条件:Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温35℃;流动相甲醇-水-冰醋酸(75∶25∶0.01),流速1 mL.min-1;漂移管温度85℃,空气流速3.0 L.min-1。结果:猪去氧胆酸进样量在2.4～24μg,进样量和峰面积的对数呈线性(r=0.999 8)。平均加样回收率为97.1%,RSD 3.0%(n=5)。结论:方法简便,测定准确,且重复性好,可用于胆南星的质量控制。

基于UHPLC-Q-TOF MS/MS的胆南星中胆汁酸类成分的质谱裂解规律研究

采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UHPLC-Q-TOF MS/MS)法研究胆南星中4种类型25种胆汁酸类成分在电喷雾离子源正、负离子模式下的质谱裂解规律。结果表明,一级质谱中,25种胆汁酸类成分均可得到加氢(脱氢)的准分子离子峰[M+H]+([M—H]^-);二级质谱中,不同类型胆汁酸类成分(包含多种同分异构体)的裂解途径大多是脱去母核上的取代基产生H 2O及CO 2的中性碎片丢失。尤其是甾体母核C17位的功能基团更易裂解,产生一系列特征性碎片离子。游离胆汁酸在正离子模式下可发生A环和C环开裂,产生m/z 175.1123、161.0966、147.0814离子;在负离子模式下可发生中性丢失,形成[M—H—CO 2]^-、[M—H—H 2CO 2]^-、[M—H—H 2O—H 2CO 2]^-离子。此外,在正离子模式下,牛磺酸型胆汁酸可形成牛磺酸基裂解碎片离子m/z 126.0226,甘氨酸型胆汁酸可形成甘氨酸基裂解碎片离子m/z 158.0818;在负离子模式下,牛磺酸型胆汁酸侧链断裂可产生丰度较强的磺酸基m/z 79.9568、牛磺酸基m/z 124.0073和牛磺酸脱氨m/z 106.9803碎片离子,甘氨酸型胆汁酸侧链断裂可产生丰度较强的m/z 74.0426碎片离子。在负离子模式下,单酮基胆汁酸母核裂解还可形成带有酮基的特征离子m/z 402.3013,而胆汁酸酯则难以形成稳定的负离子,在正离子模式下则可产生甘氨酸甲酯离子m/z 90.0557。这些质谱裂解规律有助于对胆南星中其它胆汁酸类化合物的结构进行解析与推断,也可为快速分析和鉴定含有胆汁酸类成分的样品提供依据。

胆南星的薄层色谱鉴别

目的建立以猪胆汁制的胆南星的薄层色谱鉴别方法。方法以环己烷-乙酸乙酯-冰醋酸(体积比8∶8∶0.8)为展开剂,以羧甲基纤维素钠为黏合剂自制硅胶G薄层板,20%磷钼酸溶液为显色剂,进行薄层色谱分析。结果胆南星药材和猪去氧胆酸对照品在薄层板上主斑点位置及颜色一致;且斑点集中,分离度好。结论所建立的方法快速、简便、灵敏、重现性好、专属性强,可作为以猪胆汁制的胆南星的质量控制方法之一。

胆南星化学成分的研究

目的研究胆南星Arisaema cum bile的化学成分。方法胆南星氯仿提取物采用硅胶、ODS、MCI进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到10个化合物,分别鉴定为胆固醇(1)、6-氧代-甘氨猪去氧胆酸甲酯(2)、鹅去氧胆酸甲酯(3)、猪去氧胆酸甲酯(4)、鹅去氧胆酸(5)、猪去氧胆酸(6)、甘氨猪去氧胆酸甲酯(7)、胆酸(8)、甘氨猪去氧胆酸、(9)牛磺鹅去氧胆酸(10)。结论所有化合物均为首次从胆南星中分离得到。

三十一批胆南星的对比研究

目的:对抽样于药材市场、医院、零售药店等单位的31批胆南星样品的质量进行对比研究,以考察胆南星的质量、完善胆南星的质量控制方法。方法:参考2010年版《中国药典》对31批样品进行质量检查,发现药典方法不能全面的检查胆南星的质量;因此增加了2种鉴别方法:1、胆汁的薄层色谱鉴别:以牛胆粉、羊胆粉、猪胆粉为对照药材,以胆酸、猪去氧胆酸为对照品,以环己烷-乙酸乙酯-乙酸-甲醇(10∶12.5∶0.5∶2)展开剂,以10%硫酸乙醇为显色剂。2、灰分分析:总灰分与酸不溶性灰分分析。结果:药典中的显微鉴别法可较好分析胆南星中植物部分的质量;新增的薄层鉴别法比糠醛试验法能更全面分析胆南星中胆汁的质量;灰分分析可鉴别胆南星中是否添加泥沙类杂物增重;新增方法与药典方法结合可全面的控制胆南星的质量。结论:胆南星的质量差异较大,合格率低;新增方法是药典方法的必要补充,建议下一版药典收载薄层鉴别法与灰分检查法。

胆南星辅料成分分析及其清热作用

目的:通过比较猪、牛、羊胆汁中胆酸类成分和对发热小鼠清热作用的差异,为胆南星炮制辅料的筛选提供参考依据。方法:采用HPLC-CAD法检测三种胆汁中胆酸类成分(胆酸、去氧胆酸、猪去氧胆酸、鹅去氧胆酸、牛磺胆酸钠)。色谱条件为Waters C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.5%甲酸(A)-乙腈(B),梯度洗脱,体积流量:1 mL·min^(- 1);进样量:20μL,Corona参数:氮气压力为35 psi(241.3 Kpa),Filter:high,Range 200 p A。以干酵母制备小鼠发热模型,观察猪、牛、羊胆汁对发热小鼠体温的影响。结果:猪、牛、羊胆汁中胆酸类成分存在明显差异,五种胆酸总量分别为1.495 0%、0.354 0%、0.597 6%,猪胆汁中猪去氧胆酸含量最多,为1.128 7%。猪、牛、羊胆汁对发热小鼠均有一定的清热作用,猪胆汁在6 h时表现出清热作用但不持久。牛胆汁在8 h时表现出较明显的清热作用。羊胆汁清热作用最明显且持久。结论:猪、牛、羊胆汁无论胆酸类成分含量还是清热作用均存在明显差异,提示我们应对药典规定的胆南星的三种胆汁进行区分,将其分别发酵制成胆南星后并结合药效评价再进行筛选。

辨胆南星炮制“胆”与“南星”孰重

目的探讨胆南星炮制的重点是在胆还是在天南星。方法通过古代本草文献研究与实践操作。结果胆南星炮制的本意是以胆之苦,制南星之燥,且胆汁本身有镇惊之功,用于治疗痰热惊风之证。但是在炮制方法上出现两种观点,一是重在南星,以胆制燥,以姜解毒;一是重在胆,以南星收汁,功近牛黄。结论胆汁添加的比例不同,使胆南星的功效主治发生了变化,这与明清时期的过度炮制相关。

胆南星炮制历史沿革与现代研究

胆南星为临床常用清热化痰、息风定惊中药。通过查阅和分析历版《中华人民共和国药典》、各地炮制规范及现代研究文献,整理胆南星炮制历史沿革,发现胆南星炮制存在选用胆汁不同、工艺各异、质量标准简单等问题,结合现代研究进展分析,胆南星采用不同胆汁、不同方法炮制具有合理性,但成分存在差异。建议不同原料或炮制工艺的胆南星分开标注,规范管理。

中药炮制辅料胆汁质量标准研究

目的:建立胆汁辅料质量标准,为提高和稳定胆汁制中药饮片质量和临床疗效提供参考。方法:收集不同批次的牛、猪、羊胆汁,对其进行质量分析,包括性状、理化和薄层鉴别,异性胆汁、相对密度、异性有机物和水分检查及总胆酸含量测定,制订胆汁辅料标准。采用胆汁发酵天南星,按照2020年版《中华人民共和国药典》对胆南星饮片进行质量检测从而评价辅料胆汁质量。结果:胆汁呈具有一定黏度的棕黄色至黄绿色或至绿褐色、半透明液体,气微腥,味极苦,含有胆汁酸类成分且均含有胆酸。薄层和显微检查表明样品中均无异性有机物掺入。胆汁相对密度为1.020~1.430,水分为86.53%~94.00%,紫外-可见分光光度法测得总胆酸含量为5.20~75.16 mg/mL。胆汁发酵后的胆南星饮片质量符合《中华人民共和国药典》规定。结论:初步建立了中药炮制辅料胆汁质量标准,可为中药炮制辅料胆汁质量标准制订提供依据。

消痰散结方对裸鼠人胃癌MKN-45端粒酶活性表达的影响

目的通过观察消痰散结方对裸鼠人胃癌MKN-45原位移植模型端粒酶活性表达的影响,探讨其抑制胃癌细胞增殖的作用机制。方法采用OB胶粘贴法建立裸鼠人胃癌MKN-45原位移植瘤模型,随机分成模型组、消痰散结方低、中、高剂量组、5-氟脲嘧啶(5-Fu),每组8只,运用PCR-ELISA方法检测端粒酶活性的表达。结果①消痰散结方低、中、高剂量组的平均瘤重与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.01);②消痰散结方中剂量组和5-Fu组端粒酶活性与模型组组比较明显降低,差异有统计学意义,P<0.05,消痰散结高剂量组端粒酶活性与模型组组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论消痰散结方抑制胃癌细胞生长,部分可能与其抑制端粒酶活性有关。

HPLC-ELSD法测定胆南星中胆酸含量

目的：建立HPLC-ELSD法测定胆南星中胆酸含量的方法.方法：色谱柱为Hypersil BDS C18色谱柱（4.6mm×200mm,5μm）,流动相为乙腈—水（36∶64）,柱温为25℃,流速为1.0mL·min1.检测器为ELSD,漂移管温度为100℃,载气流量为3.0L·min-1.结果：胆酸在0.14～1.4μg进样量范围内与其峰面积积分呈良好的线性关系（r=0.999 4）,平均加样回收率为97.13％,RSD=1.80％.结论：该方法简便准确,灵敏度高,可用于胆南星中胆酸含量的测定和产品质量控制.

东北南星不同炮制品的毒性及刺激性研究

目的 :考查不同炮制方法 (浸、煮 )及不同辅料 (矾、姜、胆汁 )对东北南星毒副作用的影响。方法 :通过口尝麻辣味、兔眼刺激、急性毒性实验 ,考查东北南星及其不同炮制品的刺激性及毒性。结果 :口尝麻辣味实验结果表明 ,矾制比姜制去麻效果好 ,加热比不加热去麻效果好 ;兔眼刺激实验结果与口尝麻辣味实验结果具平行性 ;急性毒性实验表明东北南星生品混悬液毒性不明显。结论 :实验说明 ,现行天南星炮制方法多采用白矾为辅料 ,加热炮制天南星 ,具有科学依据。东北南星生品临床使用具一定安全性。

炮制对东北南星中氨基酸及部分无机元素含量的影响

目的 :考查不同炮制方法 (浸、煮 )及不同辅料 (矾、姜、胆汁 )对东北南星中氨基酸及部分无机元素含量的影响。方法 :用高效液相色谱法测定氨基酸 ,用原子分光光度法测定无机元素。结果 :东北南星中总氨基酸含量生品明显高于各炮制品 ,胆南星含量最低 ,其它各炮制品含量相当。而炮制后有无机元素引入或损失。结论 :水漂是东北南星炮制后氨基酸含量降低的关键因素 。

小活络丸中胆南星的薄层色谱鉴别方法

目的:建立小活络丸中胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的薄层色谱鉴别方法,用以帮助提高胆南星的鉴别手段。方法:采用薄层色谱方法,在异辛烷-乙醚-冰醋酸-正丁醇-水(10∶5∶5∶3∶1)上层溶液的展开条件下对所抽取45批样品进行实验。结果:经过对13个被抽样单位共45批样品的薄层色谱结果进行汇总统计分析,有73.33%的样品检出胆酸,86.67%的样品检出猪去氧胆酸,93.33%的样品检出鹅去氧胆酸。结论:建立的胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的薄层色谱鉴别方法,可作为小活络丸中胆南星鉴别的辅助手段。

健脾化痰散结法联合生胆南星外敷治疗儿童霰粒肿24例

目的观察应用健脾化痰散结法联合生胆南星外敷治疗儿童霰粒肿的临床疗效。方法将门诊霰粒肿儿童患者45例,随机分为观察组24例与对照组21例,观察组予口服中药及生胆南星外敷,对照组予妥布霉素滴眼液点眼及眼部湿热敷。结果 2组治疗2周后,总有效率观察组95.83%(23/24)、对照组66.67%(14/21),2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论中药健脾化痰散结法联合生胆南星外敷治疗儿童霰粒肿有很好的疗效,值得推广。

胆南星拮抗热性惊厥模型小鼠脑组织损伤及炎症的作用研究

目的研究胆南星拮抗热性惊厥模型小鼠脑组织损伤及炎症的药效作用。方法采用干酵母混悬液及戊四氮溶液构建热性惊厥小鼠模型,考察不同剂量胆南星水提物对模型小鼠肛温、惊厥潜伏期及惊厥持续时间的影响,HE染色观察小鼠海马神经元形态,ELISA法检测小鼠血清cAMP、PGE_(2)水平,Western blot法检测脑组织COX-2、iNOS、γ-氨基丁酸A型受体(GABAAR)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)蛋白表达,qPCR法检测海马组织炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达。结果与模型组比较,胆南星高剂量组能够降低模型小鼠肛温(P<0.05),延长惊厥潜伏期(P<0.05),缩短惊厥持续时间(P<0.01),上调GABAAR蛋白表达(P<0.05);同时降低血清cAMP、PGE_(2)水平(P<0.01),改善海马神经元细胞形态学变化,下调脑组织COX-2、iNOS、GFAP蛋白表达(P<0.05),降低海马组织炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达水平(P<0.05)。结论胆南星具有良好的抗热性惊厥作用,其机制可能与解热、拮抗脑组织炎症有关。