微生物生态研究中Biolog Eco微平板培养时间对分析结果的影响

Biolog Eco微平板法已广泛用于环境微生物研究,能很好地反映不同环境下微生物群落差异性特征,而分析结果可能会受Eco微平板培养时间的影响,据此,本研究从AWCD值、微生物群落多样性指数、碳源代谢强度及代谢方式和PCA分析等角度,探讨了Biolog Eco微平板培养时间对分析结果的影响特征.研究表明:Biolog Eco微平板培养时间处于AWCD曲线"拐点"前与"拐点"后对分析结果影响显著(p<0.05),且"拐点"前各培养时间段微生物群落特征的分析结果明显不同,但培养时间处于AWCD曲线"拐点"处及其后各培养时间段的分析结果基本一致,且培养时间对分析结果的影响很小或可忽略不计,可能会较客观地反映环境微生物群落特点及不同样品间的差异性.因此,采用Biolog Eco微平板分析环境微生物群落特征时,建议微平板选择240h培养并连续读数,再根据240h的AWCD曲线"拐点"进行数据合理地选取和分析,得出的结论相对可能会与实际环境情况更为接近.

TK基因突变试验——琼脂平皿法与微孔平板法的比较

目的 TK(thymidinekinase)基因突变试验可采用琼脂平皿法或微孔平板法 ,本研究旨在比较两种方法的优劣 ,为选择一种适于在国内推广的方法提供依据。方法 同时使用琼脂平皿法和微孔平板法对四种化学物 (MMS、EMS、MMC、KCl)的致突变性进行检测与评价。结果 两种方法检出三种诱变剂的结果基本一致 ,但对KCl而言 ,琼脂平皿法检测结果为阴性 ,而微孔平板法检测结果为阳性。结论 就目前实验结果来看 ,宜推广琼脂平皿法在国内的应用。最终结论尚需增加更多受实物后才能确定。

Biolog微平板分析在微生物实验教学中的应用

微生物群落多样性分析有助于了解群落功能微生物的结构、生长生态特征、代谢活性和功能等,是许多学校微生物实验教学必开的实验项目之一。Biolog微平板分析法是利用氧化还原反应原理,定量描述土壤微生物对不同碳源的利用能力,该方法是目前研究微生物群落多样性最简单和快速的方法,将其用于微生物教学实践中具有很好的应用与推广前景。在分析Biolog微平板原理的基础上,阐述了Biolog微平板的优点及其在相关微生物教学实验中的应用。

多孔平板表面的气泡生成特性研究

具有微孔的多孔平板表面曝气是制备微气泡的重要手段之一。采用非侵入式数字图像识别法对金属多孔平板表面生成的微气泡特性进行实验研究,考察了平板上方液相流速、表观气速、液相黏度、表面张力和平板平均孔径对生成气泡平均直径(dav)的影响。结果表明:dav随着液相流速的增大而减小,随表观气速的增大和表面张力的减小而减小;液相黏度则对dav有双重影响,随着黏度的增加dav先减小后增大,且在黏度为1.32 mPa·s时最小。最后,提出了描述气泡平均直径与液相雷诺数、毛细管数和气液比之间关系的经验关联式。

基于刃天青微平板法测定交链格孢菌橘致病型对戊唑醇和苯醚甲环唑的敏感性

由交链格孢菌橘致病型(Alternaria alternata tangerine pathotype)引起的柑橘链格孢褐斑病(Alternaria brown spot,ABS)是柑橘上的主要病害,目前主要采用杀菌剂防治。本研究以采自中国各柑橘链格孢褐斑病发生区的54个交链格孢菌橘致病型菌株为供试群体,采用刃天青微平板法测定了病原菌孢子萌发和菌丝生长对戊唑醇和苯醚甲环唑的敏感性。结果表明:刃天青微平板法最佳体系中的培养基为完全培养基(CM),刃天青终浓度为40μmol/L,孢子浓度为105个/m L。戊唑醇和苯醚甲环唑的有效抑制中浓度(EC50)范围分别为0.304~0.885μg/m L和0.367~0.873μg/m L,平均值分别为0.562和0.609μg/m L。正态分布检测结果显示:这2种药剂抑制交链格孢菌橘致病型群体的EC50值均符合正态分布,因此认为所得EC50值可作为病原菌对戊唑醇和苯醚甲环唑的敏感性基线。本研究结果可为田间防治褐斑病和监测交链格孢菌对戊唑醇和苯醚甲环唑的抗药性奠定基础。

利用BIOLOG微平板筛选活性污泥激活剂

以生活污水为底物,利用改造后的BIOLOG微平板,对活性污泥激活剂进行定性和定量试验;利用初筛的活性污泥激活剂,采用活性污泥法对生活污水进行降解试验。实验结果表明,VC、VE、L-His、γ-氨基丁酸、L-Ala对活性污泥有一定的激活作用。当底物为200μL时,L-His的最佳用量为1μL;γ-氨基丁酸的最佳用量为0.5μL;L-Ala的最佳用量为0.5μL;VE的最佳用量为1μL;VC的最佳用量为1μL。其中VE对提高生活污水COD的降解效果明显。

Na_(2)O-CaO-SiO_(2)平板玻璃减反射功能化研究

随着光伏产业的高速发展,与之配套使用的减反射玻璃重新进入了研究者们的视野。本文采用湿化学二步刻蚀法制备了具有减反射性能的Na_(2)O-CaO-SiO_(2)平板玻璃,采用分光光度计、扫描电子显微镜、原子力显微镜和X射线能谱仪等测试样品的透过率、表面形貌和断面膜层厚度、表面化学成分、耐酸性和硬度,研究了反应温度和反应时间、玻璃膜层结构与透过率的关系。通过使用弱碱性的混合盐溶液对Na_(2)O-CaO-SiO_(2)玻璃表面进行化学刻蚀,使玻璃表面Si—O键断裂,在玻璃表面形成纳米膜层结构,当膜层厚度达到一定厚度时,一定波长的光在玻璃表面发生相消干涉,透过率最高可达到97.8%,刻蚀前后玻璃成分基本无变化,铅笔硬度达到3H。

Biolog-Eco解析黄山风景区空气微生物碳代谢多样性特征

采用Biolog生态微平板分析黄山风景区6个景区空气样品的微生物碳代谢群落结构,旨在了解不同景区空气微生物碳代谢功能群落结构的特点与差异.结果表明:6个景区AWCD值变化趋势不同,空气微生物在碳源利用能力、微生物丰度等方面存在差异,可能与海拔、气象、游客集中与流动等因素有关;6个景区空气微生物对6类31种碳源的利用程度存在差异,但总体对羧酸类和碳水化合物类的利用程度较高,对其它化合物类的利用程度较低;主成分分析显示,6个景区空气微生物代谢基质主成分1的贡献度为58.7%,主成分2为28.5%;主成分1荷载0.55以上的基质有25种,主成分2只有7种.Biolog生态微平板技术能够客观、正确表征空气微生物碳代谢多样性的特征,是研究空气微生物群落功能多样性的较理想方法之一.

Biolog-ECO解析淡豆豉发酵过程中微生物群落碳代谢特征

微生物是淡豆豉发酵的核心,研究淡豆豉发酵炮制过程中微生物群落碳代谢情况,对于揭示淡豆豉炮制机理意义重大。采用Biolog生态微平板研究了不同发酵时间点淡豆豉样品的碳代谢特征。结果表明:发酵第6天样品的AWCD值在整个培养过程中明显高于其它样品,发酵第1天,再闷9和15 d样品的AWCD值曲线差异不明显;多样性分析显示,各样品间微生物Shannon-Wiener指数H'值相近,而第6天样品的Mclntosh指数U值明显高于其它发酵时间点的样品;各样品微生物的最佳碳源种类相近,主要利用了β-甲基-D-葡萄糖苷、N-乙酰-D-葡萄糖胺、D-甘露醇、葡萄糖-1-磷酸盐、D-半乳糖醛酸、吐温40等碳源,对γ-羟基丁酸、α-丁酮酸、L-精氨酸、L-α-甘油、i-赤藻糖醇等利用较少。研究表明,发酵第6天微生物群落的碳代谢活性最高;各样品微生物的丰富度相近,第6天样品微生物的均匀度与其它样品差别较大;整个发酵过程微生物的最佳碳源种类相近,主要利用了糖类及其衍生物,而对氨基酸、脂肪酸、脂类利用较少。ECO板能真实反映出淡豆豉发酵中微生物对碳源利用的整体代谢情况,但也有其局限性。

平行平板间Couette流起动过程的运算微积解

求解平行平板间Couette流的起动过程通常使用分离变量法,得到的速度分布在平板间距趋于无穷时难以逼近Stokes第一问题的解,而两者在物理上却是完全一致的。本文利用运算微积法和Heaviside算子进行求解,不但解决了这一问题,而且具有运算简单的特点。

微菌落法评价含氯消毒剂杀菌效果研究

目的:建立评价含氯消毒剂杀菌效果的微菌落技术。方法:按卫生部2002年版消毒技术规范进行含氯消毒剂杀枯草杆菌黑色变种芽孢试验,用醋酸纤维素膜作为载体,直接用普通显微镜观察计数,评价杀菌效果。结果:微菌落法与常规平板计数法比较,所得含氯消毒剂杀枯草杆菌黑色变种芽孢有效剂量相同。结论:该法快速、结果准确、可靠,适用于含氯消毒剂杀菌效果评价。

含缓冲层的四层平板波导的微扰分析

给出计算含缓冲层的四层平板波导传播常数与衰减系数的高阶微扰理论，导出了由三层平板波导传输特性计算含缓冲层四层平板波导传输特性的高阶近似解析公式。方法简便易行，且可求得较高精度的结果。

大庆盐碱地九种植物根际土壤微生物群落结构及功能多样性

盐碱土是陆地表面生态脆弱区域。它与荒漠化过程相伴而生,不但造成了资源的破坏、农业生产的巨大损失,而且还对生物圈和生态环境构成威胁。研究盐碱地植物根际土壤微生物群落的多样性,对于盐碱土壤的植被恢复和生态重建具有重要意义。运用PCR-DGGE技术和Biolog微平板法,对大庆盐碱地9种不同植物根际土壤微生物结构和功能的多样性进行了分析。结果表明,不同植物根际土壤微生物组成不同,同一科的植物具有相似的微生物组成。对11个克隆进行了序列测定,发现这一地区植物根际优势微生物菌群为变形菌门(Proteobacteria)和酸杆菌门(Acidobacteria)。利用Biolog微平板法分析了微生物群落功能多样性。结果表明,不同植物根际土壤细菌群落对底物碳源的代谢特征存在着一定的差异,其中豆科的野大豆根际土壤细菌对底物碳源的代谢能力最强。

生物复混肥对土壤微生物的影响研究

在温室盆栽玉米条件下,应用平板计数法、氯仿熏蒸浸提法和Biolog微平板法,进行施用菌剂、生物复混肥、有机无机复混肥和无机肥对土壤微生物的影响试验。结果表明,施用生物复混肥可显著提高土壤中细菌、真菌和放线菌数量,增加土壤微生物量碳、氮的含量;增强土壤微生物利用单一碳源的能力,提高土壤微生物群落的功能多样性;促进土壤微生物生态系统的稳定,改善土壤微生物群落的生态功能。

石油污染土壤微生物多样性的研究技术及进展

石油污染土壤是世界范围内普遍存在的环境问题,微生物作为土壤中最重要的生物类群,若受到石油污染的影响,其群落结构会发生相应的改变,研究土壤微生物多样性,对于土壤石油污染的生物修复以及评价石油污染对土壤生态系统的影响具有重要意义。根据石油污染对土壤微生物多样性的研究进展,系统地综述了目前常用的土壤微生物多样性的研究技术及其在石油污染研究中的应用,并对该研究领域进行了展望。

异裂菊属根际微生物群落结构及功能多样性

异裂菊属是广西喀斯特石山区典型的特有属,根际微生物是其能否有效吸收、有效利用土壤养分和适应石山恶劣土壤环境的最直接表征之一。该研究采用DGGE和Biolog两种方法对异裂菊属植物根际和非根际微生物多样性进行了研究。结果表明:(1)异裂菊属5个种根际pH、碱解氮等9个养分含量都高于非根际。(2)5个种的根际、非根际存在2个共有细菌类群,但在数量上存在差异,3个种的根际条带小于非根际;5个种的根际、非根际微生物群落较为相似,较易聚在一起。(3)绢叶异裂菊根际微生物对碳源利用能力最强,凹脉异裂菊非根际最弱,其他对碳源的利用能力较接近;异裂菊属种根际微生物利用碳源的能力都高于非根际,根际微生物多样性指数均高于非根际,优势度指数与非根际基本相同或略高于非根际,丰富度和均匀度指数与优势度指数规律相似;异裂菊属根际、非根际微生物利用的碳源主要是糖类、羧酸类和氨基酸类化合物,4个种根际微生物利用碳源的能力高于非根际。(4)阳离子交换量、黏粒含量百分率和碱解氮是影响异裂菊属根际微生物碳源利用模式的最重要因子。总体来说,土壤理化性质对异裂菊属植物根际微生物群落多样性具有重要影响,异裂菊属通过分泌羧酸、糖等多类化合物提高了根际微生物的活性,进而有效地提高了根际肥力水平。

辽西油松侧柏混交林对土壤微生物群落功能多样性的影响

为探讨油松(Pinus tabulaeformis)、侧柏(Platycladus orientalis)混交林造林模式对土壤微生物群落功能多样性的影响,以朝阳市建平县白山林场试验区油松纯林(YC)、无植物种植土壤(NP)和油松-侧柏二者的混交林(YB)为研究对象,运用Biolog-Eco技术,对不同造林模式土壤微生物代谢功能多样性进行研究,对不同造林模式土壤微生物群落功能多样性进行分析。结果表明:不同造林模式土壤微生物群落代谢活性差异显著,总碳源的利用能力(AWCD)的顺序为:YB>YC>NP,油松、侧柏混交林土壤微生物代谢最快,活性最强。3种造林模式土壤微生物对6大碳源的利用率存在差异,混交林土壤微生物对L-天门冬酰胺、L-苯基丙氨酸、吐温40、吐温80、i-赤藓糖醇、D-甘露醇和4-羟基苯甲酸7种碳源的利用代谢能力显著高于油松纯林(p<0.05)。Biolog代谢指纹图谱分析表明混交林土壤微生物对吐温80的利用能力最高,AWCD值为1.6537;油松纯林土壤微生物对L-精氨酸的利用能力最高,AWCD值为1.547。主成分分析显示,YB和YC土壤微生物群落具有相似的碳源利用模式,土壤微生物群落代谢功能相似。3种造林模式土壤微生物Shannon指数(H)和Simpson指数(D)无明显差异,物种Mclntosh指数(U)依次为YB>YC>NP。油松和侧柏混交后可以提高土壤微生物活性。由此可见,在辽西半干旱区营造油松-侧柏混交林是可行的。

集约化畜禽粪便施用对土壤微生物群落功能多样性的影响

含有重金属等污染物质的集约化养殖畜禽粪便是我国现代有机肥的主要肥源,其长期施用可能会影响耕地土壤微生物群落的结构组成和功能。以江苏省海安长期施用集约化养殖畜禽粪便和单施化肥试验地的耕层土壤为研究对象,采用BIOLOG微平板法,对比分析了单施化肥和集约化畜禽粪便处理土壤微生物群落功能多样性的差异,旨在探明长期施用集约化养殖畜禽粪便对土壤微生物群落功能的影响。结果表明,两种土壤中施用集约化畜禽粪便处理平均颜色变化率(AWCD)均高于单施化肥土壤。与单施化肥处理比较,施用畜禽粪便处理土壤微生物群落物种丰富度和优势度没有明显改变,但物种均匀度方面有明显提高。与施用化肥比较,施用畜禽粪便处理土壤微生物显著提高了对胺类、碳水化合物类和氨基酸类碳源的利用能力。主成分分析和对应分析结果显示,不同施肥方式显著改变了土壤微生物群落对碳源的利用方向和能力。综上所述,施用集约化畜禽粪便能改变土壤微生物群落功能多样性。

凉水自然保护区原始红松林与人工林土壤微生物多样性

采用BIOLOG微平板法，研究了小兴安岭凉水国家自然保护区内原始红皮云杉（Picea koraiensis Na．kai）红松林、青楷槭（Acer tegmentosum Maxim．）红松林与人工兴安落叶松（如盹gmeliniRupr．）林、白桦（BetulaplatyphyUaSuk．）林土壤微生物多样性特征。结果表明：各林型土壤微生物AWCD值随土层深度与季节变化表现为，在表层与0-10cm土层中，四季2种原始红松林均高于人工林；在〉10-20cm土层中以人工林在春、夏、秋三季最高，冬季仍以原始红松林最高。不同土层的3种微生物多样性指数均以青楷槭红松林最高，且显著高于2种人工林。可见，原始阔叶红松林土壤微生物比原始针叶红松林及人工林土壤微生物具有更丰富的多样性。