Biolog微生物鉴定系统中接种液的替代

目的:采用市售试剂自行配制Biolog菌种鉴定接种液,代替Biolog公司的原装接种液,用以降低菌种鉴定成本。方法:用实验室自行配制的接种液和Biolog公司的接种液,对120株细菌和50株丝状真菌进行Biolog微生物系统鉴定,对比鉴定结果。结果:用2种接种液进行菌种鉴定时,鉴定板上部分孔的颜色反应不同,但鉴定结果一致。结论:自行配制的接种液可以满足菌株鉴定的要求,具有推广意义。

Biolog微生物鉴定系统在菌种鉴定中的应用

Biolog微生物鉴定系统由浊读仪、读数仪、软件、数据库、微孔鉴定板组成,与计算机联网。对结果的鉴定需要考虑可能性、相似性、位距3个参数;通过SIM,DIST和PROB值与数据库中的ID比较,确定被鉴定的微生物的属种。

Biolog微生物鉴定系统在丝状真菌鉴定碳源同化方面的应用

[目的]探讨Biolog微生物自动分析系统在丝状真菌鉴定碳源同化方面的应用前景。[方法]采用Biolog微生物自动分析系统,选取31株红树林丝状真菌接种于FF微孔板,记录其对19种不同碳源的利用情况。[结果]试验比较了31株真菌对碳源的利用,将它们大致分为曲霉属、青霉属及其他3个类群。[结论]碳源同化可为丝状真菌生理生化鉴定提供有益补充。

大曲中酵母菌的分离及Biolog微生物系统分析鉴定

本研究从曲样中分离纯化出2株酵母菌,经菌落观察和镜检后,利用Biolog微生物自动鉴定系统对其进行鉴定,确定它们分别为Zygosaccharomyces florentinus和Hyphopichia burtonii A。同时,研究了两种菌株在碳源方面的利用情况,结果表明不同菌种对Biolog 96孔碳源利用有显著差异,同一菌株不同时间对Biolog 96孔碳源利用也有差异,通过分析得出1#菌株主要利用D-蜜二糖、蔗糖;2#菌株主要利用麦芽三糖、α-D-葡萄糖。

Biolog微生物鉴定系统对鼠疫菌弱毒株及其噬菌体耐受株的鉴定比较研究

目的应用Biolog微生物鉴定系统鉴定比较鼠疫菌弱毒株(614F株)及其耐受菌株(R-2-12、R-2-51和R-2-56)生化、营养等表型特征。方法参照Biolog微生物鉴定系统标准规程A,使用Retro Spect’ s分析软件进行分析。结果利用Biolog微生物鉴定系统Gen III鉴定板检测显示,鼠疫菌614F株及其耐受菌株(R-2-56)不能发酵麦芽糖、密二糖、鼠李糖;614F株L-脯氨酸反应阳性,而614F株耐受中间代R-2-12、R-2-51株和耐受株R-2-56 L-脯氨酸反应阴性;614F株氨曲南反应阴性,而614F株耐受中间代R-2-12、R-2-51株和耐受株R-2-56氨曲南反应阳性。结论 614F株与其耐受菌株(R-2-12、R-2-51、R-2-56)比较生化表型无改变,但营养特征(脯氨酸)反应和抗生素(氨曲南)反应有差别。提示鼠疫菌弱毒菌614F株耐受株在耐受过程中营养需求和抗生素的抗性发生改变。

OmniLog TM微生物鉴定系统在青海高原野生型鼠疫噬菌体宿主谱检测中的应用研究

目的采用两种微量法检测青海高原野生型鼠疫噬菌体的宿主谱,为今后噬菌体生态学研究和基于宿主范围噬菌体分类研究提供科学依据。方法基于OmniLog TM微生物鉴定系统微量法和微量点滴法,检测3株鼠疫噬菌体对2株鼠疫耶尔森菌(鼠疫疫苗株EV 76、614F)和4株非鼠疫耶尔森菌(假结核耶尔森菌PTB3、PTB5、大肠杆菌V517、小肠结肠炎耶尔森菌52302-2)的裂解情况。结果476号、087号和072204号鼠疫噬菌体均能成功感染鼠疫疫苗株EV 76、614F并依赖其生长繁殖,且基于OmniLog TM系统33℃培养48 h也能够观察到试验孔中四唑类染料颜色随着噬菌体数量的增加和宿主菌数量的减少而变淡。利用微量点滴法检测3株鼠疫噬菌体对4株非鼠疫耶尔森菌敏感性结果显示,28℃和37℃时476号鼠疫噬菌体对假结核耶尔森菌PTB5敏感,而087号和072204号对其不敏感;476号、087号和072204号鼠疫噬菌体对假结核耶尔森菌PTB3、大肠杆菌V517、小肠结肠炎耶尔森菌52302-2这3株非鼠疫耶尔森菌均不敏感,且基于OmniLog TM系统观察到试验孔与对照孔中细菌生长曲线和四唑类染料颜色分别呈现相似对应的结果。然而,以鼠疫疫苗株EV 76、614F为宿主菌,37℃时072204号鼠疫噬菌体微量点滴于固体培养基上不显示噬菌斑。结论基于OmniLog TM检测系统的噬菌体宿主范围测定法可以作为一种替代传统检测宿主谱的测定方法,在噬菌体与宿主菌相互作用研究中具有较好的应用价值。

人工种植黄精病原微生物分离鉴定及防治

以陇东地区驯化种植的感病黄精为试验材料,采用组织分离法、平板划线法、形态观察法和分子生物学方法分离病原微生物,鉴定了病原菌的种属特性,验证了所分离的病原微生物对黄精健康组织的致病性,并利用9种中药材和5种黄精内生菌探寻对黄精病害的生物防治方法。结果表明:从黄精感病组织中分离得到10株细菌和6株真菌,其中BY-Z1、BY-Z3和BY-Z4这3株真菌具有较强的致病性,经鉴定分别是芳香镰刀菌、腐皮镰刀菌和多孢小孢子菌,其中多孢小孢子菌为首次报道从黄精中分离到的担子菌属病原真菌;黄连对BY-Z1的生长抑制作用最强,抑制率为74.0%,当归次之(28.9%);黄连对BY-Z3的生长抑制作用最强,抑制率为66.0%,丹皮次之(21.6%);黄连对BY-Z4的生长抑制作用最强,抑制率为100.0%,茜草根次之(53.0%);枯草芽孢杆菌对致病真菌BY-Z1、BY-Z3和BY-Z4均具有抑制作用,黄精内生菌H3和H4对真菌BY-Z1和BY-Z4具有抑制作用,H1对BY-Z4有强抑制作用。

纳米孔测序技术在感染性疾病病原微生物鉴定中的研究进展

感染性疾病是严重威胁人类健康的重大疾病之一。当前,全球感染性疾病的发病率有所上升,而病原微生物呈现多样化、复杂化。随着近年来快速发展的全基因组测序技术,可直接对病原微生物进行鉴定,比传统的病原微生物的鉴定有微生物鉴定中具有独特的优势。因此,本文概述了纳米孔测序技术在病毒、细菌病原鉴定、抗药性基因分析以及宏基因组中的应用。

BIOLOG自动微生物鉴定系统在水产动物病原菌检测中的应用

[目的]了解BIOLOG自动微生物鉴定系统对水产动物病原菌鉴定结果的可靠性,为水产动物细菌性疾病的诊断提供参考。[方法]选用BIOLOG自动微生物鉴定系统对9株分离自发病水产动物的病原菌进行鉴定,同时采用16S rDNA序列分析对其中的4株进行鉴定,比较2种鉴定结果的符合率。[结果]采用自动微生物鉴定系统对9株病原菌进行鉴定均取得良好结果,采用16S rDNA序列分析对4株病原菌进行鉴定的结果与应用自动微生物鉴定系统所得结果完全一致,二者符合率为100%。[结论]应用BIOLOG自动微生物鉴定系统对水产动物病原菌进行鉴定具有操作简便、快速、准确等特点,是实验室鉴定水产动物病原菌的一种可行方法。

Biolog微生物自动分析系统——细菌鉴定操作规程的研究

Biolog微生物自动分析系统是美国Biolog公司研制开发的新型自动化快速微生物鉴定系统,以细菌对微平板上95种碳源的利用情况为基础从而进行微生物鉴定。目前我国已经累计引进100余台,但使用率较低。文中在总结实践经验的基础上,参阅最新Biolog系统操作手册4.2版和国家微生物资源平台技术规程的统一格式,研究制定了细菌鉴定的操作规程,以规范系统使用,获得准确鉴定结果,尽快提高我国Biolog系统的应用水平。

两株酒曲毛霉的分离及Biolog微生物系统分析鉴定

利用稀释平板法从曲样和酵泥单菌落中分离获得2株毛霉1#和2#,通过对其形态观察和Biolog微生物系统鉴定,确定2株菌分别为:1#菌为卷枝毛霉(Mucorcircinelloidesv.Tiegh),2#菌为密丛毛霉(MucorplumbeusBonord)。所得菌株进行冷冻干燥保藏。不同菌种对Biolog96孔碳源利用有显著差异,同一菌种不同时间对Biolog96孔碳源利用也有差异,分析得出1#、2#毛霉主要利用ɑ-酮戊二酸、L-谷氨酸。

Biolog微生物自动分析系统——酵母菌鉴定操作规程的研究

Biolog微生物自动分析系统是美国Biolog公司研制开发的新型自动化快速微生物鉴定系统,以酵母菌与96孔微平板上多种脱水碳源进行氧化实验和同化实验为基础进行鉴定,将菌体生长所产生的特征性代谢图谱与标准数据库作比对,从而得出鉴定结果。该系统目前已成为国际上酵母菌多相分类鉴定常用的技术手段。文中在总结实践经验的基础上,参阅最新Biolog系统操作手册4·2版和国家微生物资源平台技术规程的统一格式,研究制定了酵母菌鉴定的操作规程,以提高我国Biolog系统对酵母菌的鉴定应用水平。

Biolog微生物自动分析系统——丝状真菌鉴定操作规程的研究

Biolog微生物自动分析系统是美国Biolog公司研制开发的新型自动化快速微生物鉴定系统,目前我国已有多家科研单位、高校和生物企业引进该鉴定系统,但多用于细菌鉴定,应用于丝状真菌鉴定的研究未见报道。该系统用于丝状真菌鉴定是以微生物对95种碳源利用的特异性和利用碳源增殖后产生的浊度变化为基础。文中基于Biolog丝状真菌鉴定的验证实验,参考Biolog系统操作手册和国家微生物资源平台技术规程的统一格式,研究制定了丝状真菌鉴定操作规程,有利于提高Biolog鉴定系统鉴定丝状真菌的应用水平。

Biolog微生物自动鉴定系统在酿酒酵母鉴定中的应用

利用Biolog微生物自动鉴定系统对中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC)保藏的29株酿酒酵母进行了复核鉴定。鉴定结果表明,29株酿酒酵母中有27株准确鉴定到种的水平,准确率高达93%,相似度值(SIM)和可能性(PROB)都很高,其中70%以上菌株的SIM值大于0.9,89%以上SIM值大于0.8。2株没有给出鉴定结果的菌株分别为a型单倍体和遗传学研究用菌。实验表明Biolog系统适用于酿酒酵母的准确鉴定,可能不太适合单倍体和基因工程酵母菌的准确鉴定。

Biolog微生物自动鉴定系统对宜宾芽菜生产菌种的鉴定

通过对芽菜生产菌种的鉴定,指导芽菜生产,提高产品的风味和品质。采用形态学特征和显微观察,初步得到A、B、C 3株优势菌。经Biolog微生物自动鉴系统鉴定:A菌为浅黄隐球酵母菌,B菌为橙黄红酵母菌B,C菌为木糖葡萄球菌。

Biolog微生物自动分析系统在乳杆菌鉴定中的应用

利用Biolog微生物自动分析系统,对3种乳杆菌进行鉴定分析。结果表明:Biolog微生物自动分析系统可快速测定出供试乳杆菌菌株的特性参数(PROB、SIM、DIST)和供试乳杆菌菌株对95种碳源的利用情况,并可直接根据供试乳杆菌菌株的特性参数将供试乳杆菌菌株准确鉴定到乳杆菌属水平、部分供试乳杆菌菌株准确鉴定到种水平。根据供试乳杆菌菌株的特性参数,结合供试乳杆菌菌株对95种碳源的利用情况,可将所有供试乳杆菌菌株准确鉴定到种水平。可作为乳杆菌制品质量控制及快速鉴定的有效手段。

用Biolog微生物自动分析系统鉴定大曲中地衣芽孢杆菌的研究

从大曲中分离到一株细菌,初步鉴定为地衣芽孢杆菌,利用Biolog微生物自动分析系统对它做了进一步的鉴定,确定其为地衣芽孢杆菌。

Biolog微生物自动鉴定系统对2株大曲菌种的鉴定

研究从大曲培养过程中分离纯化出1株酵母Y1和1株霉菌M1,经菌落特征观察和镜检后,利用Biolog微生物自动鉴定系统进行鉴定,确定其分别是Hyphopichia burtonii A和Rhizopus oryzae。

利用Biolog微生物自动分析系统对两株啤酒酵母的鉴定和比较

利用Biolog微生物自动分析系统对两家大型啤酒厂生产用酵母进行鉴定,并比较了它们在碳源利用方面的差异性。

从曲样中分离霉菌及其Biolog微生物系统分析鉴定

利用稀释平板法从曲样中分离获得3株霉菌:1#、2#和3#,对其形态观察和Biolog微生物系统鉴定,确定3株菌分别为:1#菌为栖土曲霉(Aspergillus terricola Marchal),2#菌为寄生曲霉(Aspergillus parasiticus Speare),3#菌为杂色曲霉(Aspergillus versicolor)。各菌种对Biolog96孔碳源利用有显著差异,同一菌种不同时间对Biolog96孔碳源利用也有差异,分析得出曲霉主要利用D-核糖、D-木糖。