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重阳木花粉过敏原的分离、纯化和鉴定
被引量:
4
1
作者
姚敏
刘志刚
+1 位作者
孟光
孔小丽
《基础医学与临床》
CSCD
北大核心
2011年第9期1036-1039,共4页
目的对重阳木花粉变应原蛋白进行分离、纯化和鉴定。方法采用Coca s液提取重阳木花粉的粗提液,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离粗提液蛋白质组分,并测定其分子质量;收集过敏患者血清,用Western blot法鉴定其变应...
目的对重阳木花粉变应原蛋白进行分离、纯化和鉴定。方法采用Coca s液提取重阳木花粉的粗提液,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离粗提液蛋白质组分,并测定其分子质量;收集过敏患者血清,用Western blot法鉴定其变应原成分;通过离子交换层析对重阳木花粉变应原进行初步纯化和免疫印迹鉴定。结果分离得到重阳木花粉18条蛋白带,其中分子质量为12和14 ku的是重阳木花粉的特异性变应原,通过离子交换柱层析方法纯化得到其相应的纯化蛋白。结论对重阳木花粉变应原进行了初步的分离、纯化和鉴定,为临床重阳木花粉过敏疾病的诊断和治疗奠定了基础。
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关键词
重阳木花粉
变应原
离子交换柱层析
下载PDF
职称材料
重阳木花粉相关变应原profilin基因的克隆、表达及免疫学鉴定
被引量:
2
2
作者
姚敏
刘志刚
+2 位作者
邬玉兰
孟光
李春林
《现代免疫学》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期385-389,共5页
克隆、表达和纯化重阳木花粉相关变应原profilin基因,并对其免疫学活性进行鉴定。采用RT-PCR和3-’RACE技术获得整个profilin基因的开放阅读框,将其与PET28a载体连接并转化大肠杆菌E.cdiBL21(DE3)进行诱导表达,通过Ni2+亲和层析柱对重...
克隆、表达和纯化重阳木花粉相关变应原profilin基因,并对其免疫学活性进行鉴定。采用RT-PCR和3-’RACE技术获得整个profilin基因的开放阅读框,将其与PET28a载体连接并转化大肠杆菌E.cdiBL21(DE3)进行诱导表达,通过Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,采用Western blot检测其IgE结合活性。克隆获得了profilin的全长基因,开放阅读框为396个碱基(包括终止密码子),编码131个氨基酸。成功地构建了原核表达载体,并在大肠杆菌中大量地表达了profi-lin,纯化后的重组蛋白进行免疫印迹,结果显示重阳木花粉过敏患者血清对重组profilin反应呈阳性。
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关键词
重阳木
花粉过敏原
肌动蛋白抑制蛋白
重组过敏原
原文传递
题名
重阳木花粉过敏原的分离、纯化和鉴定
被引量:
4
1
作者
姚敏
刘志刚
孟光
孔小丽
机构
海口市人民医院检验科
深圳大学过敏反应与免疫学研究所
出处
《基础医学与临床》
CSCD
北大核心
2011年第9期1036-1039,共4页
基金
国家自然科学基金(30070702)
海南省自然科学基金指导性计划(80570)
文摘
目的对重阳木花粉变应原蛋白进行分离、纯化和鉴定。方法采用Coca s液提取重阳木花粉的粗提液,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离粗提液蛋白质组分,并测定其分子质量;收集过敏患者血清,用Western blot法鉴定其变应原成分;通过离子交换层析对重阳木花粉变应原进行初步纯化和免疫印迹鉴定。结果分离得到重阳木花粉18条蛋白带,其中分子质量为12和14 ku的是重阳木花粉的特异性变应原,通过离子交换柱层析方法纯化得到其相应的纯化蛋白。结论对重阳木花粉变应原进行了初步的分离、纯化和鉴定,为临床重阳木花粉过敏疾病的诊断和治疗奠定了基础。
关键词
重阳木花粉
变应原
离子交换柱层析
Keywords
bischofia polycarpa pollen
allergen
ion-exchange chromatography
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
下载PDF
职称材料
题名
重阳木花粉相关变应原profilin基因的克隆、表达及免疫学鉴定
被引量:
2
2
作者
姚敏
刘志刚
邬玉兰
孟光
李春林
机构
海口市人民医院检验科、耳鼻喉科
深圳大学过敏反应与免疫学研究所
出处
《现代免疫学》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期385-389,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30070702)
广东省科技重点专项资助项目(2003A3080502)
+1 种基金
深圳市科技计划资助项目(200326)
海南省自然科学基金计划项目(80570)
文摘
克隆、表达和纯化重阳木花粉相关变应原profilin基因,并对其免疫学活性进行鉴定。采用RT-PCR和3-’RACE技术获得整个profilin基因的开放阅读框,将其与PET28a载体连接并转化大肠杆菌E.cdiBL21(DE3)进行诱导表达,通过Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,采用Western blot检测其IgE结合活性。克隆获得了profilin的全长基因,开放阅读框为396个碱基(包括终止密码子),编码131个氨基酸。成功地构建了原核表达载体,并在大肠杆菌中大量地表达了profi-lin,纯化后的重组蛋白进行免疫印迹,结果显示重阳木花粉过敏患者血清对重组profilin反应呈阳性。
关键词
重阳木
花粉过敏原
肌动蛋白抑制蛋白
重组过敏原
Keywords
bischofia polycarpa pollen
pollen
allergy
profilin
recombinant allergy
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重阳木花粉过敏原的分离、纯化和鉴定
姚敏
刘志刚
孟光
孔小丽
《基础医学与临床》
CSCD
北大核心
2011
4
下载PDF
职称材料
2
重阳木花粉相关变应原profilin基因的克隆、表达及免疫学鉴定
姚敏
刘志刚
邬玉兰
孟光
李春林
《现代免疫学》
CAS
CSCD
北大核心
2008
2
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