昆虫神经毒素BjαIT的表达及杀虫活性

根据毕赤酵母Pichia pastoris密码子偏爱性,不改变毒素蛋白质一级结构,设计合成了昆虫神经毒素BjαIT基因,并分别克隆至大肠杆菌Escherichia coli融合表达载体pPET30-a(+)和毕赤酵母分泌表达载体pPIC9K。在IPTG的诱导下,神经毒素在大肠杆菌中融合表达,表达产物利用镍亲和层析柱纯化,纯化产物用于制备抗血清和活性测试。采用斑点杂交,筛选得到了较高水平分泌表达重组BjαIT的酵母转化子,摇瓶条件下,毒素表达量最大可达约20mg/L。大肠杆菌BjαIT表达产物对东亚飞蝗Locusta migratoria manilensis和德国小蠊Blattela germanica没有活性,但酵母表达产物经注射东亚飞蝗和德国小蠊表现出杀虫活性。

BjαIT的表达、抗血清制备及scFv基因库的构建

根据成熟昆虫神经毒素BjαIT的氨基酸序列,人工合成毒素基因,并克隆至大肠杆菌表达载体pPET-30a(+)。在IPTG的诱导下,神经毒素在大肠杆菌中融合表达,表达产物经镍亲和层析纯化,纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,制备了特异性较高的抗血清,抗体滴度达1:512,000。提取免疫小鼠脾细胞总RNA,通过RT-PCR分别扩增重链可变区(VH)及轻链可变区(VL)基因片段,在连接肽linker的连接下成功构建了包含抗BjαIT的全长scFv基因库。本研究为新型蝎昆虫神经毒素BjαIT的检测奠定了基础。

基于BJ成形的PMMA模具熔模精铸应用研究

熔模精铸技术的制造工艺亟需寻求新材料、新工艺、新技术,以达到提高效率、降低成本的目的。针对这一问题,选用PMMA粉末为原材料,采用粘结剂喷射成形(BJ)技术成形模具,结合传统熔模铸造工艺,实现一种快速铸造并得到金属制品的技术。这项技术能完成快速研发试制与批量化金属产品铸造,生产速度是传统熔模铸造的几十倍,几乎没有灰分残留,很好地满足了熔模铸造的使用要求。

CoLM模式对青藏高原中部BJ站陆面过程的数值模拟

利用公共陆面模式Common Land Model(CoLM)及"全球协调加强观测计划之亚澳季风青藏高原试验"(CAMP/Tibet)中那曲地区Bujiao(BJ)站2002—2004年的观测资料对该地区进行了单点数值模拟试验。通过比较模拟与观测的地表能量通量,表明CoLM较成功地模拟了该地区的能量分配。模式对向上的短波辐射、向上的长波辐射、净辐射及土壤热通量模拟得较好,但冬季存在偏差。进一步比较了模拟和观测的土壤温度及土壤湿度,发现浅层60 cm土壤温度模拟较好,深层存在偏差,表现为土壤温度变化滞后于实际变化。土壤湿度总体偏小,尤其是冬季冻结期,土壤冻融过程中忽略了土壤液态水在温度0℃以下仍能存在,含冰量模拟偏高。

伪狂犬病病毒BJ/YT株毒力相关基因gE和TK序列分析

本试验对2012年从北京地区约克夏犬体内分离得到的伪狂犬病病毒（PRV）BJ/YT株主要毒力基因gE和TK的分子特征和进化关系进行了分析。结果显示,BJ/YT株gE基因与参考序列的核苷酸和氨基酸同源性分别为98.9%～100.0%和98.3%～100.0%;TK基因核苷酸和氨基酸同源性分别为99.2%～99.9%和99.0%～100.0%。BJ/YT株与同期河北猪源分离株进化关系较近,各毒株之间同源性高,并且存在一致的核苷酸突变位点;与其他参考序列比对分析结果显示,BJ/YT株主要毒力基因存在变异位点,但这些位点均不在已知的主要功能区和抗原表位区内。因此,从分子流行病学角度来看,BJ/YT毒株是近年北京及其周边地区PRV流行毒株,但gE和TK基因的变异对流行毒株的毒力无明显影响。

柔嫩艾美耳球虫BJ株核酸疫苗的构建及其免疫保护效果研究

将 E.tenella BJ株的保护性抗原基因 TA4插入真核表达载体中 ,然后在其上游融合方式插入 Et1A基因 ,构建成核酸疫苗并进行体外表达。IFAT检测表明 ,p CT转染细胞的荧光亮度高 ,p CTE载体大 ,转染效率低 ,荧光较弱。动物保护性试验中 ,间隔一周两次免疫鸡后攻虫发现 ,核酸疫苗对球虫感染具有明显的保护作用 ,可显著减轻球虫感染引起的机体增重下降 ,其中 ,重组干扰素联合 p CT中剂量 (5 0 μg)免疫时 ,鸡的增重效果最为明显 ,盲肠病变值也最小 ,ACI可达 16 7.2。试验还发现 ,5 0 μgp CTE可达到 10 0 μg p CT的抗球虫效果 ,ACI在 16 0以上 。

SARS病毒BJ01株空斑测定方法的建立

目的 建立SARS病毒空斑测定方法 ,为SARS病毒生物学研究提供手段。方法 将不同稀释度SARS病毒BJ0 1株分别接种Vero细胞单层 ,然后加营养琼盖。按DullbeccoR的方法计算空斑滴度。结果 SARS病毒BJ0 1株加营养琼盖后 ,3天即可出现空斑 ,形态呈圆形 ,直径 2 .5～ 3mm ,大小均匀。结论 建立的SARS病毒的空斑方法稳定 。

BJ-MODS、APACHE Ⅱ、SOFA、Marshall-MODS评分系统对MODS患者病情评估价值的比较

目的评价BJ-MODS、APACHE Ⅱ、SOFA、Marshall-MODS四种评分系统对多器官功能障碍综合征(MODS)患者的病情评估及预后的价值。方法前瞻性、多中心搜集MODS患者191例,选取资料完整的MODS患者141例,分别进行BJ-MODS、APACHE Ⅱ、SOFA、Marshall-MODS评分,比较存活组和死亡组之间各种评分以及同一组不同时间段的分值差异;以及四种评分不同分数段患者病死率。然后分别绘制患者入组第1天的BJ-MODS、APACHE Ⅱ、SOFA、Marshall-MODS受试者工作特征曲线,计算ROC曲线下面积,评价各评分预测MODS患者预后的准确性。结果141例患者中,存活84例(59.6%),死亡44例(32.2%),放弃治疗12例(8.5%),其他1例(0.7%)。总住院病死率为31.2%,ICU病死率为29.1%。存活组和死亡组在入组第1天APACHE Ⅱ评分,有统计学差异(P<0.05),而BJ-MODS、SOFA、Marshall-MODS评分均无统计学差异(P>0.05),入组第7天的BJ-MODS、APACHE Ⅱ、SOFA、Marshall-MODS评分均有统计学差异(P<0.05)。存活组和死亡组四种评分在两个时间段的差值,有统计学意义(P<0.05)。BJ-MODS和Marshall-MODS评分随着病死率增加而增加,入组第7天差异有统计学意义(P<0.001);APACHE Ⅱ和SOFA入组第1天评分随着病死率增加而有所下降,入组第7天差异有统计学意义(P<0.001)。BJMODS评分入组第1天、入组第7天及第1天与第7天差值的曲线下面积分别为0.600、0.865、0.835,APACHE Ⅱ评分为0.618、0.869、0.821,SOFA评分为0.556、0.872、0.893,Marshall-MODS评分为0.551、0.870、0.871。BJ-MODS入组第1天评分随着器官障碍数目的增加而增加,有统计学差异(P<0.05),而BJ-MODS入组第7天、APACHE Ⅱ、SOFA、Marshall-MODS评分增加不明显。ICU病死率随着器官障碍数目的增加而增加,有统计学差异(P<0.05)。结论 APACHE Ⅱ评分对MODS患者病情严重程度的预后评估能力最好,BJ-MODS与SOFA、Marshall评分相当。

脱水休眠对斯氏线虫BJ品系活力的影响

本文报道了脱水休眠对斯氏线虫ＢＪ品系活力的影响，试验中采用了一种新型的脱水剂配方。结果表明，脱水休眠线虫复苏后对大蜡螟的侵入率为８．２％，显著高于未脱水休眠线虫的侵入率５．１％。耐高温能力也较高，在３５℃的环境里，经过５小时脱水休眠的线虫存活率为８８．５％，而未脱水休眠线虫为１５．９％。脱水休眠线虫抗干燥能力也高于未脱水休眠线虫，在２７℃、相对湿度５９％的环境中７小时，脱水休眠线虫存活率为９５．９％，未脱水休眠线虫为６３．５％。脱水休眠线虫在大蜡螟体内的发育历期与未脱水休眠线虫相同，表明脱水休眠对线虫的发育繁殖能力无不良影响。

巢式PCR-RFLP法对湖南省乙型肝炎病毒Bj和Ba基因亚型的初步鉴定

目的:检测湖南省乙型肝炎病毒(HBV)基因亚型(Bj或Ba)的分布情况,了解基因亚型与HBV致病性的关系,希望以此诠释相同基因型HBV导致不同病情的机制. 方法:随机选取经多对型特异性引物巢式PCR法鉴定为B 基因型HBV的血清标本50例,包括慢性HBV携带者和慢性重型乙型肝炎患者各25例,采用巢式PCR-RFLP法鉴定其基因亚型(Bj或Ba). 结果:50例B基因型HBV均为Ba亚型,没有发现Bj亚型结论:湖南省B基因型HBV可能主要为Ba亚型.相同基因型HBV导致不同病情的机制可能还与其他因素(如HBV准种)有关.

柔嫩艾美耳球虫BJ株TA4基因的表达及电泳分析

球虫子孢子表面抗原TA4(25kD)是通过二硫键连接8和17kD 2条多肤形成的,在孢子化后期合成。E.tenella BJ株的TA4基因同国外株的同源性为99％。本试验进行了TA4基因的原核融合表达,并对表达蛋白的SDS-PAGE电泳特性进行探究。试验发现,以pGEX-KG为载体,用IPTG可诱导TA4基因在E.coli BL21(DE3)中的表达。SDS-PAGE表明,融合蛋白大小约43 kD,而非推测的51 kD,诱导6 h的蛋白表达量即可达到较高水平,表达量约为31％。采用抗GST抗体进行Western blotting,成功检测到了特异性条带。说明SDS-PAGE前的样品煮沸处理可使连接TA4 2条多肽的二硫键断裂,只有17 kD的多肽可与26 kD GST蛋白结合。样品采用反复冻融法处理,加入还原型谷胱苷肽后,采用GST凝胶回收柱Sepharose 4B纯化的融合蛋白主要为51 kD的单一条带,煮沸变性后电泳,则43 kD带含量增加。说明纯化过程可影响GST-TA4融合蛋白的特性。

Bj?rck-Schmidt正交化微波凝视成像方法的研究

微波凝视成像作为一种新的成像模式,依靠多个相互独立的天线阵元发射随机信号,在空间形成时空两维随机辐射场,将回波信号形成的辐射场与预存的随机辐射场进行关联处理,从而实现成像。由于电磁信号在空间形成的辐射场具有很强的相关性,因此在进行直接关联处理后,得到图像的副瓣很高。本文针对上述问题提出对预存辐射场分别进行Schmidt及Bj?rck-Schmidt正交化处理,减小了邻近单元散射电磁信号的相关性,从而抑制了目标的副瓣,图像的信噪比得到提高,最终获得良好聚焦的图像。文中给出了直接关联处理及Schmidt和Bj?rck-Schmidt两种正交化方法性能的对比,同时对预存辐射场正交化处理后的信号特性进行了分析。仿真实验证明了Bj?rck-Schmidt正交化方法可以明显降低目标的副瓣,进而说明了该方法的有效性。

生防菌BJ1离子辐照突变高效菌株筛选及对黄瓜枯萎病的生防效果

枯草芽孢杆菌BJ1是一种在真菌病害防治中发挥重要作用的生防因子,为进一步提高它的抑菌能力,获得生防效果更好的高效菌种,利用不同能量和剂量的^12C^6＋对生防菌BJ1进行了离子辐照处理。研究结果表明：离子辐照生防菌BJ1的最适宜剂量为200-400 Gy,传能线密度（LET）为60 keV/μm;突变菌株的抑菌能力比BJ1提高了2%-21%;不仅防病效果比BJ1提高了17.48%,而且对植物具有更好的促生长作用。

柔嫩艾美耳球虫BJ株Et1A基因的克隆及序列分析

本文参照已发表的柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)折光体蛋白基因序列,根据其阅读框及载体序列特点,两端分别加上EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点设计引物,以E.tenellaBJ株的总RNA为模板,进行RT-PCR扩增,成功扩增出Et1A基因。将PCR产物与pGEM-T载体连接后,转化JM109感受态细胞,蓝白斑法筛选阳性克隆并测序。测序表明,该基因全长1978bp,其阅读框大小为1944bp;与GenBank登记的Et1A基因相比较,有6个部位、共7个碱基发生了突变,其中5个有意义突变,2个无意义突变,同源性达99 5%。与堆型艾美耳球虫(E.acervulina)的Ea1A基因的同源性为79 3%,而与牛艾美耳球虫(E.bovis)的同源性只有19 5%。表达产物具有核苷酸转氢酶的功能,推测可为子孢子侵入宿主细胞提供能量。

BJS54测绘成果到CGCS2000的改正分析

2000中国大地坐标系(CGCS2000)是我国新启用的地心坐标系。采用七参数转换模型且计算区域内使用一套转换参数计算了1954北京坐标系(B JS54)下的经纬度坐标以及高斯平面坐标转换到2000中国大地坐标系(CGCS2000)的改正量,分析了这些改变量所对应的变化趋势以及对旧地形图的影响,提出了对纸质地形图和数字地形图的改正方法。垂线偏差和高程异常的改正量也进行了计算和分析。

BJS54、XAS80测绘成果到CGCS2000的转换及图幅拼接方法研究

我国大多数测图成果采用的是北京54(BJS54)和西安80(XAS80)坐标系统,这两套坐标系统分别采用了不同的椭球参数,向CGCS2000转换时造成同一点在不同坐标系下的坐标值存在差异,进而也对地图分幅产生影响。并且,这些测图成果具有数据量大,区域广泛,投影参数不一致,比例尺不统一的特点,这又增加了转换工作的难度。本文参考了国内外坐标转换的常用转换模型及图幅拼接关键技术,参照相关实验结果及实验数据,对其特点进行对比总结分析,揭示了各种方法的适用情况,也希望能对地质成果CGS2000坐标转换研究提供帮助。

BJ公司小规模高砂比压裂施工特点分析

水力压裂多年来一直是用于油气层改造、提高油、气井产能和油田的有效采收率 ,获得良好开发效益的主要工艺措施之一。BJ是美国较大的石油服务公司 ,也是与胜利油田较早进行合作的外资公司。该公司在油气井压裂过程中所应用的施工参数和压裂原材料都有其独自特点。

BJ-DRGS在军队医院公益性评价中的实践探索

目的探索北京疾病诊断相关组(BJ-DRGs)在评价军队医院公益性方面作用。方法收集病案首页相关数据,利用BJ-DRGs评价指标,采用单样本t检验对本院和全市医保住院患者平均住院日及平均住院费用进行统计分析。结果本院部分病种和科室平均住院日及平均住院费用相对较高。结论本院在缩短平均住院日、降低平均住院费用、增强医院公益性方面尚有较大作为空间。

DF_(8BJ)内燃机车交流传动控制系统

阐述了DF8BJ(“西部之光”)内燃机车交流传动控制系统的功能,对完成其控制功能的系统组成和控制策略进行了详细介绍。分析了试验过程中出现的一些问题,并提出了解决方法。试验和运用证明,该控制系统性能优良,工作稳定,能满足内燃机车交流传动的控制要求。

改善BJ492Q汽油机燃烧性能的试验研究

采用先进的测试手段对BJ492Q汽油机的燃烧过程进行了测试与问题分析．从该类机型在标准工况下的示功图曲线分析出发，在CF-750D燃烧分析器上进行数据处理与分析，制取38种工况下的示功图，同时列表分析该机在外特性和负荷特性下示功图主要燃烧参数的变化从试验和分析中得到指示压力值偏低。缸内最大压力对应角过大，最大压力变化信率低，最大压力升高率的出现角变动范围大且滞后；点火提前用和最大燃烧压力角的过大使火焰传播速率低，循环变动率过大说明稳定性不好．在文中对不足之处进行了探讨与分析，其结论对BJ492Q汽油机燃烧性能的改进具有重要意义．