茎瘤芥AP2／EREBP转录因子基因BjABR1的克隆和表达分析

以茎瘤芥(Brassica juncea var.tumida Tsen et Lee)‘永安’为材料,通过RACE和RT-PCR技术得到1个AP2/EREBP转录因子基因的cDNA全长序列和基因组DNA(gDNA)序列,该基因与拟南芥AtABR1基因的氨基酸序列相似性高达72%,因此命名为BjABR1(GenBank登录号:JQ713825.1)。BjABR1基因gDNA序列含1个内含子;cDNA序列全长1 514 bp,含有1个1 146 bp的开放阅读框(ORF),编码381个氨基酸;其推定编码的蛋白分子量为41.674 kD,等电点为9.11,具有14个磷酸化位点,含1个典型的AP2 DNA结合域和1个CMX-1基序。洋葱表皮细胞的瞬时表达显示,BjABR1蛋白定位于细胞核。荧光定量PCR分析结果表明,该基因在茎瘤芥不同发育时期的根、茎、叶中均有表达,但在根中表达量极高;在对茎瘤芥组培幼苗进行高盐、渗透压和低温3种非生物胁迫处理后发现,3种胁迫均能诱导该基因表达,但其对高盐的响应更为迅速。