Effects of NPY Gene on Total Number of Eggs at 300 Days of Age in Donglan Black-bone Chicken

In this study, PCR-RFLP technique was employed to detect the genetic polymorphism of NPY gene and analyze the effects of various genotypes on the total number of eggs at 300 days of age in 135 Donglan black-bone chicken. According to the results, there were three genotypes （AA, AB and BB） of NPYgene in Donglan black-bone chicken group. Different genotypes exhibited significant effects （P 〈 0. 05 ） on the total number of eggs at 300 days of age. The total number of eggs at 300 days of age of AA genotype was significantly higher than that of BB genotype （P 〈 0. 05）. Therefore, the polymorphic site of NPY gene could be used as a candidate molecular marker that affects egg laying in Donglan black-bone chicken.

Production Performance of Different Generations of Muchuan Blackbone Chicken

In order to formulate feasible conservation measures and develop and utilize Muchuan black-bone chicken rationally,two generations of Muchuan black-bone chicken were bred,and their production performance and slaughter traits( at the age of 300 d) were compared. The results showed that the reproductive performance,slaughter performance and body size of the Muchuan black-bone chicken of Generation 1( G_1)were all improved compared with those of the Generation 0( G_0)( P <0. 05). At the age of 300 d,the live weight,carcass weight,and leg muscle weight of the G_1 were significantly higher than those of the G_0( P <0. 05); and the chest width of the cocks of the G_1 was significantly higher than that of the G_0( P <0. 05). It suggests that after rigorous selection and utilization of modern poultry breeding techniques,the reproductive performance,slaughter performance and survival rate of Muchuan black-bone chicken can be improved significantly.

ALDH7A1和EDNRB2基因分型及其与乌骨鸡皮肤乌色度关联分析

【目的】为进一步验证醛脱氢酶7家族成员A1(ALDH7A1)和内皮素受体B2(EDNRB2)在乌骨鸡黑色素沉积中的作用,本研究对ALDH7A1和EDNRB2基因单核苷酸多态性(SNPs)位点进行基因分型,分析其多态位点与皮肤乌色度的关联性,找出对皮肤乌色度有显著效应的SNP标记,为培育乌色度高的屠宰型乌骨鸡肉鸡的分子标记辅助育种提供参考。【方法】采用基于飞行时间质谱对丝羽乌骨鸡192个个体的ALDH7A1和EDNRB2基因SNPs位点进行基因分型,采用HaploView 4.1软件分析这些SNPs位点的连锁不平衡(LD)程度,并分析不同基因型和单倍型与皮肤亮度(L^(*))值的相关性。【结果】ALDH7A1基因的2个SNPs位点(rs317018616 C>A和rs15992676 T>C,分别为SNP1和SNP2)和EDNRB2基因2个SNPs位点(rs739725493 G>A和rs316614064 C>T,分别为SNP3和SNP4)质谱检出率为100%,ALDH7A1基因2个SNPs位点只有2种纯合子基因型,EDNRB2基因2个SNPs位点都有3种基因型。卡方检验表明,ALDH7A1基因2个SNPs位点偏离Hardy-Weinberg平衡(P<0.05),EDNRB2基因2个SNPs位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。SNP1位点遗传多样性较低(PIC<0.25),其他3个SNPs位点为中度多态(0.25<PIC<0.05);SNP2位点TT基因型乌骨鸡大腿部皮肤L^(*)值显著低于CC基因型(P<0.05),SNP4位点CC和CT基因型乌骨鸡大腿部皮肤L^(*)值显著低于TT基因型(P<0.05),SNP1和SNP3位点不同基因型间乌骨鸡大腿部皮肤L^(*)值无显著差异(P>0.05)。连锁不平衡分析表明,ALDH7A1基因SNP1和SNP2位点处于强连锁不平衡状态,SNP1-SNP2连锁后产生3种单倍型,其中AATT和CCTT单倍型乌骨鸡大腿部皮肤L^(*)值显著低于CCCC(P<0.05),但3种单倍型个体间背部皮肤和胸部皮肤L^(*)值均差异不显著(P>0.05)。【结论】ALDH7A1和EDNRB2基因与丝羽乌骨鸡大腿部皮肤乌色度密切相关,ALDH7A1基因的AATT、CCTT单倍型和EDNRB2基因的TT基因型可作为研究丝羽乌骨鸡大腿部皮肤乌色度的候选分子标记,本研究为下一步利用分子标记辅助育种加快培育乌色度高的丝羽乌骨鸡新品种提供参考。

赤水乌骨鸡线粒体Cytb基因全序列遗传和起源分析

【目的】探明赤水乌骨鸡品种群体的遗传多样性和起源进化特点,为赤水乌骨鸡的种质资源评估,遗传资源保护和利用提供理论依据。【方法】采用PCR扩增及测序技术对60只赤水乌骨鸡的Cytb基因进行全长序列研究,采用生物信息学方法进行遗传多样性及起源进化分析。【结果】赤水乌骨鸡Cytb基因序列全长为1143 bp,碱基T、C、A和G的平均占比分别是24.1%、36.4%、27.5%和12.0%。Cytb基因序列分析发现共有13个突变位点,均为颠换,单倍型多样性(Hd)为0.796,核苷酸多样性(Pi)是0.001 91,平均核苷酸差异(K)为2.180。单倍型网络图显示在赤水乌骨鸡Cytb基因序列的9种单倍型中Hap3和Hap2为优势单倍型。赤水乌骨鸡Cytb基因9种单倍型与红色原鸡5个亚种Cytb基因序列构建的系统发育树表明Hap1与GGS12聚为一类,Hap2与GGM1聚为一类,Hap6、Hap7和Hap3聚在一起,与GGM3形成一个小分支,Hap8和Hap9与GGS3、GGS4和GGM2聚在一起形成一个分支,Hap4和Hap5则是自成一支。【结论】赤水乌骨鸡群体遗传多样性较高,可能起源于原鸡滇南亚种(Gallus gallus spadiceus)和原鸡印度亚种(Gallus gallus murghi)。

吉林地方黑羽鸡不同世代的产蛋性能及蛋品质对比

为了解吉林地方黑羽鸡产蛋性能和蛋品质,试验各选取240只120日龄F1、F2、F3三个世代黑羽鸡,测定产蛋性能及蛋品质。结果表明:与F代相比,F3代平均开产日龄显著提前8.7 d(P<0.05),年平均产蛋量F3显著提高7.3枚(P<0.05),种蛋受精率和受精蛋孵化率分别显著提高6.7%和4.8%(P<0.05)。三个世代的蛋重、蛋形指数、蛋壳厚度、蛋比重及蛋黄色泽无显著差异(P>0.05)。综上所述,三个世代中,F3代黑羽鸡产蛋性能最佳。

复方中草药制剂对林下绿壳蛋乌鸡产蛋性能、蛋品质和血清生化指标的影响

本研究旨在探究日粮中添加不同水平的复方中草药制剂对林下绿壳蛋乌鸡产蛋性能、蛋品质、血清生化指标的影响。选取520日龄健康、体质量接近的绿壳蛋乌鸡560羽,随机分成4组,分别为对照组和试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组分别在基础日粮中添加0.5%、1.0%、1.5%的复方中草药制剂,试验期45 d。结果显示,日粮中添加不同水平的复方中草药制剂对林下绿壳蛋乌鸡的平均蛋重、平均产蛋率、绿壳蛋破损率有显著影响,其中Ⅱ组平均蛋重显著高于对照组(P<0.05),Ⅰ组、Ⅱ组平均产蛋率显著高于对照组(P<0.05),Ⅱ组绿壳蛋破损率显著低于对照组(P<0.05);日粮中添加不同水平的复方中草药制剂对绿壳蛋蛋黄相对重、蛋白高度、蛋黄水分含量、蛋黄指数及哈氏单位有显著影响,其中Ⅱ组绿壳蛋蛋黄相对重显著高于对照组(P<0.05),Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组绿壳蛋蛋白高度显著高于对照组(P<0.05),Ⅱ组、Ⅲ组绿壳蛋水分含量显著低于对照组和Ⅰ组(P<0.05),Ⅱ组绿壳蛋蛋黄指数显著高于对照组、Ⅰ组、Ⅲ组(P<0.05),Ⅱ组绿壳蛋哈氏单位显著高于对照组和Ⅲ组(P<0.05);日粮中添加不同水平的复方中草药制剂对林下绿壳蛋乌鸡的血清总蛋白(TP)、球蛋白(GLO)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)有显著影响,其中Ⅰ组、Ⅱ组血清TP含量显著高于对照组(P<0.05),Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组血清GLO含量显著高于对照组(P<0.05),Ⅲ组血清ALT活性显著高于对照组和Ⅰ组(P<0.05),Ⅱ组血清TC和TG含量显著高于对照组(P<0.05)。综上,日粮中添加不同水平的复方中草药制剂能改善绿壳蛋乌鸡的产蛋性能、蛋品质及血清生化指标,且以1.0%添加量的复方中草药制剂效果最佳。

河南省地方鸡骨骼特性的研究

【目的】研究河南省地方鸡骨骼特性的特点与差异。【方法】随机选取固始鸡、河南斗鸡、正阳三黄鸡、淅川乌骨鸡和卢氏鸡这5个河南省地方鸡品种的成年鸡,每个品种16只,公母数量各8只,屠宰后取股骨、胫骨和跖骨,分别对公母鸡的股骨、胫骨、跖骨的骨骼形态计量学指标,以及胫骨骨密度、骨强度和母鸡的胫骨骨骼成分指标测定,并进行方差分析和主成分分析。【结果】河南省地方鸡不同品种中,河南斗鸡的股骨、胫骨和跖骨的质量、长度均显著高于其他品种,河南斗鸡(公)骨强度和骨密度显著高于正阳三黄鸡(公)和卢氏鸡(公),与固始鸡(公)和淅川乌骨鸡(公)无显著差异。除了河南斗鸡(母)外,淅川乌骨鸡(母)的骨密度、骨强度均显著高于其他品种母鸡。正阳三黄鸡(母)和淅川乌骨鸡(母)胫骨钙含量显著高于固始鸡(母)、灰分显著高于固始鸡(母)和卢氏鸡(母),卢氏鸡(母)胫骨磷最高,显著高于淅川乌骨鸡(母)。结合主成分分析从22个骨骼指标提取出2个主成分,能够反映骨骼指标的信息,河南斗鸡综合评分最高。【结论】河南斗鸡的骨骼特性要明显优于其他4个地方鸡品种,其次是淅川乌骨鸡、固始鸡、正阳三黄鸡和卢氏鸡。

3种贵州地方鸡盲肠菌群结构特征的比较

【目的】基于微生物16S rRNA测序技术探究3种贵州地方鸡的盲肠菌群结构特征,鉴别不同品种鸡盲肠富集的特定菌群,从肠道菌群角度解析地方鸡遗传资源特性,进而加深对贵州地方鸡肠道菌群特征的认识。【方法】选取3种贵州地方鸡(乌蒙乌骨鸡11羽、黔东南小香鸡12羽及瑶山鸡12羽),采集盲肠内容物样品检测16SrRNA序列V3~V4可变区,通过QIIME计算鸡盲肠菌群Alpha多样性,以主坐标分析(PCoA)评估鸡盲肠菌群Beta多样性;采用SparCC算法构建盲肠菌群互作网络,使用马修斯相关系数(MCC)算法进行枢纽菌群识别,并以LEfse分析鉴别组间差异的菌群类别及功能通路。【结果】从35羽贵州地方鸡盲肠内容物共测序获得2625245条Clean reads,按序列相似度97%的阈值进行聚类分析共获得727个OTUs。在门分类水平上,3种贵州地方鸡盲肠菌群的优势菌包括拟杆菌门、厚壁菌门、变形菌门、互养菌门和螺旋菌门;在属分类水平上,相对丰度排名前5的属为拟杆菌属、理研菌科_RC9_菌群、考拉杆菌属、普拉梭菌属和脱硫弧菌属。从乌蒙乌骨鸡、黔东南小香鸡和瑶山鸡盲肠菌群中分别获得160、144和149个OTUs用于菌群互作网络研究,对盲肠菌群互作网络结构分析发现网络稳定性排序为瑶山鸡(稳定性指数44.22%)>黔东南小香鸡(稳定性指数41.76%)>是乌蒙乌骨鸡(稳定性指数37.56%),而网络复杂性排序为黔东南小香鸡>乌蒙乌骨鸡>瑶山鸡。颤螺菌属是黔东南小香鸡和瑶山鸡盲肠菌群互作网络中重要性评分最高的枢纽菌群,乳酸杆菌属是黔东南小香鸡盲肠的枢纽菌群,理研菌科_RC9_菌群是乌蒙乌骨鸡盲肠的枢纽菌群。LEfSe分析结果表明,乌蒙乌骨鸡盲肠富集到15个特征OTUs,其功能通路涉及氨基酸生物合成、2-氧羧酸代谢、精氨酸生物合成等;黔东南小香鸡盲肠富集到2个特征OTUs,其功能通路涉及光合作用和链霉素生物合成;瑶山鸡盲肠富集到6个特征OTUs,仅涉及脂多糖生物合成功能通路。【结论】品种是影响贵州地方鸡盲肠菌群组成和结构的重要因素,一些特定微生物存在于不同品种鸡盲肠中。其中,理研菌科_RC9_菌群、瘤胃球菌属、紫单胞菌属等在乌蒙乌骨鸡盲肠中富集;巨单胞菌属、理研菌科_RC9_菌群、考拉杆菌属等在瑶山鸡盲肠中富集;脱硫弧菌属和普拉梭菌属在黔东南小香鸡盲肠中富集。

赤水乌骨鸡ADSL基因的组织表达特征及其干扰载体构建

【目的】探究赤水乌骨鸡胸肌组织中腺苷琥珀酸裂解酶基因(ADSL)表达特征及其目的基因的干扰载体构建,为深入研究畜禽组织肌肉中肌苷酸(IMP)的表达规律及ADSL基因影响畜禽风味的机制提供理论参考。【方法】以不同月龄(3、4、5和6月龄)的赤水乌骨鸡(公鸡和母鸡各半)为试验材料,运用实时荧光定量PCR检测不同月龄及不同性别赤水乌骨鸡胸肌组织中ADSL基因的表达情况;同时根据GenBank中鸡ADSL基因mRNA序列(NM_205529.2)设计4对短发夹RNA(shRNA)干扰序列(sh1-ADSL、sh2-ADSL、sh3-ADSL和sh4-ADSL)和1对阴性对照序列(sh-NC)与pGPH1/GFP/Neo载体连接后进行测序,将构建成功的ADSL基因干扰载体转染至成肌细胞,检测并筛选出干扰效率最高的干扰载体。【结果】ADSL基因在不同月龄赤水乌骨鸡胸肌组织中的相对表达量排序为5月龄>4月龄>6月龄>3月龄,赤水乌骨母鸡3月龄母鸡的ADSL基因相对表达量极显著高于公鸡(P<0.01,下同),4月龄母鸡ADSL基因的相对表达量显著高于公鸡(P<0.05),6月龄母鸡ADSL基因的相对表达量极显著低于公鸡;ADSL基因质粒的测序结果显示干扰质粒构建成功,质粒转染后干扰组及阴性对照均可见绿色荧光,空白对照不发光,说明各重组质粒成功转染赤水乌骨鸡成肌细胞;ADSL基因沉默结果显示,sh2-ADSL沉默效果最佳,干扰效率为90.30%。【结论】赤水乌骨鸡胸肌中ADSL基因的相对表达量随着月龄增加表现为先上升后下降的变化趋势;3、4和5月龄赤水乌骨母鸡ADSL基因的相对表达量高于公鸡,随着月龄增加ADSL基因的相对表达量增加,公鸡和母鸡间的差异减小。成功分离提取赤水乌骨鸡成肌细胞,并筛选出RNA干扰效果最佳载体sh2-ADSL,为后续研究ADSL基因调控鸡肉肌苷酸及风味的分子机制提供参考。

略阳乌鸡和镇坪乌鸡的群体结构及遗传多样性分析

略阳乌鸡和镇坪乌鸡是陕西省特有乌鸡群体,乌鸡肉营养丰富,深受消费者喜爱,具有巨大的经济价值。然而,至今尚未有研究系统阐明这两群体基因组特征。该研究采集20只略阳乌鸡、20只镇坪乌鸡样本进行全基因组重测序,并结合110只鸡公开数据构建SNP集合。通过群体结构分析发现中国地方鸡的聚类模式有明显的地理趋势,略阳乌鸡和镇坪乌鸡之间的遗传距离最近,表现出南北方家鸡遗传成分的混合。遗传多样性分析显示两乌鸡群体具有较高的观测杂合度、较快的连锁不平衡衰减以及较低的近交系数,遗传多样性较高。该研究加深了对陕西地方乌鸡群体遗传结构和多样性的认识,对略阳乌鸡和镇坪乌鸡种质资源保护具有一定参考意义。

芪枣提取物对余干乌骨鸡生产性能、蛋品质、生殖激素和卵泡发育的影响

为研究芪枣提取物对余干乌骨鸡生产性能、蛋品质、生殖激素和卵泡发育的影响,试验选用240日龄体况良好的余干乌骨鸡120只,随机分成4个组,每组6个重复,每个重复5只。对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加100、200、400 mg/kg芪枣提取物,试验期为56 d。结果表明:(1)芪枣提取物对余干乌骨鸡的产蛋率、料蛋比、平均蛋重和平均日采食量无显著影响(P>0.05)。(2)余干乌骨鸡蛋壳黄度随芪枣提取物水平的增加呈线性增加(P<0.05),哈氏单位、蛋黄指数和蛋壳红度呈二次曲线变化(P<0.05)。(3)试验第28天,余干乌骨鸡血清中雌二醇(E2)含量随芪枣提取物添加水平增加呈二次曲线变化(P<0.05),促卵泡素(FSH)和促黄体生成素(LH)含量随芪枣提取物添加水平增加呈线性增加(P<0.05);试验第56天,芪枣提取物对余干乌骨鸡血清中E2、FSH和LH含量无显著影响(P>0.05)。(4)余干乌骨鸡卵巢雌激素受体β(ESRβ)和促性腺激素释放激素(GnRH1)随芪枣提取物水平的增加呈线性增加(P<0.01),促卵泡素激素受体(FSHR)随芪枣提取物水平的增加呈二次曲线变化(P<0.05)。综上所述,饲粮中添加芪枣提取物可以提高余干乌骨鸡蛋品质、生殖激素含量和卵泡发育相关激素受体基因表达水平。本试验条件下,以200 mg/kg添加量效果最好。

不同饲养模式下略阳乌鸡生长性能、免疫、肠道结构及盲肠菌群的对比分析

旨在研究三种饲养模式对略阳乌鸡生长性能、免疫功能、肠道结构及盲肠菌群的影响。本研究选取同批次70日龄健康略阳乌鸡90只,随机分为3组,分别为笼养组、网上平养组和散养组,每组5个重复,每个重复6只(公母各半)。预试验1周,所有试验鸡饲喂相同基础日粮,自由采食和饮水,饲养至119日龄。每隔7 d测定体重,试验期间记录耗料量,计算平均日采食量、平均日增重和料重比。样本收集包括血清、小肠和肠黏膜(十二指肠、空肠和回肠)以及盲肠内容物。结果表明:网上平养组、笼养组公母鸡的体重均显著高于散养组(P<0.01),试验后期(105~119日龄)笼养组母鸡体重显著高于网上平养和散养组(P<0.01);网上平养和笼养组的平均日采食量(ADFI)和平均日增重(ADG)均高于散养组(P<0.001、P=0.005),散养组料重比(F/G)显著高于笼养和平养组(P=0.002);采用ELISA试剂盒对血清免疫指标检测发现,网上平养组、笼养组和散养组公鸡免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)和分泌型免疫球蛋白A(sIgA)均无显著差异(P>0.05),网上平养母鸡免疫球蛋白A(IgA)含量显著高于笼养和散养母鸡(P<0.05);肠道形态切片结果显示,网上平养组和笼养组的十二指肠、空肠和回肠绒毛高度以及绒毛高度与隐窝深度之比值均显著高于散养组(P<0.05);各组盲肠内容物16S测序结果表明,在门水平分析,散养组增加了变形菌门、ε变形菌门和螺旋体的相对丰度,减少了拟杆菌门和厚壁菌门的相对丰度;网上平养组放线菌、疣微菌和绿弯菌的相对丰度增加,笼养组拟杆菌门和厚壁菌门相对丰度增加。在属水平上,散养组大肠杆菌、幽门螺杆菌、肠球菌和弯曲杆菌的相对丰度增加,粪杆菌、拟杆菌和阿克曼菌的相对丰度降低。笼养组中拟杆菌和理研菌科的相对丰度升高。综上所述,网上平养和笼养模式下的略阳乌鸡生长性能更优及肠道更加健康,网上平养模式可以改善母鸡免疫能力;因此,在本试验条件下,网上平养模式是更合适略阳乌鸡的饲养方式。

不同放养密度对雪峰乌骨鸡生长性能、屠宰性能、血清生化和免疫指标的影响

本试验旨在研究不同放养密度对雪峰乌骨鸡生长性能、屠宰性能、血清生化以及免疫指标的影响。选用健康的35日龄、体重一致的脱温雪峰乌骨鸡母鸡苗1620只,随机分为3个放养密度组,分别为低密度组(LSD组,60只/667 m^(2))、中密度组(MSD组,120只/667 m^(2))和高密度组(HSD组,180只/667 m^(2)),每组6个重复(林地面积500 m^(2)),LSD组每个重复45只,MSD组每个重复90只,HSD组每个重复135只。预试期7 d,正试期78 d。结果显示:1)LSD组雪峰乌骨鸡的平均日增重和料重比显著高于MSD组和HSD组(P<0.05)。2)LSD组宰前活重和屠体重均显著高于MSD组和HSD组(P<0.05)。3)LSD组血清中谷草转氨酶活性显著低于HSD组(P<0.05),LSD组和MSD组血清中碱性磷酸酶活性显著高于HSD组(P<0.05);LSD组血清中甘油三酯含量显著高于HSD组(P<0.05);HSD组血清中超氧化物歧化酶活性显著低于LSD组和MSD组(P<0.05)。4)HSD组血清中免疫球蛋白G、免疫球蛋白M、白细胞介素-2、白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α含量显著高于LSD组和MSD组(P<0.05),MSD组血清中免疫球蛋白A含量显著高于LSD组和HSD组(P<0.05)。由此可见,放养密度为60只/667 m^(2)时能有效提高雪峰乌骨鸡的生长性能,同时保证有较好的屠宰性能、抗氧化能力及免疫力。

雪峰乌骨鸡配套系母本与商品代生长性能、屠宰性能和肉品质的比较分析

为比较雪峰乌骨鸡配套系母本纯系与商品代的生长性能、屠宰性能和肉品质,试验选取1日龄雪峰乌骨鸡配套系母本纯系、商品代各140只(公母各半),采用非线性模型拟合生长曲线并对其生长性能进行比较分析,上市日龄公母各选30只进行屠宰,测定屠宰性能和肉品质。结果显示:雪峰乌骨鸡最适生长曲线模型是Von Bertalanffy,配套系拐点周龄早于纯系,上市体重显著大于纯系,耗料增重比略小于纯系;配套系公鸡的屠宰率、半净膛率、全净膛率、腹脂率显著大于纯系公鸡,母鸡的屠宰率、胸肌率、腿肌率、腹脂率显著大于纯系母鸡;配套系公鸡的滴水损失显著小于纯系公鸡,剪切力、黄度值、肌纤维面积和直径显著大于纯系公鸡,母鸡的滴水损失显著小于纯系母鸡,pH、红度值、肌纤维面积和直径显著大于纯系母鸡;配套系公母鸡的乌度值、灰分、脂肪、蛋白质、总氨基酸含量与纯系公母鸡差异不显著。本研究结果表明,配套系商品代具有更好的生长性能和屠宰性能,在今后育种过程中,可将提高配套系肉质嫩度和降低腹脂率作为育种目标之一。

无量山乌骨鸡肝脏组织发育特征及脂蛋白脂酶基因表达研究

【目的】明确无量山乌骨鸡肝脏组织发育过程中脂质沉积和脂酶活性的变化特征以及与脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)基因表达的相关性。【方法】以1(D1)、42(D42)、84(D84)、126(D126)日龄共4个阶段的无量山公鸡和母鸡为研究对象,测定体重和肝脏组织重量并计算肝脏指数,HE石蜡切片染色鉴定肝脏组织的形态学变化,采用甘油三酯(triglyceride,TG)检测试剂盒(单试剂GPO-PAP法)检测肝脏组织中TG含量,采用比色法检测LPL和肝酯酶(hepaticlipase,HL)活性,采用实时荧光定量PCR检测肝脏组织中LPL基因mRNA表达量,采用Pearson相关性分析确定LPL基因表达量和肝脏组织各指标之间的相关性。【结果】无量山乌骨鸡公鸡和母鸡在不同生长阶段肝脏重差异均显著(P<0.05),D42和D84肝脏指数分别与D1和D126相比差异显著(P<0.05);公鸡和母鸡肝脏组织中TG含量均在D84时出现峰值;母鸡LPL和HL活性在D126时达到顶峰且显著高于其他阶段(P<0.05),公鸡LPL和HL活性在D42时达到顶峰,公母鸡总脂酶活性分别在D42和D126时达到顶峰且显著高于其他阶段(P<0.05);公鸡和母鸡肝脏组织LPL基因mRNA表达的峰值分别在D42和D1,且母鸡LPL基因mRNA表达量在D1、D42和D126共3个发育阶段均与HL活性呈显著相关(P<0.05)。【结论】无量山乌骨鸡肝脏组织重量、肝脏指数、TG含量、脂酶含量和LPL基因mRNA表达量在不同发育阶段变化较大,而成鸡脂酶活性主要受性别影响,母鸡中LPL基因mRNA表达量与HL活性显著相关。结果为进一步研究无量山乌骨鸡肝脏脂肪代谢调控机制提供科学依据。

云南盐津乌骨鸡肉中鲜味肽的提取与鉴定

利用超滤和凝胶过滤色谱法对盐津乌骨鸡肉中的鲜味肽进行分离纯化,结合感官评价得到鲜味最佳的组分F1,进一步采用液相色谱-串联质谱联用技术从F1组分中鉴定出鲜味肽,对鉴定出的鲜味肽进行条件筛选、氨基酸组成和活性片段预测分析。结果表明,从盐津乌骨鸡肉中鉴定出921条多肽,筛选后得到551条多肽,通过鲜味活性预测得到鲜味片段出现频率大于1的10条多肽,其中DTEEVEHGEE、EVHEEEVH、HEAEEVHEE、HEKLSEESEE、KVED、TPIPDLP 6条多肽可能具有较强的鲜味。

基于转录组学和蛋白组学的鸡蛋绿壳性状形成分子机制研究

【目的】挖掘参与绿壳蛋形成的潜在调控基因和蛋白,为开展赤水乌骨鸡品种选育及揭示家禽蛋壳颜色形成分子机制提供理论依据。【方法】以280日龄的绿壳纯系赤水乌骨鸡为研究对象,分别采集产深绿(SL)和白壳(BK)鸡蛋的母鸡蛋壳腺组织样品,通过转录组测序和TMT定量蛋白组学技术分别筛选出差异表达基因(DEGs)和差异表达蛋白(DEPs),并对转录组学和蛋白组学进行联合分析,筛选出调控绿壳鸡蛋颜色深浅的候选基因和候选蛋白。【结果】经转录组测序,从SL组与BK组间共筛选出82个DEGs,其中46个DEGs呈上调表达、36个DEGs呈下调表达;有4个DEGs与蛋壳色素的合成及沉积相关,分别是SLC22A4、SPP1、FAM26E和HSP5基因,且均为上调表达的DEGs;KEGG信号通路分析结果显示,DEGs显著富集的信号通路有α-亚麻酸代谢和花生四烯酸代谢等。通过TMT定量蛋白组学分析,共鉴定获得167个DEPs,其中104个DEPs呈上调表达、63个DEPs呈下调表达;KEGG信号通路富集分析发现,DEPs主要富集于甘油磷脂代谢、半胱氨酸和蛋氨酸代谢及醚脂质代谢等信号通路。转录组学和蛋白组学的联合分析结果表明,转录组与蛋白组无共同注释的GO功能条目,而82个DEGs和167个DEPs富集到19条KEGG信号通路上,其中甘油磷脂代谢和醚脂类代谢2条信号通路在转录组与蛋白组中均有出现。【结论】SLC22A4、SPP1、FAM26E和HSP5基因及FAM102A、FAM107B和SLCO1B1蛋白可能参与蛋壳色素的合成、转运和沉积,尤其是SLC家族发挥着重要作用,故推测这些基因和蛋白是影响赤水乌骨鸡蛋绿壳形成的候选基因和候选蛋白,且富集到的甘油磷脂代谢和醚脂类代谢可能是调节鸡蛋绿壳形成的关键信号通路。

鸡腺苷琥珀酸裂解酶互作蛋白的筛选及其功能分析

通过探究鸡腺苷琥珀酸裂解酶(adenylosuccinate lyase)基因ADSL与其互作基因的调控关系,为进一步研究ADSL在肌肉中高表达的原因和ADSL影响肌肉风味的机制提供参考。本研究构建了鸡(gallus)ADSL基因的重组真核表达载体pEGFP-C1-ADSL,将pEGFP-C1-ADSL和pEGFP-C1质粒分别转染鸡成肌细胞,提取表达成功的细胞总蛋白,利用免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)联合质谱分析鉴定与鸡ADSL蛋白互作的细胞蛋白,并对结果进行GO功能注释、KEGG通路和蛋白互作网络分析。通过分析筛选出RPL4、PDLIM5、ACTG1和SRSF10蛋白,检测在ADSL基因过表达和沉默状态下,RPL 4、PDLIM 5、ACTG 1和SRSF 10基因在成肌细胞中的表达情况。结果表明,与ADSL互作的蛋白共94个;生物信息学分析表明,这些蛋白定位于细胞结构体、胞内和含蛋白质的复合物上,它们主要参与细胞进程、生物调节和刺激反应等生物进程。间接免疫荧光结果显示,重组蛋白pEGFP-C1-ADSL主要定位于细胞核和细胞质。ADSL过表达时,成肌细胞内RPL 4基因和PDLIM 5基因的表达下调,ACTG 1和SRSF 10基因的表达上调;当ADSL被沉默后,成肌细胞内RPL 4和ACTG 1基因的表达上调。研究结果丰富了调控风味的ADSL蛋白,为进一步了解ADSL的功能及该基因在肌肉中高表达提供了参考。

清远黄羽乌鸡生长曲线的拟合与分析

为了解清远黄羽乌鸡的生长特性,筛选出最优的生长曲线模型,试验选择同一批次健康清远黄羽乌鸡100只(公母各半),每周进行1次体重测定,采用Logistic、Von Bertalanffy和Gompertz 3种模型对清远黄羽乌鸡0~22周龄的体重增长数据进行了拟合分析。结果表明,3种生长曲线模型的拟合度(R^(2))均在0.990以上,可用于描述清远黄羽乌鸡的生长发育规律。其中,Gompertz模型对公鸡体重的拟合度最高(R^(2)=0.999),公鸡的拐点体重950.49 g、拐点周龄10.28 w、最大周增重133.07 g。Von Bertalanffy模型对母鸡体重的拟合度最高(R^(2)=0.999),母鸡的拐点体重为757.62 g、拐点周龄为10.47 w、最大周增重为90.91 g。以上结果说明Gompertz模型更适于拟合公鸡的生长过程,Von Bertalanffy模型更适于拟合母鸡的生长过程。该试验结果初步揭示了清远黄羽乌鸡的生长过程,为该品种的选育、饲养管理和实际生产提供参考。

贵州省不同品种乌骨鸡各部位肤色对比分析

旨在探讨贵州省4个地方乌骨鸡品种的肤色差异及其原因。选择普安乌金鸡、乌蒙乌骨鸡、赤水乌骨鸡和黔画乌鸡各60只(公母各半),使用3nh色差仪测量背部肤色、翅下肤色、胫色和鸡冠色,记录色差仪中亮度(L^(*))值、红度(a^(*))值、黄度(b^(*))值并进行统计分析。结果:各部位的L^(*)值显著相关(P<0.05),鸡冠的L^(*)、a^(*)、b^(*)值与几个部位的肤色具有显著差异(P<0.05),普安乌金鸡背部和翅下的L^(*)值显著低于其他3个品种(P<0.05),乌蒙乌骨鸡鸡冠的a^(*)值最高(P<0.05),黔画乌鸡4个部位的b^(*)值均较大。综上,鸡冠色与其他3个部位肤色差异较大,在贵州地方乌骨鸡品种中普安乌鸡肤色背部和翅下肤色最乌,乌蒙乌骨鸡鸡冠色偏红,黔画乌鸡肤色偏黄。