红茶和绿茶多酚对猪胰腺α-淀粉酶抑制效果的动力学研究

目的:研究红茶和绿茶抑制剂对猪胰腺α-淀粉酶催化水解淀粉的抑制效果和特异性。方法:实验在25℃和pH6.9条件下进行。混合0.7 mL不同浓度的淀粉和0.2 mL红绿茶(7.5 g/L),添加0.1 mLPPA(0.04 g/L),进行5 min孵化反应。通过SmartSpec Plus Spectrophotometer不间断540 nm波长下,测量PPA催化生成的麦芽糖的吸光度增加值。通过动力曲线的直线段斜率获得反应速度,动力学参数(Vmax和Ks)由Lineweaver-Burk图求出,抑制类型通过统计学分析确定。结果:无抑制剂和红茶抑制剂的最大反应速度(Vmax)之间的差异具有统计学意义(P<0.05),无抑制剂和绿茶抑制剂的酶-底物解离常数(Ks)之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。红茶抑制剂解离常数(Ki)值高于绿茶(P<0.05)。结论:红茶抑制为非竞争抑制型,绿茶抑制为竞争抑制型。红茶抑制剂既能与自由酶活化中心位点结合,也能与酶-底物上的位点结合,而绿茶抑制剂仅能与活化中心位点结合。