Blockage of IGF-1R signaling sensitizes urinary bladder cancer cells to mitomycin-mediated cytotoxicity

A major problem which is poorly understood in the management of bladder cancer is low sensitivity to chemotherapy and high recurrence after transurethral resection. Insulin-like growth factor 1 receptor (IGF-1R) signaling plays a very important role in progression, invasion and metastasis of bladder cancer cells. In this study, we investigated whether IGF-1R was involved in the growth stimulating activity and drug resistance of bladder cancer cells. The results showed: The mRNAs of IGF-1, IGF-2 and IGF-1R were strongly expressed in serum-free cultured T24 cell line, whereas normal urothelial cells did not express these factors/receptors or only in trace leve1s; T24 cell responded far better to growth stimulation by IGF-1 than did normal urothelial cells; blockage of IGF1R by antisense oligodeoxynucleotide (ODN) significantly inhibited the growth of T24 cell and enhanced sensitivity and apoptosis of T24 cells to mitomycin (MMC). These results suggested that blockage of IGF-IR signaling might potentially contribute to the treatment of bladder cancer cells which are insensitive to chemotherapy.

STEAP1在膀胱移形细胞癌中的表达及其潜在诊断价值

目的探索前列腺六段扩膜上皮抗原1(STEAP1)在膀胱移行细胞癌中的表达及其潜在诊断价值。方法选取2021年6月至2022年12月于中国人民解放军联勤保障部队第九四O医院行外科手术治疗的52例膀胱移行细胞癌患者作为观察组,另外选取同期年龄、性别、基础疾病患病率等基础临床资料匹配的膀胱良性肿瘤患者52例作为对照组。通过酶联免疫吸附试验法、实时荧光定量聚合酶链反应测定两组患者膀胱肿瘤组织中STEAP1及STEAP1 mRNA相对表达水平,以及对比不同病理参数患者膀胱肿瘤组织中STEAP1及STEAP1 mRNA相对表达水平。通过Spearman相关性分析、二元Logistic回归分析筛选膀胱移行细胞癌发生及临床分期的危险因素,通过受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)评价各指标对膀胱移行细胞癌的诊断及预测价值。结果观察组膀胱肿瘤组织中STEAP1及STEAP1 mRNA相对表达水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。中晚期膀胱移行细胞癌患者膀胱肿瘤组织中STEAP1及STEAP1 mRNA相对表达水平均显著高于早期膀胱移行细胞癌患者,差异有统计学意义(P<0.05)。通过二元Logistic回归分析表明,患者膀胱肿瘤组织中STEAP1及STEAP1 mRNA相对表达水平增高均是膀胱移行细胞癌发生及中晚期膀胱移行细胞癌的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,患者膀胱肿瘤组织中STEAP1及STEAP1 mRNA独立预测膀胱移行细胞癌发生的AUC分别为0.841(95%CI:0.760~0.922,P<0.001)、0.936(95%CI:0.893~0.980,P<0.001),均具有较高的预测效能。结论膀胱移行细胞癌患者膀胱肿瘤组织中STEAP1及STEAP1 mRNA相对表达水平与膀胱移行细胞癌发生及中晚期膀胱移行细胞癌呈正相关,提示STEAP1可作为诊断、预测膀胱移行细胞癌发生、发展的潜在标志物。

晨尿脱落细胞端粒酶活性的检测及临床意义

目的 :评价尿脱落细胞端粒酶活性并探讨其临床意义。方法 :采用改良的端粒重复序列扩增 (TRAP) -银染方法检测了 73例膀胱移行上皮细胞癌 (transitional cell carcinoma,TCC)患者 (肿瘤组 )、2 0例非恶性肿瘤泌尿系统其他疾病患者 (对照组 )和 2 1例正常人 (正常组 )的晨尿脱落细胞的端粒酶活性。同时做尿脱落细胞学检查。所有手术切除或活检的肿瘤标本作病理组织学检查。 结果 :肿瘤组尿脱落细胞端粒酶活性的阳性率为 80 .8% (5 9/ 73) ,明显高于尿脱落细胞学的 2 0 .5 % (15 /73) ;对照组中有 3例尿脱落细胞端粒酶阳性 ;正常组尿脱落细胞均无端粒酶活性。结合临床和病理资料分析发现 T2 ～ T4期端粒酶阳性率明显高于 Tis～ T1 期。 结论 :尿脱落细胞端粒酶活性测定有望成为一种灵敏。

核基质蛋白22定量分析及尿液细胞学检查评估膀胱癌复发的价值研究

目的评估核基质蛋白22(NMP22)定量分析与尿液细胞学检查对膀胱癌复发的诊断价值。方法选取2008—2012年在海南医学院附属医院住院的浅表性膀胱癌患者144例。在膀胱镜检查之前患者均在3 d内连续每天提供3份用于尿液细胞学检查的尿液样本以及1份用于NMP22定量分析的尿液样本。以病理组织活检作为金标准,对NMP22定量分析与尿液细胞学检查对膀胱癌复发诊断价值的灵敏度和特异度进行评估。结果 144例患者中,52例(36.1%)诊断为复发性膀胱移行细胞癌。52例膀胱癌复发患者中,41例NMP22定量分析结果为阳性,23例尿液细胞学检查为阳性。NMP22定量分析诊断膀胱癌复发的灵敏度为78.8%(41/52),特异度为69.6%(64/92),阳性预测值为59.4%(41/69),阴性预测值为85.3%(64/75);尿液细胞学检查诊断膀胱癌复发的灵敏度为44.2%(23/52),特异度为83.7%(77/92),阳性预测值为60.5%(23/38),阴性预测值为72.6%(77/106)。两种方法诊断膀胱癌复发的灵敏度和特异度比较,差异有统计学意义(χ2=6.58、5.40,P=0.01、0.02);而两种方法诊断膀胱癌复发的阳性预测值和阴性预测值比较,差异无统计学意义(χ2=3.13、0.50,P=0.08、0.48)。NMP22定量分析与尿液细胞学检查在不同分期、分级、风险分层中的灵敏度比较,差异有统计学意义(P<0.05)。NMP22定量分析联合尿液细胞学检查、NMP22定量分析联合膀胱镜检查、尿液细胞学检查联合膀胱镜检查诊断膀胱癌复发的灵敏度分别为88.5%(46/52)、98.1%(51/52)及94.2%(49/52)。结论 NMP22定量分析法可用于浅表性膀胱癌复发的检测,尤其是在低度以及中度风险的人群,但本方法也因其相对较低的特异度在使用方面受到限制。

膀胱移行细胞癌组织肿瘤增殖核抗原Ki-67的表达意义

目的: 探讨Ki 67在膀胱移行细胞癌(TCC)中的表达意义.方法: 用Ki 67抗原mAb对79例TCC和30例癌旁组织进行免疫组化染色.结果: TCCKi 67指数高于正常膀胱组织(P<0 01),且Ki 67指数与肿瘤病理分级、临床分期和淋巴结转移有关.结论: Ki 67蛋白可作为TCC细胞增殖能力及估计预后的指标.

蝎毒多肽提取物对人膀胱癌T24细胞增殖抑制作用的研究

目的探讨蝎毒多肽提取物(PESV)对人膀胱癌T24细胞增殖的抑制作用及其机制。方法采用体外培养法培养T24细胞,应用MTT法检测对照组和实验组(不同浓度PESV)处理膀胱癌T24细胞后的增殖变化;倒置显微镜观察其对T24细胞形态的影响;RT-PCR检测实验组(低剂量、中剂量及高剂量)BAX和Bcl-2的mRNA的表达变化。结果:PESV能显著抑制T24细胞的增殖,呈现时间和剂量依赖性,差异具有统计学意义(P<0.01),24h抑制率接近50%的T24细胞生长浓度为75mg/L;低、中及高浓度PESV均可致T24细胞生长明显抑制,出现典型细胞凋亡形态;和对照组比较,实验组BAXmRNA和BAX/Bcl-2mRNA表达升高,Bcl-2mRNA表达下降,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 PESV对膀胱癌T24细胞具有明显抑制作用,其诱导T24细胞凋亡的作用可能与上调BAX和下调Bcl-2的表达有关。

CD147与VEGF在人膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨膀胱移行细胞癌(BTCC)组织中CD147与VEGF的表达及其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测72例BTCC组织和12例正常膀胱组织CD147与VEGF的表达,分析CD147与VEGF间及其与BTCC部分临床生物学特性的相关性。结果BTCC组织中有CD147、VEGF表达,其阳性率分别为68.1%、70.8%。CD147表达与BTCC的病理分级显著相关,与临床分期未见相关;VEGF表达与病理分级和临床分期显著相关;CD147表达与VEGF表达呈显著正相关(r=0.406,P<0.01)。结论CD147在BTCC的浸润与转移中起重要作用。

尿膀胱癌抗原作为膀胱肿瘤标志物的临床评价

为评价尿膀胱癌抗原(urinary bladder cancer antigen,UBC)在膀胱移行细胞癌(BTCC)中的诊断价值,采用ELISA法对53例BTCC患者、25例泌尿系统良性疾病患者和13例健康志愿者进行UBC检测,并同时行尿细胞学检查。结果显示:(1)BTCC患者UBC平均含量为26.26±28.49μg/L,与泌尿系统良性疾病患者和健康志愿者相比(9.41±9.63μg/L、1.73±0.79μg/L),均有显著性差异(P均<0.01)。(2)以7.5μg/L为最适临界值时,UBC诊断BTCC的敏感性和特异性分别为86.8%、76.3%,与尿细胞学检查(32.1%、97.4%)相比,均有显著性差异(P均<0.01)。结论:UBC具有简便、敏感和无创的特点,可作为辅助诊断BTCC的尿肿瘤标志物。

尿BTA测定对膀胱肿瘤的早期诊断价值

对 47例膀胱移行细胞癌 (BTCC组 )、2 8例膀胱良性肿瘤 (良性组 )及 2 5例健康志愿者 (对照组 )行尿膀胱肿瘤抗原 (BTA)测定及尿脱落细胞学 (VUC)检查。结果 :BTCC组与对照组、良性组的尿 BTA浓度分别为(4.83± 1.81) U/ m l、(1.19± 0 .2 1) U/ ml、(1.3 7± 0 .68) U/ ml。BTCC组尿 BTA浓度与良性组及对照组比较均存在显著差异 (P<0 .0 1)。尿 BTA测定对 BTCC的诊断有较高的敏感性 (85 .1% )和特异性 (88.9% ) ,优于 VU C检查。 BTA浓度与膀胱肿瘤的临床分期和病理分级呈正相关。 BTA与 VUC同时应用可提高 BTCC检出率。认为BTA测定可提高 BTCC早期诊断率。

Ⅱ型环氧合酶在膀胱移行细胞癌中的表达及与肿瘤血管发生的关系

目的:研究Ⅱ型环氧合酶(Cox -2)在膀胱移行细胞癌中的表达,探讨它与膀胱癌病理分级及临床分期的关系及其临床意义,并研究它与血管内皮细胞生长因子(VEGF)及微血管密度(MVD)表达的关系,从而探讨Cox- 2在膀胱肿瘤血管发生中所起的作用。方法:应用免疫组化方法检测Cox- 2、VEGF及MVD在94 例膀胱移行细胞癌、12例膀胱良性病变和5例膀胱癌旁正常组织中的表达。结果:Cox- 2的表达随着膀胱癌分级分期的上升而呈上升趋势(P<0.05);在膀胱癌中,Cox 2 表达与VEGF表达( r=0.716, P=0.000)关系十分密切,与MVD表达存在明显相关性( r=0.458,P=0.000)。结论:Cox- 2在膀胱癌中均为高表达,它的表达参与了肿瘤的发生及恶性进展,并且与膀胱肿瘤新生血管发生有着密切关系。

膀胱移行细胞癌组织中PTEN基因第5、8外显子的突变分析

目的:了解膀胱移行细胞癌(TCC)组织中PTEN基因第5外显子(Exon5)和第8外显子(Exon8)的突变情况及其与膀胱癌生物学行为的关系。方法:选择突变率较高的PTEN基因Exon5和Exon8,应用银染PCR-SSCP并结合基因测序方法分析46例TCC患者的PTEN突变情况。结果:PTEN的Exon5扩增产物为379bp,所有肿瘤组织均表现为3条迁移带(2条单链和1条双链),没有发现额外迁移带。Exon8扩增产物为550bp,经酶切为两个片段。所有肿瘤组织均表现为6条迁移带(4条单链和2条双链),没有发现额外迁移带。结论:TCC患者的肿瘤组织中PTEN基因Exon5和Exon8的突变不是一个常见事件,PTEN是否还存在其他灭活方式还需要进一步研究。

膀胱移行细胞癌中血型抗原Lewis A和Lewis X表达

目的 探讨血型抗原LewisA和LewisX在膀胱移行细胞癌中的表达及其诊断应用价值。方法 采用免疫组织化学EnVision方法 ,测定血型抗原LewisA和LewisX在 83例膀胱移行细胞癌和 6 8例非肿瘤性移行上皮黏膜中的表达 ,并收集10例膀胱癌及 10例正常人的尿脱落细胞标本进行LewisX免疫染色。结果 LewisA和LewisX在膀胱癌中的表达阳性率分别为 81 9% (6 8/ 83)和 83 1% (6 9/ 83) ,非肿瘤黏膜中的表达阳性率分别为 5 2 9% (36 / 6 8)和 11 8% (8/ 6 8)。LewisA和LewisX的表达强度与膀胱癌的病理分级和临床分期无关 (P >0 0 5 ) ,但膀胱癌的LewisA和LewisX表达强度高于非肿瘤黏膜 (P <0 0 5 )。 2 0例尿脱落细胞标本中 ,8例膀胱癌LewisX表达阳性 ,正常人组全部阴性。结论 LewisA和LewisX可成为诊断膀胱移行细胞癌的参考指标 ,特别是LewisX 。

PSMA和AR在膀胱移行细胞癌中的表达及其相关性研究

目的:研究前列腺特异性膜抗原(PSMA)、雄激素受体(AR)在膀胱移行细胞癌中的表达及其诊治中的临床意义。方法:应用免疫组织化学SP法分别检测75例膀胱移行细胞癌组织及15例正常膀胱黏膜组织中PSMA、AR的表达情况。结果:15例正常膀胱黏膜组织中均未见PSMA和AR的表达,而在75例膀胱移行细胞癌组织的阳性表达率分别为28.0%和21.3%,与正常膀胱黏膜组织相比差异均具有统计学意义(均P<0.05);不同临床分期和病理分级患者PSMA阳性表达差异无统计学意义,而其在复发性膀胱癌患者的表达高于初发性膀胱癌患者,差异具有统计学意义(P<0.01);不同临床分期患者AR的阳性表达差异具有统计学意义(P<0.05)。在膀胱移行细胞癌中,PSMA与AR的表达相关联(r=0.328,P<0.01)。结论:PSMA和AR能客观反映膀胱移行细胞癌的生物学行为,分别对判断恶性程度、预后具有指导意义,且两者可能在膀胱移行细胞癌的发生、发展过程中具有协同作用。

膀胱移行细胞癌中Survivin的表达与Fas/FasL表达的关系

目的:探讨在膀胱移行细胞癌中Survivin的表达与膀胱移行细胞癌病理分级及Fas/FasL系统之间的关系。方法:用免疫组织化学方法检测64例膀胱移行细胞癌、15例膀胱良性病变和12例正常膀胱黏膜中Survivin、Fas、FasL的表达。结果:在93.8%膀胱移行细胞癌和66.7%膀胱良性病变Survivin表达阳性,正常膀胱黏膜组织Survivin无表达,3组比较差异有统计学意义(P<00.1),且Survivin的表达与膀胱癌的分级密切相关。Fas在3组中的表达率分别为50%、80%和100%,FasL在3组中的表达率分别为90.6%、60%和16.7%。Survivin在膀胱移行细胞癌中的表达上调,并与Fas/FasL的表达密切相关。结论:Survivin与膀胱癌的恶性度有关,其可能通过与Fas/FasL系统协同作用共同参与了膀胱移行细胞癌的发生发展。

膀胱移行细胞癌PCNA的表达及其意义

目的 :探讨膀胱移行细胞癌增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达与肿瘤病理分级、临床分期、预后的关系。方法 :采用免疫组化S P法检测 6 5例膀胱移行细胞癌和 11例正常膀胱组织PCNA的表达。结果 :PCNA在膀胱癌及正常膀胱组织的表达差异有显著性 (P <0 .0 1) ;随着膀胱癌病理分级、临床分期升高 ,PCNA阳性表达上升 ,Ⅰ级、Ⅱ级与Ⅲ级比较 ,PCNA的阳性表达差异均有显著性 (P <0 .0 1) ;T2 ～T4 期PCNA的阳性表达显著高于Tis～T1期 (P <0 .0 0 5 ) ;术后 5年内无复发组PCNA的阳性表达显著低于术后 5年内复发组 (P <0 .0 0 5 )。结论 :PCNA可作为膀胱癌恶性程度及预后判断的指标之一 。

膀胱肿瘤抗原诊断膀胱癌的临床价值

目的:探讨膀胱肿瘤抗原(BTA)在诊断膀胱癌中的临床价值。方法:随机选择可疑膀胱癌的血尿患者89例,应用美国BardBTA检测盒进行检测。结果:BTA诊断膀胱癌的敏感度为67%,特异度为78%,准确度为73%,阳性预测值为70%,阴性预测值为75%。结论:BTA诊断膀胱癌有简便、快捷、无创伤的优点,可作为膀胱癌筛选和术后监测的指标之一。

低糖浓度耐受对膀胱肿瘤T24细胞细胞学行为及免疫逃逸的影响

目的探讨低糖培养基筛选的低糖浓度耐受型膀胱肿瘤T24细胞系增殖和迁移能力的变化,以及其免疫检查点PD-L1表达量的变化。方法用不同葡萄糖浓度(2 000、1 500、1 000、500mg/L)的培养基逐代筛选出低糖浓度耐受型膀胱肿瘤T24细胞系。将耐1 000mg/L葡萄糖浓度培养基的T24细胞设为A组,将耐500mg/L葡萄糖浓度培养基的T24细胞设为B组,将普通T24细胞设为C组。通过乳酸浓度检测比较不同组别细胞糖酵解能力的差异。通过细胞划痕实验测定不同组别细胞的迁移能力。通过MTT法检测不同组别细胞的增殖能力。通过荧光定量PCR技术检测不同组别细胞PD-L1mRNA的表达水平。采用Western Blot方法检测不同组别细胞PD-L1蛋白的表达水平。结果乳酸浓度检测结果显示,B组和A组乳酸生成量较C组明显增加(F=30.72,q=7.29、10.88,P<0.05),且B组大于A组(q=3.59,P<0.05)。划痕实验结果显示,B组和A组迁移能力较C组明显增强(F=13.11,q=6.39、6.15,P<0.05),A、B组间比较差异无显著性(P>0.05)。MTT法检测结果显示,B组与A组的膀胱肿瘤增殖能力较C组明显增强(F=63.22,q=9.32、21.99,P<0.05),而且B组大于A组(q=6.42,P<0.05)。荧光定量PCR以及Western Blot方法检测结果证明,无论在mRNA还是蛋白水平,PD-L1的表达量均为B组>A组>C组。结论低糖浓度耐受型膀胱肿瘤细胞系相较于非低糖浓度耐受型膀胱肿瘤细胞系糖酵解、迁移及增殖能力增强,并且其免疫检查点PD-L1的表达亦有明显增加,可能可以作为膀胱肿瘤的潜在治疗靶点。

PCNA及bcl-2基因在膀胱移行细胞癌组织中的表达及其意义

目的 :探讨PCNA和bcl 2基因在膀胱癌组织中的表达及其预后意义 ,了解肿瘤增殖与凋亡的特点 ,揭示细胞凋亡和增殖在膀胱癌发生发展中的作用。方法 :采用免疫组织化学LSAB法 ,对 78例膀胱移行细胞癌组织进行PCNA和bcl 2表达的检测。结果 :在膀胱癌中 ,PCNA主要呈胞核表达 ,bcl 2呈胞质表达 ,PCNA和bcl 2染色阳性率分别为 35 9%和 5 6 4 % ;PCNA表达与膀胱移行细胞癌组织分级、预后呈正相关 (P =0 0 1,P =0 0 386 ) ,bcl 2亦与肿瘤分级、预后呈高度正相关 (P =0 0 0 0 2 ,P =0 0 116 ) ;PCNA和bcl 2表达无明显相关 (P =0 2 32 7)。结论 :PCNA和bcl 2参与膀胱癌的恶性转化、侵袭及进展的过程 ;检测PCNA和bcl 2有助于判断膀胱肿瘤恶性分化程度 。

PCNA反义寡核苷酸抑制人膀胱癌EJ细胞增殖活性的实验研究

目的 探讨全硫代修饰型PCNA反义寡核苷酸 (ASO)对人膀胱癌EJ细胞体外增殖活性及裸鼠体内致瘤性的影响。 方法 PCNA ASO在脂质体介导下转染EJ细胞后 ,运用细胞计数、MTT法、3 H TdR掺入试验、流式细胞术 (FCM)、克隆形成率 (CF)、SABC免疫组化、建立裸鼠动物模型等方法分析其体内外抗瘤活性及机制。 结果 在脂质体介导下 ,0 4～ 2 0 μmol/LPCNA ASO对人膀胱癌EJ细胞体外生长有一定程度的抑制作用 (31 4%～ 78 6 % ) ,呈现时间及计量效应 ;DNA合成速率降低 45 7%～ 84 6 % ;克隆形成能力下降 5 4 3%～ 78 8% ;PCNA蛋白表达减少 ;S期比率显著低于对照组 ,细胞生长受阻于G0 /G1期。 结论 PCNA ASO可抑制EJ细胞体外生长 ,降低DNA合成速率 ,减少PCNA蛋白表达 ;在裸鼠体内 ,PCNA ASO具有抗瘤活性。

膀胱移行细胞癌组织端粒酶活性和增殖细胞核抗原的表达及意义

目的 探讨膀胱移行细胞癌 (TCCB)组织中端粒酶活性和增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达关系及临床意义 方法 采用TRAP ELISA法及免疫组化方法测定 5 8例TCCB组织的端粒酶活性和PCNA表达情况。 结果 TCCB的端粒酶阳性率为 86 .2 % (5 0 / 5 8) ,不同病理分级或临床分期之间差别无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ;PCNA表达强度与分级或分期呈正相关 (P <0 .0 5 ) ;不同PC NA表达强度的TCCB样品之间 ,端粒酶活性差别有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ,二者呈正相关。 结论 TCCB组织中端粒酶活性与PCNA表达有较好的协同性 ,二者联合检测对TCCB的诊断治疗和估计预后有重要意义。