白芨种子的高效萌发及其无性繁殖体系的构建

为实现白芨的快速繁殖,以白芨的成熟蒴果为材料,在MS、1/2MS、KC、VW添加6-BA及椰汁乳的培养基上进行无菌播种.种子萌发后形成的原球茎接种到不同培养基上进行扩增繁殖,建立白芨无性繁殖体系.结果表明:种子萌发最佳培养基为液体培养基1/2MS+6-BA 1.0 mg·L-1,添加10%的椰汁乳能有效提高萌发率,促进原球茎的生长;无性繁殖最佳培养基为MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1.此无性繁殖体系的建立有助于白芨的相关研究和产业化.

基于响应面法优化白及原球茎液体培养基

目的采用响应面优化(Box-Behnken design, BBD)法优选白及原球茎液体培养基,提高白及种子萌发形成原球茎的诱导率。方法采用3水平4因素设计BBD实验,在30 g/L的蔗糖溶液中添加大量元素(MS)、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)和玉米素(ZT)作为白及原球茎液体培养基,并通过响应面法优选4种添加物浓度配比。结果 BBD实验模型设计成功可用于响应面结果优化,经响应面优化后,在1 mg/L MS、2 mg/L 6-BA、0.5 mg/L NAA、0.07 mg/L ZT条件下,白及原球茎诱导率可达(93.13±0.34)%,与预测值95.38%差异无统计学意义(P>0.05)。白及原球茎直播种苗存活率良好,长出的叶片数、植株高度、茎长及茎宽均超过种子直播种苗的数值。结论在基本液体培养基中合理配比4种天然添加物可提高白及原球茎诱导率,进而提高种子萌发率。

白芨种子萌发及其原球茎高效增殖体系建立

【目的】筛选白芨原球茎诱导和增殖的最适培养基,建立白芨原球茎高效增殖体系,为白芨种苗工厂化组培生产提供技术支持。【方法】以白芨种子为外植体,筛选适宜其无菌萌发的灭菌方法;以MS或1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的植物生长物质和附加物,通过单因素试验,确定最佳光照和温度条件,筛选最适合其原球茎诱导的培养基;通过正交试验,筛选最适合其增殖的培养基。【结果】采用75%乙醇处理白芨蒴果10 min,无菌萌发率达90.0%,且种子萌发不受影响。在原球茎诱导过程中,30.0μmol/m^2·s光照强度和25℃温度环境有利于原球茎诱导;最适合原球茎诱导的培养基为1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA。在原球茎增殖过程中,添加土豆泥、椰子汁、香蕉泥等附加物对原球茎增殖有益,其中添加50.0 g/L土豆泥的增殖效果最佳。正交试验结果表明,原球茎增殖的最佳培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+50.0 g/L土豆泥,增殖倍数达5.270。【结论】建立的白芨原球茎高效增殖体系可在白芨种苗工厂化组培生产中推广应用。

白及种子液体悬浮培养原球茎的研究

[目的]研究白及种子在液体悬浮培养条件下萌发的最佳条件,为快速繁殖白及幼苗提供技术支撑。[方法]研究不同光照条件、不同培养基和不同激素及浓度对白及种子萌发的影响。[结果]黑暗有利于白及种子萌发,1/2 MS适宜作为白及种子萌发基本培养基。植物激素对白及种子无菌萌发有一定的促进作用,其中,添加1.0 mg/L NAA对白及萌发促进效果最明显。[结论]在黑暗条件下,以1/2 MS+1.0 mg/L NAA为萌发培养基,白及种子萌发率高,萌发整齐一致,且原球茎生长速度一致。

白及原球茎褐变过程中总酚及相关酶活性的变化

以不同褐变程度的白及原球茎为试材,研究了白及原球茎褐变度与总酚含量、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的关系。结果表明:在一定褐变度范围内,随褐变程度的增加,总酚含量升高,超过一定范围,总酚含量随褐变程度增加而降低;PPO与PAL活性变化趋势一致,在褐变前期与褐变度呈正相关,后期活性随褐变度增加而降低;POD活性随褐变度增加而略有降低。

白芨高效再生体系建立及工厂化育苗技术研究

以白芨种子为外植体,1/2MS或MS为基本培养基,通过添加不同浓度配比的植物生长调节剂,筛选最适合原球茎的诱导、芽的增殖与分化以及生根培养的条件。最适宜白芨原球茎诱导的培养基为1/2MS+1.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA;原球茎的芽增殖的最适培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,增殖倍数达6.6;最佳分化培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+50.0 g/L土豆泥;最佳生根培养基为1/2 MS+0.5 mg/L NAA+70.0 g/L香蕉泥,生根率达100%;炼苗基质配方以黄土∶腐植土∶锯木粉按体积比4∶4∶2,白芨苗移栽成活率高。以白芨种子诱导原球茎获得的高效再生技术体系可以在白芨产业化发展中推广应用。

不同植物生长调节剂对白及种子萌发及生长影响研究

采用无菌白及种子,利用离体培养技术,在1/2 MS液体培养基中培养白及种子,各加入不同浓度的6-BA、NAA、ABA和GA 34种植物生长调节剂,观察其对白及种子萌发及生长的影响。试验结果显示:仅ABA抑制白及种子萌发,且抑制生长,但不抑制原球茎转绿;6-BA对白及种子萌发及生长无显著影响;NAA使原球茎绿色褪去,且高浓度抑制白及生长;GA 3促进原球茎和叶片伸长,0.5 mg/L GA 3中原球茎长度可高达(3.23±1.38)mm,但高浓度GA 3抑制白及生长。结论:白及种子在合适水分、光照等环境下,可自主完成萌发过程,低浓度外源植物生长调节剂对萌发及早期生长没有显著促进作用,高浓度对生长有抑制作用。

紫花三叉白芨快繁技术研究

为建立白芨(Bletilla striata)高效实用的组织培养快繁体系,以紫花三叉白芨成熟未开裂的蒴果、块茎、叶片为外植体,筛选最佳外植体材料,并研究不同生长调节剂浓度培养基对原球茎萌发、丛生芽诱导以及生根影响。结果表明,白芨种子为最佳外植体材料;培养基KC+NAA 0.5 mg·L^(-1)有利于白芨原球茎丛生芽诱导;培养基MS+6-BA 2.0 mg·L^(-1)+NAA 0.2 mg·L^(-1)+10%椰汁有利于丛生芽增殖及成苗;将2 cm高幼苗转入生根培养基1/2MS+NAA 0.5 mg·L^(-1)中,其生根效果最好,生根率达98.67%。

Ca^(2+)胁迫下白及种子萌发及原球茎发育过程微形态学观察

以白及种子为材料,采用植物组织培养的方法,设置6个Ca^(2+)处理浓度(0、1.65、2.47、3.30、4.12、4.95 g·L^(-1)),研究不同浓度Ca^(2+)胁迫对白及种子萌发及原球茎发育过程的影响。结果表明,无菌播种10 d后,2.47 g·L^(-1)Ca^(2+)胁迫下白及种子率先撑破种皮,无菌播种20 d后,3.3 g·L^(-1)Ca^(2+)胁迫下的种子叶片长势较优,无菌播种30 d后,2.47 g·L^(-1)和3.3 g·L^(-1)Ca^(2+)胁迫下的种子幼叶长势较好;无菌播种15 d后,进行种子萌发率统计,Ca^(2+)浓度为2.47 g·L^(-1)时萌发率最高,其次是0、1.65 g·L^(-1)浓度处理,Ca^(2+)浓度超过2.47 g·L^(-1)会抑制白及种子的萌发;无菌播种30 d后,4.95 g·L^(-1)Ca^(2+)胁迫下白及原球茎直径较大。

白芨种子萌发和幼苗生长与紫萁小菇等4种真菌的关系

本文报道白芨种子荫发特点及紫萁小菇等4种真菌在其萌发中的作用。实验结果表明:白芨种子在常规条件下能正常发芽,为兰科植物中易萌发的种子类型。种子伴紫萁小菇等4种真菌播种,真菌对原球茎的子叶分化、生长及假根形成均有显著促进作用。用紫萁小菇培养物的醇、水粗提液及二者混合液播种种子,混合液有利于种子萌发;醇提液可加快原球茎子叶的分化与生长,且效果显著。

白及种子萌发及原球茎发育过程的细胞组织学观察

为探讨白及种子发育成苗的机制,对组织培养条件下种子萌发过程和原球茎发育过程进行了形态学和石蜡切片细胞组织学观察。结果表明:白及种子吸水膨胀后,出现极性,远离胚柄端分化出绿色芽点,芽点发育成子叶,同时种胚突破种皮形成原球茎,另一端则出现成群的白色绒毛状假根。原球茎顶端分生组织的发育遵循原套-原体学说,内部分化出多束维管束后,白及由原球茎过渡到根状茎阶段。其中根原基的发育始于根状茎维管束,为内起源。当根状茎逐渐膨大,内部基本分生组织分化为成熟薄壁组织后,假鳞茎开始形成。白及种子的发育共经过种胚、原球茎、根状茎和假鳞茎4个阶段。