用液相色谱串联质谱法检测脐带血血清25-羟基维生素D2和25-羟基维生素D3浓度

目的建立一种测定脐带血25-羟基维生素D2[25（OH）D2]和25-羟基维生素D3[25（OH）D3]浓度的方法。方法脐带血血清样本前处理采用饱和硫酸锌和乙腈的蛋白沉淀法。采用液相色谱串联质谱法（LC．MS／MS）测定25（OH）D2和25（OH）D3浓度。固定相为Poroshell@120EC-C18正向柱；电喷雾离子源（ESI）；多反应监测模式（MRM）；喷雾电压35．0psi；喷雾温度180℃；鞘气温度350℃；鞘气流速11．0L／min。以甲醇（80％）、超纯水（20％）为流动相进行梯度洗脱，流速为0．5mL／min，柱温为50℃；质谱采用高温ESI，以选择反应监测模式进行定量分析。结果25（OH）D2和25（OH）D3在3．125～100μg/L范围内呈良好的线性关系（R^2=0．9987、0．9991）。血样冻融3次进行检测，日内、日间相对标准偏差（RSD）均〈15％。对血清25．（OH）D2和25（OH）D3质控品进行检测，结果均符合要求。结论LC—MS／MS敏感性高，分析时间短，适用于脐带血1．25（OH）D2和25（OH）D3浓度检测。

GDM患者血清25-羟维生素D3变化及其与炎症因子、血脂指标的相关性研究

目的检测妊娠期糖尿病(GDM)患者血清25-羟维生素D3[25-(OH)2-VitD3]水平,评估其水平与机体炎症因子、血脂的相关关系。方法选取2018年2~9月在中国医科大学航空总医院产检并确诊为GDM的孕妇178例作为GDM组,同期在本院进行产检且糖耐量检查正常的孕妇100例作为正常对照组。对比两组孕妇血清中25-(OH)2-VitD3、炎症因子及血脂指标水平的差异,采用Pearson检验评估GDM患者血清25-(OH)2-VitD3水平与机体炎症因子、血脂指标的相关关系。结果GDM组血清中25-(OH)2-VitD3的含量显著低于正常对照组(P<0.05)。GDM组血清中炎症因子白介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-18和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平显著高于正常对照组(P均<0.05);血脂指标总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白B(Apo-B)和载脂蛋白CⅢ(Apo-CⅢ)的水平显著高于正常对照组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白A1(Apo-A1)的水平显著低于正常对照组(P均<0.05)。相关性分析发现,GDM孕妇血清中25-(OH)2-VitD3水平与炎症因子、血脂指标均相关(P均<0.05)。结论GDM患者血清25-(OH)2-VitD3水平明显降低,且其水平与机体炎症因子、血脂指标相关,这在GDM发生及病情评估中具有重要意义。

25羟维生素D3联合利拉鲁肽对2型糖尿病微血管并发症患者血糖代谢、VEGF、IGF-1、sTNFR1指标水平的影响

目的探究25羟维生素D3联合利拉鲁肽对2型糖尿病微血管并发症患者血糖代谢、血管内皮生长因子(VEGF)、胰岛素样生长因子(IGF-1)、可溶性蜕膜组织受体1(sTNFR1)指标水平的影响。方法回顾性选取2020年1月至2020年6月份秦皇岛市第二医院内分泌科就诊的25(OH)D缺乏的2型糖尿病微血管并发症患者100例进行研究,根据治疗方案将其分为对照组(n=50)、观察组(n=50)。对照组接受利拉鲁肽治疗,观察组在对照组治疗方案基础上加施25羟维生素D3。比较两组治疗后血糖代谢、VEGF、IGF-1、sTNFR1指标水平、骨代谢指标[骨碱性磷酸酶(BAP)、骨保护素、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素]水平以及并发症情况。结果治疗后,观察组三酰甘油、总胆固醇、空腹血糖、餐后2 h血糖水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后观察组VEGF、IGF-1、sTNFR1指标水平为(82.36±8.54)ng/L、(93.84±7.86)μg/L、(23.52±4.01)pg/mL,均低于对照组[(118.42±12.04)ng/L、(117.64±12.45)μg/L、(27.88±4.17)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后观察组ALP为(4.02±0.81)U/L,低于对照组[(5.44±0.98)U/L],BAP、骨保护素、OC指标水平为(43.28±7.11)μg/L、(323.15±17.40)ng/L、(8.49±0.92)μg/L,均高于较对照组[(37.04±6.02)μg/L、(301.22±14.73)ng/L、(7.50±0.84)μg/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后骨质疏松症、周围神经病变症、眼底病、糖尿病肾病等发病率为14.00%,较对照组的38.00%低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论25羟维生素D3联合利拉鲁肽可改善2型糖尿病微血管并发症患者血糖代谢指标水平,调节VEGF、IGF-1、sTNFR1指标水平及骨代谢指标水平,减少并发症发生率,值得推广应用。

慢性心衰患者外周血MMP-9、RDW、25(OH)D3表达水平及临床意义

目的探讨慢性心衰(Chronic heart failure,CHF)患者外周血基质金属蛋白酶9(Matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、红细胞体积分布宽度(Red blood cell distribution width,RDW)、25羟维生素D3(25hydroxyvitamin D3,25(OH)D3)表达水平及临床意义。方法选取2019年5月-2020年12月黄河三门峡医院心内科收治的106例CHF患者和同期入院体检心功能正常的40例志愿者,分为CHF组和对照组,CHF组按纽约心脏协会(NYHA)心功能分级,分成Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级3个亚组。检测受检者外周血MMP-9、RDW、25(OH)D3和N-末端B型脑利肽前体(Nterminal pro brain natriuretic peptide,NT-ProBNP)水平,心脏彩超测定左室射血分数(Left ventricular ejection fraction,LVEF),对上述指标进行比较分析,Logistic多元回归分析CHF患者6个月内发生主要心血管不良事件(Major cardiovascular adverse events,MACE)的危险因素。结果两组基线资料比较,差异无统计学意义(P>0.05);研究组外周血MMP-9、RDW高于对照组,25(OH)D3低于对照组差异有统计学意义(P<0.05);随NYHA分级增加,CHF患者外周血MMP-9、RDW、NT-ProBNP逐渐升高,25(OH)D3、LVEF逐渐下降(P<0.05),两两比较差异有统计学意义(P<0.05);CHF患者外周血MMP-9、RDW与NT-ProBNP呈正相关(r=0.802、0.724,P<0.05),与LVEF呈负相关(r=-0.692、-0.543,P<0.05),25(OH)D3与NT-ProBNP呈负相关(r=-0.756,P<0.05),与LVEF呈正相关(r=0.574,P<0.05);Logistic回归分析显示,外周血MMP-9、RDW、25(OH)D3是CHF患者发生MACE的独立危险因素(OR=1.306、1.159、0.843,95%CI:1.071-1.523、0.982-1.274、0.783-0.902,P<0.05)。结论CHF患者外周血MMP-9、RDW异常升高,25(OH)D3明显偏低,且上述指标与心功能降低程度和近期发生MACE紧密相关,对临床评估病情和预后有重要价值。

新生儿窒息与血清碱性磷酸酶、血25-羟维生素D3表达水平的相关性

目的:探讨新生儿窒息与血清碱性磷酸酶、血25-羟维生素D3表达水平的相关性。方法:选取2017年8月-2020年8月本院收治的60例新生儿窒息患儿作为研究组,另选取同期60例健康新生儿作为对照组。对比两组新生儿血清相关指标、尿酶相关指标、肾主动脉血流参数指标表达水平,分析相关指标与新生儿窒息的相关性。结果:研究组血25-羟维生素D3、血清碱性磷酸酶均低于对照组,尿素氮、肌酐水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组ALP、GAL、GGT、NAG均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组PI、RI均高于对照组,EDFV、PSFV均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示:血25-羟维生素D3、血清碱性磷酸酶、EDFV与新生儿窒息均呈负相关(P<0.05),尿素氮、肌酐、ALP、GAL、GGT、NAG、PI、RI与新生儿窒息均呈正相关(P<0.05),PSFV与新生儿窒息无相关性(P>0.05)。结论:血清指标检查、尿酶相关指标检查以及肾主动脉血流参数检查都能判断新生儿窒息情况,其中血清碱性磷酸酶与血25-羟维生素D3表达水平与新生儿窒息具有明显相关性,可以用于判断新生儿窒息严重情况与预后的判断,具有重要价值。

血清25-(OH)D3、PCT、CRP和WBC联合检测在新生儿感染性肺炎诊断中的应用

目的探讨血清25羟维生素D[25-(OH)D]、降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)和白细胞计数(WBC)联合检测在新生儿感染性肺炎诊断中的应用效果。方法选取2021年1月至2022年6月本院收治的100例感染性肺炎新生儿作为研究对象,依据血培养及痰液培养结果分为细菌组(细菌感染患儿,n=54)及非细菌组(非细菌感染患儿,n=46),两组均接受血清25-(OH)D、PCT、CRP和WBC水平检测,同时绘制受试者工作特征曲线,分析新生儿感染性肺炎诊断中血清25-(OH)D、PCT、CRP和WBC联合检测的应用效果。结果细菌组血清25-(OH)D、PCT、CRP和WBC水平均明显高于非细菌组,差异有统计学意义(P<0.05);联合检测诊断新生儿感染性肺炎感染的准确度、灵敏度与特异度均高于单一指标检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清25-(OH)D、PCT、CRP和WBC联合检测在新生儿感染性肺炎诊断中的应用效果确切,可为疾病诊断提供参考。

特发性膜性肾病患者25-羟维生素D_3水平及其与血脂的关系

目的探讨特发性膜性肾病(IMN)患者25-羟维生素D_3[25-(OH) D_3]水平及其与血脂的关系。方法检测109例初诊IMN患者治疗前的血清25-(OH) D_3及血脂水平,根据25-(OH) D_3水平将患者分为缺乏[25-(OH) D_3<25 nmol/L]组和不足[25-(OH) D_3≥25 nmol/L]组,分析25-(OH) D_3及其与血脂水平的关系。所有患者均补充维生素D,监测随访期间血清TC变化情况。结果入院时,109例IMN患者的25-(OH) D_3中位水平为12. 27(6. 79,24. 91) nmol/L,其中≥25 nmol/L共27例,<25 nmol/L共82例; 77. 98%(85/109)的患者合并高脂血症,以TC升高为主;不足组IMN患者TC、TG、LDL-C水平均高于缺乏组患者(均P <0. 05); IMN患者25-(OH) D_3水平与TC、TG、LDL-C水平均呈负相关(均P <0. 05)。随访期间,不足组的TC水平总体呈下降趋势(P <0. 05),但缺乏组中各时间点TC水平差异无统计学意义(P> 0. 05)。随访0、1、2个月时不足组的TC水平仍高于缺乏组(均P <0. 05),但3～6个月时两组差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论 IMN患者普遍存在25-(OH) D_3水平低下,25-(OH) D_3缺乏可能在IMN肾病血脂代谢紊乱的发生中起一定作用。补充维生素D或利于降低IMN患者血脂水平,从而控制病情。

单纯性肥胖儿童血清25-羟维生素D水平及意义

目的探讨单纯性肥胖儿童血清25-羟维生素D[25-(OH)D_3]的水平及意义。方法选取2016年1月至2017年12月在成都市龙泉驿区妇幼保健院和达州市妇幼保健计划生育服务中心就诊的单纯性肥胖症患儿104例,按照超过同性别、同年龄、同身高健康儿童标准体重20%为肥胖,20%～49%为轻中度肥胖;≥50%为重度肥胖,将其分为轻中度肥胖组64例,重度肥胖组40例;同时选取健康体检正常体重儿童60例作为对照组。检测两组儿童的血清25-(OH)D_3、血脂及T淋巴细胞亚群水平,并进行分析。结果轻中度肥胖组和重度肥胖组25-(OH)D_3、CD3^+和CD4^+均明显低于对照组(F值分别为45.022、47.577、34.291,均P<0.05),而体质量指数(BMI)、BMI标准差积分(BMISDS)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)均明显高于对照组(F值分别为30.141、15.392、110.32、103.201、80.443,均P<0.05)。重度肥胖组25-(OH)D_3、CD3^+和CD4^+水平均明显低于轻中度肥胖组(t值分别为7.873、20.021和9.821,均P<0.05),而BMI、BMISDS、TC、TG、LDL-C水平均明显高于轻中度肥胖组(t值分别为14.332、10.033、25.822、38.271和18.292,均P<0.05)。患儿的25-(OH)D_3与BMI、BMISDS和TG均呈负相关性(r值分别为-0.403、-0.398、-0.311,均P<0.05),与CD3^+和CD4^+均呈正相关性(r值分别为0.344、0.321,均P<0.05)。结论单纯性肥胖儿童血清25-(OH)D_3水平明显降低,与患儿肥胖程度、血脂及免疫功能有一定关系,值得进一步研究。

液相色谱-串联质谱法检测干血点样本中25-羟基维生素D_2和25-羟基维生素D_3

建立了一种高通量液相色谱-串联质谱技术检测干血点(DBS)样本中25-羟基维生素D_2[25(OH)D_2]和25-羟基维生素D_3[25(OH)D_3]的方法。以DBS为样本,以4-苯基-1,2,4-三唑啉-3,5-二酮(PTAD)为试剂进行分析物衍生化,所需样本量仅约相当于6μL全血当量的DBS样本;使用甲醇直接超声提取分析物,避开了通常情况下DBS样本前处理中的全血复溶和蛋白质沉淀等繁琐步骤;整个前处理过程使用自动化液体处理平台实现自动化操作和高检测通量;以25(OH)D_2-D6和25(OH)D_3-D_3为同位素内标,消除基质效应的影响。前处理后的样本进行LC-MS/MS分析,使用C_(18)柱进行分离,流动相为甲醇(含5 mmol/L甲酸铵)-水(含5 mmol/L甲酸铵)(75∶25,V/V),洗脱时间为4 min,使用多反应监测模式(MRM)定量。结果表明:25(OH)D_2和25(OH)D_3的检出限为0.12 ng/m L(S/N=3),定量限为0.94 ng/m L(S/N=10)。25(OH)D_2和25(OH)D_3在0.94~120.00 ng/m L范围内线性关系良好,日内相对标准偏差(RSD)分别为1.4%~8.6%和3.7%~15.5%,日间RSD分别为4.0%~5.3%和3.8%~14.9%,平均回收率分别为91.7%±7.9%~108.5%±6.5%和94.8%±6.8%~101.3%±2.9%。DBS样本在不同温度(-20℃,22℃,37℃)下储存不同时间(0,1,2,3,5,7,14天)后的稳定性实验显示样本总体RSD<15%。以25(OH)D参考物质NIST SRM 972a中的Level 3制备标准DBS样本,25(OH)D_2和25(OH)D_3的回收率分别为110.3%和103.0%。

25羟维生素D_3与糖尿病周围神经病变的相关性研究

目的探讨血清25羟维生素D_3与糖尿病周围神经病变(DPN)的相关性。方法选择2017年3月～2018年3月我院收治的50例2型糖尿病合并周围神经病变的患者设为DNP组,同时选择我院同期收治的50例单纯2型糖尿病患者设为NDNP组,对两组患者的实验室检测指标和血清25羟维生素D_3水平进行观察分析。结果在血钙、血磷、血肌酐以及PTH等实验室指标方面,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);两组在病程、25羟维生素D_3和HbA1c方面差异有统计学意义(P<0.05)。DNP组中血清25羟维生素D_3缺乏的发生率显著高于NDNP组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清25羟维生素D_3水平与患者的吸烟史、体重指数、年龄等无显著相关性,与糖尿病病程、HbA1c表现为负相关。结论血清25羟维生素D_3水平与糖尿病周围神经病变病程以及血糖控制程度呈负相关。

骨质疏松症合并高尿酸血症患者维生素D水平与骨代谢、血尿酸的关系

目的探讨骨质疏松症合并高尿酸血症患者维生素D水平与骨代谢、血尿酸(BUA)的关系。方法选取72例骨质疏松症合并高尿酸血症者患者作为合并疾病组、85例单纯骨质疏松症者患者作为单纯疾病组及60例体检健康者作为健康组。所有受试者均检测血清25羟维生素D3(25-OHD3)、骨钙素(BGP)、β-Ⅰ型胶原羧基端交联肽(β-CTX)、Ⅰ型前胶原氨基端前肽(PINP)、骨特异性碱性磷酸酶(BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b)、BUA水平,并分析合并疾病组25-OHD3与骨代谢指标、BUA的关系。结果血清25-OHD3、BALP水平在合并疾病组<单纯疾病组<健康组,BGP、β-CTX、PINP、TRACP-5b水平在合并疾病组>单纯疾病组>健康组,差异均有统计学意义(P<0.05);合并疾病组BUA水平明显高于单纯疾病组、健康组(P<0.05),单纯疾病组与健康组比较无明显差异(P>0.05);经Pearson相关性分析,合并疾病组25-OHD3与BGP、β-CTX、PINP、TRACP-5b、BUA均呈负相关,与BALP呈正相关(P<0.05)。结论骨质疏松症合并高尿酸血症患者血清25-OHD3水平降低,与BGP、β-CTX、PINP、TRACP-5b及BUA呈负相关性,而与BALP呈正相关性。

口服葡萄糖耐量试验1 h血糖和25-羟维生素D_3水平对糖耐量正常肥胖儿童3年自然转归的影响:多中心随访研究

目的探讨口服葡萄糖耐量试验(OGTT)1 h血糖和25-羟维生素D_3[25-(OH)D_3]水平对糖耐量正常肥胖儿童3年自然转归的影响。方法选取2012年6月—2013年12月在保定市儿童医院、贵阳市儿童医院、济宁医学院附属医院及河北省儿童医院行OGTT的肥胖儿童297例,其中糖耐量正常者238例;根据OGTT 1 h血糖将糖耐量正常儿童分为对照组(OGTT 1 h血糖≤8.6 mmol/L,n=142)和观察组(OGTT 1 h血糖>8.6 mmol/L,n=96);两组儿童均随访3年,根据随访结果分为A组(糖耐量正常,n=123)、B组(糖耐量异常,n=25)及C组[2型糖尿病(T2DM),n=7]。比较对照组与观察组儿童基线实验室检查指标及随访3年自然转归,比较A组、B组和C组儿童基线实验室检查指标及随访结束时25-(OH)D_3水平;25-(OH)D_3水平与糖耐量正常肥胖儿童OGTT 1 h血糖的相关性分析采用Pearson相关性分析。结果随访3年,失访83例,失访率为34.9%;最终对照组共84例儿童完成随访,观察组共71例儿童完成随访。对照组与观察组儿童基线0 h胰岛素、2 h胰岛素及三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组儿童基线OGTT 0 h血糖、1 h血糖、2 h血糖高于对照组,基线25-(OH)D_3水平低于对照组(P<0.05)。随访3年,观察组儿童自然转归劣于对照组(P<0.05)。A组、B组及C组儿童基线0 h胰岛素、2 h胰岛素、OGTT 0 h血糖、OGTT 2 h血糖及TG、TC、HDL-C、LDL-C水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);B组和C组儿童基线OGTT1 h血糖高于A组,基线25-(OH)D_3水平低于A组(P<0.05);C组儿童基线OGTT 1 h血糖高于B组,基线25-(OH)D_3水平低于B组(P<0.05)。B组C组儿童随访结束时25-(OH)D_3水平低于A组,C组儿童随访结束时25-(OH)D_3水平低于B组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,25-(OH)D_3水平与糖耐量正常肥胖儿童OGTT 1 h血糖呈负相关(r=-0.20,P<0.05)。结论 OGTT 1 h血糖和25-(OH)D_3水平均可影响糖耐量正常肥胖儿童3年自然转归,且OGTT 1 h血糖与25-(OH)D_3水平呈负相关。

生命早期环境内维生素D缺乏与儿童肥胖症1:2匹配的相关性研究

目的探究生命早期环境内维生素D缺乏与儿童肥胖症1:2匹配的相关性.方法选取赣州市人民医院2019年1月-2021年12月126例儿童肥胖症患者作为病例组,同期对此进行1:2配对,选取252例无儿童肥胖症患者作为对照组.测定两组患者25-羟基维生素D3[25-(OH)D3]、空腹血糖、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,并比较25-(OH)D3与空腹血糖、TG、TC、HDL-C、LDL-C水平的相关性.结果与对照组比较,病例组25-(OH)D3、HDL-C水平降低,TG、TC、LDL-C、空腹血糖水平升高(P<0.005).经相关性分析显示,25-(OH)D3水平与空腹血糖、TG、TC、LDL-C水平呈负相关,与HDL-C水平呈正相关(P<0.05).结论儿童肥胖症与生命早期环境内维生素D缺乏有关,且25-(OH)D3水平与空腹血糖、TG、TC、HDL-C、LDL-C的变化密切相关.