敲减Bloom综合征解旋酶基因对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探究膀胱癌细胞Bloom综合征解旋酶(BLM)表达水平及其临床意义。方法在GEPIA数据库检索BLM在膀胱癌中的表达水平,并在膀胱癌细胞系T24和人正常膀胱上皮永生化细胞SV-HUC-1中检测BLM表达水平;转染T24细胞sh-NC和sh-BLM,未转染细胞作为对照;检测T24细胞增殖和凋亡水平。结果与非BLCA组比较,膀胱癌组织和细胞系T24细胞中BLM表达水平均上调(P<0.01)。与对照组比较,T24+sh-BLM组T24细胞BLM mRNA表达水平降低,增殖能力下降,凋亡水平升高(P<0.01)。结论在膀胱癌中BLM基因表达升高,与膀胱癌疾病进程相关,敲低其表达可抑制细胞增殖、促进凋亡。

甘草次酸下调Bloom综合征解旋酶的表达及PC3细胞的增殖凋亡和侵袭迁移

目的在甘草次酸处理前列腺癌细胞(PC3细胞)的基础上,检测细胞的增殖、侵袭、迁移和凋亡及Bloom综合征(BLM)解旋酶和细胞凋亡因子Caspase-3的表达。方法通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)、Transwell小室、划痕法检和Hoechst/PI双染分别检测细胞的增殖能力、侵袭能力、迁移能力和凋亡率;实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western-blot分别检测检测BLM和Caspase-3基因的转录和蛋白表达。结果 MTT法表明,甘草次酸浓度在0.12 mol·L^(-1)以下时,对细胞的增殖能力没有影响,大于0.12 mol·L^(-1)时,随着药物浓度的增大,细胞的增殖能力逐渐下降;侵袭和划痕表明,甘草次酸浓度在0.16 mol·L^(-1)以上时,细胞的侵袭和迁移能力均显著减小;Hoechst/PI双染显示,甘草次酸浓度在0.12 mol·L^(-1)以上时,细胞发生明显的凋亡;荧光定量PCR表明,甘草次酸浓度在0.12 mol·L^(-1)以上时,随着浓度的增大,PC3细胞中的BLM基因的mRNA的表达量逐渐下降,而Caspase-3基因的表达量逐渐上升;Western blot表明,甘草次酸浓度在0.12 mol·L^(-1)时,BLM解旋酶的表达量明显降低,而Caspase-3蛋白的表达量明显升高。结论甘草次酸抑制PC3细胞的增殖、侵袭和迁移与BLM解旋酶的低表达有关,而甘草次酸促进PC3细胞发生凋亡与细胞凋亡因子Caspase-3高表达有关。

姐妹同患Bloom综合征2例

报道2例同胞姐妹患Bloom综合征。例1为10岁,有侏儒、光敏和面部毛细血管扩张性红斑及血IgM低下,并伴有多处骨折,染色体检查正常。例2为5岁,有光敏和面部毛细血管扩张性红斑,发育正常,染色体检查正常。

Bloom综合征1例

报告 Bloom综合征 1例。患者女， 31岁，因面部红斑、日晒后加重 28年入院。患者 2岁起面部出现毛细血管扩张性红斑，对日光敏感。患者身材偏矮小，四肢纤细，牙齿排列不齐。

Bloom综合征1例

1临床资料 患者女，2岁，斟面部起疹1年，于2012年4月10H就诊。 1年前患者面颊出现2个淡红斑，小片状，约拇指盖大小，似对称，边界不清，未曾消退并逐渐扩大，现为对称性似蝴蝶状红斑，上有毛细血管扩张，日晒后加重，无明最自觉症状。体格检查：不能行走，仅能站立2～3s，尚不能说话，身高较同龄儿低，见图l。皮肤科查体：面颊对称性蝴蝶状红斑，

Bloom综合征伴指骨破坏1例

1临床资料 患者女，28岁。因面部红斑伴双手指骨吸收并逐渐加重就诊。患者3岁时无明显诱因双面颊皮肤出现毛细血管扩张，逐渐扩大成网状，局部出现色素沉着。5岁时起双手皮肤由红变紫，出现骨质吸收，活动受限。怀孕时唇部曾出现水疱。面部皮损夏季或日晒后加重，皮温明显升高。常感乏力，无其他明显不适。患者出生时无产伤和窒息，足月顺产。

Bloom综合征1例

患者,女,17岁。面部毛细血管扩张17年。出生40天出现面部多发粟粒大红色丘疹,伴毛细血管扩张。系统检查正常。组织病理改变符合Bloom综合征。

Bloom综合征1例

Bloom综合征是一种罕见的常染色体隐性遗传综合征，笔者诊治1例，现报告如下。1病历摘要患儿男，10岁。因面部反复红斑7年余就诊。患儿3岁时无明显诱因两侧面颊出现对称分布红斑，约钱币大，边缘不清．无明显痒痛，眉毛脱落。随后红斑颜色逐渐由鲜红变暗红，扩大至耳郭。患儿自发病以来，面部红斑反复发作，间断缓解，冬重夏轻，未曾完全消退。个人史：父母非近亲结婚。

Bloom综合征1例

临床资料患儿女，2岁3个月。因面部反复出现红斑，日晒后加重2年就诊。患儿出生时面部即有小片红斑，日晒后加重，后皮损扩展至整个面部，无瘙痒，反复发作，夏重冬轻。患儿系足月顺产，发育较迟缓，身高明显低于同龄儿童，智力一般。家族史：父母健康非近亲结婚，体重身高无异常，家族中无类似病史及其他遗传病史。

Bloom氏综合征的遗传学探讨

Bloom 氏综合征又名先天性毛细血管扩张性红斑、侏儒—面部毛细血管扩张综合征、Bloom-Torre-Machache 氏综合征、蝴蝶状红斑综合征等。

DEAD-box RNA解旋酶41在髓系肿瘤中的作用机制的研究进展——骨髓增生异常综合征/急性髓系淋巴细胞白血病

DEAD-box RNA解旋酶(DEAD-box helicase,DDX)参与RNA代谢的各个过程,包括基因转录、前体RNA剪切、mRNA转运和翻译、核糖体合成以及miRNA的调控等。DDX家族成员的突变对RNA代谢的影响可导致一系列疾病的产生。DEAD-box RNA解旋酶41(DDX41)是DDX家族的一个重要成员,该分子是剪切复合体的一个重要组成成分,其突变可导致个体出现骨髓增生异常综合征,进而导致急性髓系淋巴细胞白血病这一血液恶性肿瘤的出现,严重影响患者的生存和预后。本文就DDX41在上述血液恶性肿瘤中的作用机制的研究进展作一综述。

Bloom综合征和共济失调性毛细血管扩张症

Bloom 综合征(BS)和共济失调性毛细血管扩张症(AT)属染色体不稳定性病。BS 细胞有自发染色体断裂倾向,主要表现为姐妹染色单体互换(SCE)增多,提示疾病与DNA 连接酶活性缺陷有关。AT 细胞遗传学特征为累及7号、14号染色体畸变和自发或射线诱发的染色体断裂,提示发病与免疫球蛋白、T 细胞受体基因定位及DNA 修饰机制缺陷有关。绒膜的绒毛标本染色体检查是产前诊断BS、AT 新方法,并初步显示此法可靠。

Bloom氏综合征分子遗传学研究进展

Bloom氏综合征（Bloom’ssyndrome，简称BS）是一种常染色体隐性遗传的染色体不稳定性综合征。身材矮小，免疫功能低下，面部微血管扩张性红斑和易患肿瘤或白血病是其典型的临床特征。近年来，有关BS综合征细胞遗传学和分子遗传学的研究取得了长足的进展。Ellis等克隆了BS综合征编码基因（BLM基因）的全长cD-NA，且发现BLM基因的突变是BS综合征患者发病的分子遗传学基础，从而为BS综合征家族的遗传咨询和基因诊断及其产前基因诊断工作的顺利开展奠定了科学的基础。本文在简述用综合征细胞遗传学和酶学改变研究概况的基础上，重点介绍BS综合征分子遗传学的研究进展。

荧光偏振技术研究Bloom解旋酶催化核心与双链DNA的相互作用

Bloom综合症(BLM)解旋酶是RecQ家族DNA解旋酶中的一个重要成员,参与了DNA复制、修复、转录、重组以及端粒的维持等细胞代谢过程,在维持染色体的稳定性中具有重要的作用.BLM解旋酶的突变可导致Bloom综合症,患者遗传不稳定易患多种类型癌症.本研究运用荧光偏振技术研究BLM解旋酶催化核心(BLM642～1290)与双链DNA(dsDNA)的相互作用,分析其相关特征参数,了解BLM642～1290解旋酶与dsDNA的结合和解链特性.结果表明:BLM642～1290解旋酶与dsDNA的结合和解链与dsDNA 3′端的单链DNA(ssDNA)长度有关;解旋酶优先结合于dsDNA底物的ssDNA末端,且每分子解旋酶可结合9.6 nt的ssDNA;dsDNA 3′端ssDNA的长度为9.6 nt时,解旋酶的解链效率达到最大且不再随其长度而变化.另外,BLM642～1290解旋酶也能够结合和解链钝末端dsDNA,但其结合亲和力和解链效率低于有3′端ssDNA的dsDNA.推测BLM642～1290解旋酶在与dsDNA底物结合和解链时是单体形式,可能以尺蠖的形式解开dsDNA.这些结果可为进一步研究BLM解旋酶的功能特征提供理论基础.

二氢杨梅素对Bloom解旋酶结构和生物学活性的影响

目的二氢杨梅素(dihydromyricetin,DMY),是一种黄酮类化合物,具有抗炎、抗肿瘤等作用,研究DMY对Bloom解旋酶(Bloom helicase,BLM)生物学活性的影响对探索DMY的抗肿瘤机制具有重要意义。方法采用紫外光谱、圆二色谱、荧光偏振和自由磷检测等方法和技术研究DMY对BLM解旋酶的生物学活性的影响。结果圆二色谱和紫外光谱结果显示,DMY能与BLM解旋酶结合,且有1个结合位点;在0~25μmol·L^-1浓度范围内,DMY对BLM解旋酶的二级结构的干扰能力成正相关,在25~75μmol·L^-1浓度范围内则相反。荧光偏振和自由磷检测实验显示,DMY能结合在BLM解旋酶上,进而抑制BLM解旋酶的解链活性。结论DMY能够竞争性结合于BLM解旋酶的DNA结合位点上,改变BLM解旋酶的空间结构,从而抑制BLM解旋酶与DNA的结合,进而抑制BLM解旋酶的生物学活性。

汉防己甲素衍生物HL-49对Bloom DNA解旋酶生物学特性的影响

目的汉防己甲素衍生物是一类双苄基异喹啉类化合物,具有明显的抗肿瘤活性。研究汉防己甲素衍生物HL-49对Bloom DNA解旋酶(bloom DNA helicase,BLM)构象和生物学活性的影响对于探索其抗肿瘤作用机制具有重要意义。方法采用紫外光谱扫描研究药物HL-49对BLM DNA解旋酶构象的影响,荧光偏振技术和孔雀绿-磷钼酸铵比色法分析HL-49对BLM解旋酶的DNA结合活性、DNA解链活性、ATPase活性。结果紫外光谱扫描结果显示,HL-49对BLM DNA解旋酶的三维构象影响不明显。荧光偏振法结果显示,HL-49对BLM解旋酶的DNA(dsDNA/ssDNA)结合活性的影响不明显,但随浓度的增加,与DNA相互结合的能力越强(P<0.01)。随着HL-49浓度的增加,BLM DNA解旋酶的DNA解链能力下降,K_(obs)值逐渐降低。孔雀绿-磷钼酸铵比色结果说明,随着HL-49浓度的增加或作用时间延长,HL-49能明显抑制BLM DNA解旋酶的ATPase活性。结论汉防己甲素衍生物HL-49通过与DNA的可逆性结合,抑制BLM DNA解旋酶的ATPase活性和DNA解链活性。

Bloom解旋酶基因RNA干扰载体对前列腺癌PC3细胞的抑制作用

目的采用RNA干扰(RNAi)技术抑制前列腺癌PC3细胞系中Bloom解旋酶基因的表达,探讨Bloom解旋酶基因表达下调后对PC3细胞的抑制作用。方法使用实验室前期成功构建的两条针对于Bloom解旋酶基因的RNAi载体shRNA-1和shRNA-2转染前列腺癌PC3细胞,以未转染RNAi载体为对照组,分别在转染24、48、72h后通过MTT法检测细胞增殖情况,转染48h后通过Transwell小室法检验细胞侵袭、迁移能力,细胞划痕实验检测细胞迁移情况,Hoechst/PI双染法检测细胞凋亡情况。结果转染RNAi载体后,与未转染对照组相比,各实验时间点的转染组细胞增殖率降低(P<0.05),Transwell细胞侵袭和迁移实验中穿过室膜的细胞数与对照组比均减少(侵袭:119±24、118±30vs 227±38;迁移:122±13、121±47vs 277±32,P<0.05),划痕愈合率与划痕迁移距离均降低,48h时差异有统计学意义(P<0.05),而且细胞凋亡明显增加。结论以RNAi载体干扰Bloom解旋酶基因的表达可抑制前列腺癌PC3细胞的增殖、迁移和侵袭能力并促进其凋亡,为前列腺癌的靶向基因治疗提供了依据。