Chemical profiling and rapid discrimination of Blumea riparia and Blumea megacephala by UPLC-Q-Exactive-MS/MS and HPLC

Objective:To rapidly identify the two morphologies and chemical properties of similar herbal medicines,Blumea riparia and B.megacephala as the basis for chemical constituent analysis.Methods:UPLC-Q-Exactive-MS/MS was utilized for profiling and identification of the constituents in B.riparia and B.megacephala.Chemical pattern recognition(CPR)was further used to compare and distinguish the two herbs and to identify their potential characteristic markers.Then,an HPLC method was established for quality evaluation.Results:A total of 93 constituents are identified,including 54 phenolic acids,35 flavonoids,two saccharides,one phenolic acid glycoside,and one other constituent,of which 67 were identified in B.riparia and B.megacephala for the first time.CPR indicates that B.riparia and B.megacephala samples can be distinguished from each other based on the LC–MS data.The isochlorogenic acid A to cryptochlorogenic acid peak area ratio calculated from the HPLC chromatograms was proposed as a differentiation index for distinguishing and quality control of B.riparia and B.megacephala.Conclusion:This study demonstrates significant differences between B.riparia and B.megacephala in terms of chemical composition.The results provide a rapid and simple strategy for the comparison and evaluation of the quality of B.riparia and B.megacephala.

滇桂艾纳香茎和叶中挥发性化学成分的HS-SPME-GC-MS分析

采用固相微萃取法提取中草药滇桂艾纳香茎和叶中挥发性成分,经气相色谱/质谱测定其化学成分和相对含量,共鉴定了98种化学成分,茎和叶中各82种。主要挥发成分及含量为:大叶香烯D(茎:36.59%;叶:40.87%)、香木兰烯(茎:13.20%;叶:17.00%)、顺-α-没药烯(茎:6.06%;叶:7.48%)、β-荜澄茄油烯(茎:4.83%;叶:5.85%)、γ-依兰油烯(茎:2.18%;叶:2.58%)和1,2,4 a,5,6,8 a-六氢-4,7-二甲基-1-(1-甲乙基)-萘(茎:2.03%;叶:2.55%),它们都为倍半萜类化合物。本实验中发现滇桂艾纳香茎和叶的中倍半萜类化合物含量分别占挥发性成分含量的91.75%和94.52%。

反相高效液相色谱法测定滇桂艾纳香中绿原酸的含量

目的用反相高效液相色谱法建立滇桂艾纳香中绿原酸的含量测定方法。方法Kromasil C18（4．6mm×150mm，5μm）色谱柱，流动相为0．2％磷酸-乙腈（93：7），检测波长326nm，流速1．0ml／min。结果在该色谱条件下，绿原酸在15．3—61．2mg/L范围内与其峰面积呈良好的线性关系，相关系数为0．9992。样品平均回收率为100．5％，RSD为1．2％（n=6）。结论方法简便易行，结果准确，重复性好，可用于滇桂艾纳香中绿原酸含量的测定。

滇桂艾纳香研究进展

全面概述了滇桂艾纳香生药学、化学成分、药理与临床应用方面的研究。为滇桂艾纳香的进一步开发与研究提供了科学依据。

运用响应面设计优化微波提取滇桂艾纳香总黄酮工艺的研究

通过响应面Box-Behnken设计分析法,以黄酮含量为考察指标,运用微波提取滇桂艾纳香总黄酮成分,数据通过SAS软件分析处理,得出了总黄酮含量与因素的内在关系,最佳条件为乙醇体积分数:42%,固液比:1:20,温度:60℃,提取次数为3次,提取时间:7min,通过验证实验,结果与计算机回归预测值相当,且略高。

滇桂艾纳香化学成分的分离与鉴定

目的分离鉴定中药滇桂艾纳香的化学成分。方法利用硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶（SephadexLH-20）柱色谱及HPLC等方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果得到10个化合物,分别鉴定为：原儿茶醛（1）、原儿茶酸（2）、对羟基苯甲醛（3）、β-谷甾醇（4）、豆甾醇（5）、山柰酚（6）、3,5,3′-三羟基-7,4′-二甲氧基黄酮（7）、3,5,3′,4′-四羟基-7-甲氧基黄酮（8）、槲皮素（9）、5-羟基-3,7,3′,4′-四甲氧基黄酮（10）。结论化合物3~10为首次从该植物中分离得到。

滇桂艾纳香化学成分的分离与鉴定(Ⅱ)

目的分离鉴定中药滇桂艾纳香的化学成分。方法利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱等方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果分离得到10个化合物,分别鉴定为：环（亮-脯）二肽（1）（、24S）豆甾-4-烯-3-酮（2）（、24S）豆甾-4-22-二烯-3-酮（3）、二氢槲皮素-4′-甲醚（4）、丁香酸（5）、没食子酸（6）、香草酸（7）、呋喃甲酸（8）、水杨酸（9）、咖啡酸（10）。结论化合物1~10均为首次从该植物中分离得到。

滇桂艾纳香水溶性多糖BRP-B的分离纯化及止血活性

用蒸馏水溶解滇桂艾纳香浸膏,从中提取多糖,通过膜分离、三氯乙酸法脱蛋白、二乙氨基乙基(DEAE)纤维素脱色、SephadexG10、SephadexG50凝胶柱色谱纯化,获得滇桂艾纳香水溶性多糖(BRP-B)。由凝胶渗透色谱(HPGPC)确定BRP-B为相对分子质量分布均一的多糖,其数均分子量和质均分子量分别为2654和2716Da。以血浆复钙时间(PRT)为指标,研究BRP-B的凝血活性,结果显示BRP-B质量浓度为6.25×10-2g/L时,凝血时间为248.52s,凝血时间抑制率达22.42%。小白鼠离体子宫实验结果显示,BRP-B质量浓度为1.67×10-2、1.97×10-2及2.85×10-2g/L时能明显增加子宫平滑肌的收缩频率。

滇桂艾纳香对动物离体及在体子宫平滑肌作用的影响

目的观察滇桂艾纳香对小鼠离体子宫平滑肌、大鼠在体子宫平滑肌运动的影响。方法运用BL-420生物信号系统记录子宫平滑肌的活动,观察不同剂量滇桂艾纳香水提液及含药血清对子宫平滑肌的影响。结果滇桂艾纳香水提液、含药血清均可显著提高小鼠离体子宫的收缩频率(P<0.05),且水提液能提高在体子宫的收缩强度(P<0.05)及收缩频率(P<0.05)。结论滇桂艾纳香可增强离、在体子宫平滑肌的收缩频率及收缩力。

滇桂艾纳香不同提取物急性毒性研究

目的:观察滇桂艾纳香药材用不同溶剂提取的浸膏灌胃给予小鼠后产生的急性毒性反应和死亡情况。方法:预实验发现50%、70%乙醇提取物毒性不明显,无法测定半数致死量(LD50),需改作最大耐受量(MTD)试验,并且初步确定水提取物半数致死量(LD50)试验用药剂量,正式实验采用小鼠灌胃给药的方法测定水提取物半数致死量(LD50)和50%、70%乙醇提取物最大耐受量(MTD)。结果:滇桂艾纳香水提取物的LD50为143.1034g生药/kg,50%、70%乙醇提取物MTD分别259.60g生药/kg、309.68g生药/kg。结论:滇桂艾纳香毒性较小,临床用药安全,且水提取物毒性大于醇提取物。

滇桂艾纳香化学成分预试研究

[目的]初步考察滇桂艾纳香的化学成分。[方法]采用化学反应鉴别方法对滇桂艾纳香的水提液、乙醇提取液、石油醚提取液进行鉴别。[结果]检查项目中多肽、还原糖、多糖、苷类、皂苷、鞣质、有机酸、黄酮类、酚类、香豆素、内酯、挥发油等项均出现正反应现象,其余项出现负反应现象。[结论]滇桂艾纳香中可能含有多肽、还原糖、多糖、苷类、皂苷、鞣质、有机酸、黄酮类、酚类、香豆素、内酯、挥发油等多种化学成分,为滇桂艾纳香的进一步开发利用提供实验基础。

滇桂艾纳香滴丸制备工艺研究

目的优选滇桂艾纳香滴丸的制备工艺。方法以基质种类、药物与基质配比、滴制温度、滴距、滴速、冷却温度、冷凝剂种类为考察因素，以丸重变异系数、溶散时限、外观质量的综合评分为评价指标，采用单因素试验优选滴丸的处方和成型工艺。结果滴丸制备的最佳条件为：基质为聚乙二醇4000与聚乙二醇6000（1：1），药物与基质的配比1：2，滴制温度为80℃，滴速为221125滴／min，滴距为10cm，冷凝温度为10—15℃，冷凝液为二甲基硅油。结论该工艺制得的滴丸丸重差异小、溶散时间短、外观质量好。

滇桂艾纳香紫外-可见光谱鉴别的研究

[目的]为滇桂艾纳香的鉴别研究提供科学依据。[方法]采用紫外-可见光谱法对滇桂艾纳香进行鉴别研究。[结果]滇桂艾纳香紫外-可见吸收光谱图在300 nm和330 nm处的吸收峰较强,且波动范围不大,可作为其光谱鉴别特征。[结论]紫外-可见光谱法可为滇桂艾纳香的鉴别方法提供辅助手段。

滇桂艾纳香红外光谱鉴别

目的:建立滇桂艾纳香的红外光谱鉴定方法。方法:对10批不同产地的滇桂艾纳香进行红外光谱鉴别,建立参照图谱,并进行匹配度计算。结果:获得了10批不同产地滇桂艾纳香的红外光谱,匹配度均大于0.9。结论:建立的方法具有较好的稳定性和可控性,可用于滇桂艾纳香的鉴别。

滇桂艾纳香正丁醇部位HPLC指纹图谱建立及6种成分测定

目的建立滇桂艾纳香正丁醇部位HPLC指纹图谱,并测定原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C含量。方法分析采用ZORBAX SB-C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.2%磷酸,梯度洗脱,建立HPLC指纹图谱,采用2012年版《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》软件进行相似度评价,SPSS 23.0软件进行聚类分析及主成分数据分析,同时测定6种成分含量。结果 12批滇桂艾纳香有12个共有峰,各批次药材相似度均大于0.9。聚类分析结果显示12批滇桂艾纳香药材可分为2类,主成分分析表明,前2个成分的累计方差贡献率为96.689%。6种成分在其各自的范围内线性关系良好(r≥0.999 0),精密度、重复性、稳定性的RSD值均小于3%,加样回收率平均值为97.1%~102.7%,RSD为1.81%~2.82%。结论该方法稳定准确,可为滇桂艾纳香正丁醇活性部位质量评价提供参考依据。

滇桂艾纳香滴丸促进大鼠排卵作用机制初步研究

目的通过观察滇桂艾纳香滴丸对诱发排卵大鼠卵巢血管内皮生长因子(VEGF)的影响,探讨其促进卵泡发育成熟和排卵的作用机制。方法通过观察卵巢内微环境卵泡发育调节因子VEGF的阳性表达,初步研究滇桂艾纳香滴丸促排卵药效。结果结果显示,滇桂艾纳香滴丸组VEGF的阳性面积、平均光密度、阳性面积率、积分光密度在卵泡发育期和排卵前期均高于模型组,高剂量组的作用高于中、低剂量组,均有显著性差异。各组排卵前期的上述指标均明显高于各组的相应卵泡发育期。结论滇桂艾纳香滴丸能提高大鼠卵巢VEGF的表达,可能是其促进排卵的作用机制。

基于多元统计分析和多指标评价假东风草和东风草的质量

目的基于多元统计分析和多指标评价假东风草和东风草药材的质量。方法采用2020年版《中国药典》方法测定水分、灰分、浸出物,紫外-可见光光度法测定总黄酮含量,HPLC法测定3,4-二咖啡酰奎宁酸和3,5-二咖啡酰奎宁酸的含量,聚类分析和主成分分析进行数据处理。结果9批假东风草和东风草(大花种,非标品种)水分平均值分别为9.21%、8.00%,总灰分平均值分别为6.50%、8.90%,酸不溶性灰分平均值分别为0.87%、1.21%,浸出物平均值分别为22.21%、13.56%,总黄酮平均质量分数分别为126.16、82.65 mg/g,3,4-二咖啡酰奎宁酸平均质量分数分别为7.80、3.52 mg/g,3,5-二咖啡酰奎宁酸平均质量分数分别为4.18、4.43 mg/g。以水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物、总黄酮含量、3,4-二咖啡酰奎宁酸和3,5-二咖啡酰奎宁酸含量为指标时,不能将假东风草和东风草(大花种,非标品种)明显区分开。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于假东风草和东风草的质量控制。

基于多种分析模式构建壮药滇桂艾纳香HPLC指纹图谱

目的:建立滇桂艾纳香药材HPLC指纹图谱分析方法。方法:采用HPLC法,色谱柱为Inertsil ODS-3柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液,梯度洗脱;流速1.0 m L/min;柱温25℃;检测波长280nm。建立滇桂艾纳香指纹图谱,并对其进行相似度评价、聚类分析和主成分分析。结果:建立了10批滇桂艾纳香药材的指纹图谱共有模式,标定了15个共有峰,指认了原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸和芦丁4个指标性成分。10批药材相似度均>0.9;聚类分析结果将药材聚为3类,主成分分析筛选出影响药材质量的5个主要组分。结论:所建立的指纹图谱及其分析模式稳定可靠,可为滇桂艾纳香的质量控制提供参考。

基于BP人工神经网络分析滇桂艾纳香止血作用谱效关系

目的基于BP人工神经网络分析滇桂艾纳香止血作用的谱效关系。方法以20批不同产地的滇桂艾纳香为研究对象,建立滇桂艾纳香HPLC指纹图谱;采用华法林化模型大鼠,测定给药后各组凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)水平。采用灰色关联度法,筛选对止血作用密切相关的色谱峰;利用B人工神经网络技术,将化学信息与药效指标数据相关联,建立谱效关系数学模型。结果 20批样品指纹图谱中13个共有峰与药效指标的相关系数均大于0.740,均与药效具有较密切的相关性,以此为基础建立了谱效关系模型。运用神经网络模型预测综合药效值,相对误差的绝对值均小于或等于13.60%,大部分数值的相对误差小于6.7%,模型预测具有较高的精度,性能良好。结论该谱效关系模型及综合评价体系更加合理,可用于滇桂艾纳香质量标准的完善。