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禽蛋大小头自动定向排列中轴向运动机理研究 被引量:12
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作者 姜松 姜奕奕 +3 位作者 孙柯 陈章耀 徐斌 王国江 《农业机械学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第10期209-215,共7页
为了探讨禽蛋大小头自动定向排列关键技术的设计计算方法,对禽蛋在输送支撑辊子上的轴向运动进行了动力学和运动规律分析及机理研究,并进行了试验验证。研究表明,禽蛋在输送支撑辊子上的轴向运动符合交错轴摩擦轮传动原理,构建了禽蛋在... 为了探讨禽蛋大小头自动定向排列关键技术的设计计算方法,对禽蛋在输送支撑辊子上的轴向运动进行了动力学和运动规律分析及机理研究,并进行了试验验证。研究表明,禽蛋在输送支撑辊子上的轴向运动符合交错轴摩擦轮传动原理,构建了禽蛋在输送支撑辊子上轴向运动位移的理论计算方法和禽蛋与支撑辊子之间的传动关系模型,建立了禽蛋轴向运动参数测试方法和实际计算方法,洋鸡蛋在输送支撑辊子上的轴向运动实际位移的变化规律与理论计算结果吻合,修正系数为0.55(直径30 mm、中心距57 mm、输送速度57 mm/s)。用交错轴摩擦轮传动原理分析禽蛋在输送支撑辊子上的轴向运动是正确、可行的,为禽蛋大小头自动定向排列装置的设计计算奠定了理论基础。 展开更多
关键词 禽蛋 轴向运动 机理 大小头 自动定向
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禽蛋大小头自动定向排列中翻转运动机理研究 被引量:7
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作者 姜松 孙柯 +3 位作者 杨德勇 陈章耀 徐斌 王国江 《农业机械学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第3期215-222,共8页
为了探讨禽蛋大小头自动定向排列关键技术的设计计算方法,对禽蛋在输送辊上的翻转运动进行了机理研究,并进行了不同输送辊直径、输送辊间中心距、不同品种禽蛋的试验验证。研究表明,禽蛋在输送辊上的翻转运动符合凸轮传动原理,构建... 为了探讨禽蛋大小头自动定向排列关键技术的设计计算方法,对禽蛋在输送辊上的翻转运动进行了机理研究,并进行了不同输送辊直径、输送辊间中心距、不同品种禽蛋的试验验证。研究表明,禽蛋在输送辊上的翻转运动符合凸轮传动原理,构建了禽蛋与输送辊和导向杆之间的传动关系模型,建立了禽蛋翻滚距离和导向杆作用距离的理论计算方法,以及处理通道宽度和导向杆弯曲段长度的设计计算方法,禽蛋翻滚距离和导向杆作用距离理论计算结果与试验值吻合,禽蛋翻滚距离和导向杆作用距离与输送辊中心距呈线性负相关关系,与输送辊直径呈线性正相关关系,决定系数都大于0.94。用凸轮传动原理分析禽蛋在输送辊上的翻转运动是正确的、可行的。 展开更多
关键词 禽蛋 翻转运动 机理 大小头 自动定向
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提高平末端连接效率的研究 被引量:2
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作者 张伟 艾秀莲 +4 位作者 王玮 王志方 崔春生 李晨华 谢玉清 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2002年第5期300-301,共2页
在平末端连接反应中 ,为了提高连接效率 ,研究载体与片段的分子量比、载体与片段的摩尔比、连接反应体积、连接反应的温度、连接反应时间长短等条件对连接效率的影响 ,发现这些因素都会直接影响连接效率。因此在做不同的平末端连接反应... 在平末端连接反应中 ,为了提高连接效率 ,研究载体与片段的分子量比、载体与片段的摩尔比、连接反应体积、连接反应的温度、连接反应时间长短等条件对连接效率的影响 ,发现这些因素都会直接影响连接效率。因此在做不同的平末端连接反应时 ,应该把上述因素协同起来考虑。此外 。 展开更多
关键词 平末端连接 普适性 连接效率 DNA片断
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提高PCR产物及其克隆效率的几点方法与经验 被引量:6
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作者 王志斌 郭三堆 《生物技术通报》 CAS CSCD 1999年第4期30-32,共3页
本文介绍了提高PCR产物及其克隆效率的方法与经验:如,引物的设计、目的片段的回收、连接体系、利用引物上所设计的酶切位点克隆、通过平末端克隆,以及加快实验进程的技巧、出现问题如何设计查找原因等。
关键词 PCR产物 克隆效率 平末端连接 亚克隆
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电转化法提高平连载体DNA转化效率的研究 被引量:6
5
作者 方勤 田静 《生物技术》 CAS CSCD 1999年第4期5-8,共4页
探讨了电转化过程中一些影响平连载体DNA转化效率的因素,并与化学法进行了比较,由此建立了优化的电转化条件。结果显示,在OD600值0.72-0.78收获细胞时,可使平连载体DNA的转化效率达到5×106转化子/μ... 探讨了电转化过程中一些影响平连载体DNA转化效率的因素,并与化学法进行了比较,由此建立了优化的电转化条件。结果显示,在OD600值0.72-0.78收获细胞时,可使平连载体DNA的转化效率达到5×106转化子/μgcD-NA,较化学法高102-103倍。同时,降低连接产物的盐浓度。 展开更多
关键词 电转化法 感受态细胞 平连载体DNA 转化效率
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一种新型的基因定点突变方法及其在DdsA突变研究中的应用 被引量:2
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作者 刘欣毅 张惠展 袁勤生 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期415-418,共4页
为了发展基因突变技术,介绍一种新型的基因定点突变方法.该方法巧妙利用了基因序列中广泛存在的不完整的平端酶切位点.与传统方法相比,可以迅速地在全基因的任何部位替换核苷酸,并可以在突变实验过程中直接将目的基因克隆到T载体上,便... 为了发展基因突变技术,介绍一种新型的基因定点突变方法.该方法巧妙利用了基因序列中广泛存在的不完整的平端酶切位点.与传统方法相比,可以迅速地在全基因的任何部位替换核苷酸,并可以在突变实验过程中直接将目的基因克隆到T载体上,便于测序及进一步克隆.利用该方法成功地获得了DdsA(decaprenyl diphosphate synthase,十聚异戊二烯焦磷酸合成酶)在4个氨基酸位点上的19个变体酶.这些位点分布在基因的不同区域内.证明这种新方法的高效性. 展开更多
关键词 基因突变 平端酶切位点 定点突变 DdsA变体
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DNA分子体外重组实验教学的两种优选方案 被引量:1
7
作者 谢云飞 解博红 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2012年第4期101-104,共4页
DNA分子体外重组技术是基因工程的核心技术之一。国内许多高校在开设这一技术的实验教学中都采用了TA克隆法这一比较落后的实验方法。为了使学生更好地掌握DNA分子体外重组技术,增强技术的实用性,有必要在实验教学内容上作出调整。姊妹... DNA分子体外重组技术是基因工程的核心技术之一。国内许多高校在开设这一技术的实验教学中都采用了TA克隆法这一比较落后的实验方法。为了使学生更好地掌握DNA分子体外重组技术,增强技术的实用性,有必要在实验教学内容上作出调整。姊妹PCR克隆法和平末端克隆法是2种简单、经济、重复性好的克隆方法,其中姊妹PCR克隆法不需对目的基因进行酶切处理,即能得到具有各种黏性末端的DNA分子,可直接定向克隆到经相应内切酶消化的载体中。这2种方法不仅能够满足实验教学的需要,也适用于科研工作中各类载体的构建。 展开更多
关键词 体外DNA重组 姊妹PCR克隆法 黏性末端 平末端克隆法
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平末端DNA随机连接构建重组质粒
8
作者 查向东 刘杨 +3 位作者 吴敌 卢颖虎 梁琳 陈青峰 《生物技术通讯》 CAS 2012年第1期109-111,共3页
目的:拼接DNA片段并克隆。方法:用T4DNA连接酶将DNA片段以平末端随机连接,随后用限制性内切酶切割,琼脂糖电泳分离酶切产物,挑选特定片段纯化回收,与线性化的载体质粒连接,转化大肠杆菌感受态细胞。结果:通过以上步骤,成功拼接了不同DN... 目的:拼接DNA片段并克隆。方法:用T4DNA连接酶将DNA片段以平末端随机连接,随后用限制性内切酶切割,琼脂糖电泳分离酶切产物,挑选特定片段纯化回收,与线性化的载体质粒连接,转化大肠杆菌感受态细胞。结果:通过以上步骤,成功拼接了不同DNA片段,构建了含有目的拼接片段的重组质粒。结论:该方法简便、易行、可靠,可作为拼接、克隆DNA的备选方案,在分子生物学研究和基因工程中应用。 展开更多
关键词 平末端DNA 随机连接 DNA拼接 基因克隆
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两步法进行粘端—平端连接 被引量:2
9
作者 盛德乔 《湖北三峡学院学报》 2000年第5期77-78,85,共3页
优化DNA重组的反应条件 ,将粘端一平端连接分两步进行 。
关键词 DNA重组 粘端 平端 连接 筛选
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管芯钝头引导气管插管在意外困难气道中的应用
10
作者 刘涛 李明强 《医学综述》 2016年第1期178-180,共3页
目的观察管芯钝头引导气管插管在意外困难气道中的应用效果。方法选择2012年10月至2014年12月襄阳市中心医院麻醉科收治的意外困难气道患者48例,依据随机数字表法分为观察组和对照组,各24例。对照组气管导管前端采用普通管芯塑形成传统... 目的观察管芯钝头引导气管插管在意外困难气道中的应用效果。方法选择2012年10月至2014年12月襄阳市中心医院麻醉科收治的意外困难气道患者48例,依据随机数字表法分为观察组和对照组,各24例。对照组气管导管前端采用普通管芯塑形成传统鱼钩状(J形);观察组管芯前端3 cm处折叠成钝头,充分润滑后伸出导管斜口1-2 cm,塑形成小鱼钩状。记录两组患者插管成功例数、插管所用时间以及监测记录诱导前(T0)、诱导后(T1)和插管成功后即刻(T2)3个时点的收缩压、舒张压和心率以及术后呼吸道损伤并发症(如损伤出血、咽喉疼痛、声音嘶哑)。结果观察组插管一次成功率高于对照组[87.5%(21/24)比58.3%(14/24)],普通喉镜插管用时短于对照组[(19±5)s比(31±7)s],差异均有统计学意义(P〈0.05)。两组患者收缩压、舒张压和心率在T1显著降低,又在T2显著上升,两组不同时点间间比较差异有统计学意义(P〈0.05)。对照组呼吸道损伤发生率为16.7%(4/24),观察组为8.3%(2/24),两组呼吸道损伤发生率比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论管芯钝头引导气管插管能明显提高意外困难气道插管成功率并缩短插管时间,且无不良心血管反应和明显呼吸道损伤并发症。 展开更多
关键词 意外困难气道 钝头 盲探气管插管
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用平截末端使大豆根瘤菌苹果酸脱氨酶基因插入失活及电激法转化
11
作者 汪清胤 黄永芬 《生物技术》 CAS CSCD 1994年第3期6-9,共4页
本实验用平截末端连接法把卡那霉素抗性基因插入到大豆根瘤菌(Brahyrh;zobiumjaponicum)110的苹果酸脱氢酶(mdh)基因中,致使mdh基因失活,再通过电激法把这一重组基因转入大豆根瘤菌(Brahy... 本实验用平截末端连接法把卡那霉素抗性基因插入到大豆根瘤菌(Brahyrh;zobiumjaponicum)110的苹果酸脱氢酶(mdh)基因中,致使mdh基因失活,再通过电激法把这一重组基因转入大豆根瘤菌(Brahyrhizobiumjaponicum)2143中,进而探讨mdh基因失活对大豆固氮作用的影响。 展开更多
关键词 大豆 根瘤菌 苹果酸脱氢酶 基因
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胞液型磷脂酶A_2cDNA与载体PRCCMV连接及表达
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作者 刘华欣 傅桂莲 杜培革 《第四军医大学吉林军医学院学报》 2001年第4期187-189,共3页
目的 选择适当的表达载体 ,启动胞液型磷脂酶A2 (cytosolicphospholipaseA2 ,简称cPLA2 )cDNA的表达 ,为进一步研究各种因素对该酶活性的影响奠定基础。方法 从cPLA2 PMT2 重组体中获得人cPLA2cDNA片段 ,使之与酶切线性化的PRC CMV... 目的 选择适当的表达载体 ,启动胞液型磷脂酶A2 (cytosolicphospholipaseA2 ,简称cPLA2 )cDNA的表达 ,为进一步研究各种因素对该酶活性的影响奠定基础。方法 从cPLA2 PMT2 重组体中获得人cPLA2cDNA片段 ,使之与酶切线性化的PRC CMV载体平末端连接 ,并转染鼠巨噬细胞 ,筛选、扩增阳性细胞 ,提取RNA ,Northern杂交法检测cPLA2 mRNA。结果 应用cPLA2 PRC CMV重组体转染鼠巨噬细胞后 ,经过North ern杂交检测到cPLA2 cDNA的表达。结论 cPLA2 PRC CMV是一有效的表达系统。 展开更多
关键词 胞液型 磷脂酶A2 平末端连接 表达
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利用高保真酶扩增特性调整基因读码框的方法
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作者 张国广 陈亮 +1 位作者 吴亦亮 曾雅明 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第3期54-57,共4页
在基因工程研究中,经常要涉及到对目的基因读码框进行调整的研究。本文报道了利用高保真DNA聚合酶扩增DNA后产生平末端的特性,及限制性内切酶对一重组的原核表达载体pET28a-HA进行读码框调整的研究,测序结果显示读码框按照预期设计正确... 在基因工程研究中,经常要涉及到对目的基因读码框进行调整的研究。本文报道了利用高保真DNA聚合酶扩增DNA后产生平末端的特性,及限制性内切酶对一重组的原核表达载体pET28a-HA进行读码框调整的研究,测序结果显示读码框按照预期设计正确调整,表明高保真DNA聚合酶可以用于DNA 3'凹陷端的补平,在DNA 3'凹陷端平滑化时多了一个有效的选择。 展开更多
关键词 高保真DNA聚合酶 DNA粘端补平 基因读码框调整
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Rotating Translating Cones
14
作者 Kern E. Kenyon 《Natural Science》 2021年第4期133-135,共3页
A first attempt has been made to confirm experimentally a theoretical concept, recently published, involving a rigid cone rotating about its long axis under still water: it should tend to translate along that axis blu... A first attempt has been made to confirm experimentally a theoretical concept, recently published, involving a rigid cone rotating about its long axis under still water: it should tend to translate along that axis blunt end leading and apex trailing. Two identical hollow cones, neutrally buoyant, with equal weights attached to the apexes, were released simultaneously at the surface of a swimming pool. One cone had a thin light weight spiral vane vertically attached to the cone’s outside surface in order to cause it to rotate as it sank. Several trial runs were made in the shallow and deep ends of the pool, and in every case, the non-rotating cone without a vane hit the bottom of the pool first. These comparisons qualitatively and indirectly validate the prediction. 展开更多
关键词 Rotating Cones Translate in Fluids blunt end First
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T4 DNA连接酶性质及其平端连接功能 被引量:3
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作者 贺添艳 刘亚娟 +2 位作者 徐文选 刘猛 刘亮伟 《河南科学》 2016年第7期1058-1062,共5页
T4 DNA连接酶(T4Lig)在基因工程中有重要作用,科研人员对该工具酶性质了解不全面易导致平端DNA连接效率很低、甚至失败.所以对T4Lig性质功能的全面认识有助于基因重组,特别是平端DNA连接中的应用.为了提高平端DNA连接效率,以及进一步阐... T4 DNA连接酶(T4Lig)在基因工程中有重要作用,科研人员对该工具酶性质了解不全面易导致平端DNA连接效率很低、甚至失败.所以对T4Lig性质功能的全面认识有助于基因重组,特别是平端DNA连接中的应用.为了提高平端DNA连接效率,以及进一步阐明平端连接机理,本文综述了T4Lig酶分子大小、保真性、切口DNA连接机理、平端DNA连接端口检测、酶分子性质理性改造等研究进展,并对平端连接中有待解决的几个问题进行了展望. 展开更多
关键词 T4 DNA连接酶 性质 功能 平端连接
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一种平末端连接的有效方法 被引量:5
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作者 沈瑞忠 袁世山 +3 位作者 刘桂永 王秀丽 于康震 卢景良 《生物技术》 CAS CSCD 1995年第3期37-39,共3页
转化效率与质粒大小成反比,而当质粒大于15kb时,转化效率将成为限制因素,此时提高连接效率极为必要,特别是对于具有普遍性而效率又低的平末端连接。我们在连接反应体系中,加入相应的产生平末端质粒载体的限制性内切酶HPaI... 转化效率与质粒大小成反比,而当质粒大于15kb时,转化效率将成为限制因素,此时提高连接效率极为必要,特别是对于具有普遍性而效率又低的平末端连接。我们在连接反应体系中,加入相应的产生平末端质粒载体的限制性内切酶HPaI、或EcoRV,与不加HPaI、或EcoRV的连接反应相对照,连接产物转化大肠杆菌JM109后,产生的转化子比率分别为19.9%和5.6%(PFP7),32.6%和9.7%(pFB175),24.3%和3.6%(pFH12),37.9%和10.3%(pFP26),且从转化株中分离的质#DNA经电泳、酶切鉴定为目的产物。HpaI、或EcoRV的存在极有利于插入片段连接到载体上,同时抑制载体自身环化或寡聚化,大大提高了平末端连接效率。 展开更多
关键词 平末端连接 连接效率 转化效率 生物技术
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钝头缝针引线支撑泪小管断裂吻合术 被引量:1
17
作者 王野平 陈蒙 臧企 《国际眼科杂志》 CAS 2009年第9期1818-1819,共2页
目的:探讨泪小管断裂吻合术是一种简便易行有效的方法。方法:24例24眼泪小管断裂患者,用钝头缝针经泪小点-泪小管-泪囊-皮肤引线支撑泪小管断裂吻合术。结果:24例24眼手术全部一次吻合成功,术后随访2mo~2a,无明显并发症,冲洗泪道通畅,... 目的:探讨泪小管断裂吻合术是一种简便易行有效的方法。方法:24例24眼泪小管断裂患者,用钝头缝针经泪小点-泪小管-泪囊-皮肤引线支撑泪小管断裂吻合术。结果:24例24眼手术全部一次吻合成功,术后随访2mo~2a,无明显并发症,冲洗泪道通畅,无流泪等后遗症。结论:钝头缝针引线支撑泪小管断裂吻合术,方法简便易行、疗效满意,可避免鼻泪管黏膜损伤等常见并发症。 展开更多
关键词 泪小管断裂 吻合术 钝头缝针引线支撑
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钝体关键参数对煤粉燃烧效率和NO排放量的影响
18
作者 蒋新春 胡志勇 +2 位作者 程海鹰 贾方强 吴树辉 《内蒙古工业大学学报(自然科学版)》 2020年第2期104-111,共8页
钝体可以改变煤粉气流的流动状态,加速二次风和煤粉气流在燃烧室内部的混合,改善煤粉燃烧环境.提高煤粉燃烧效率,降低污染物排放,本文基于Fluent软件平台,以CO/CO2比值作为煤粉燃烧效率的评价指标,以NO的质量分数作为主要污染物的评价指... 钝体可以改变煤粉气流的流动状态,加速二次风和煤粉气流在燃烧室内部的混合,改善煤粉燃烧环境.提高煤粉燃烧效率,降低污染物排放,本文基于Fluent软件平台,以CO/CO2比值作为煤粉燃烧效率的评价指标,以NO的质量分数作为主要污染物的评价指标,合理简化并构建煤粉热燃烧行为的控制模型,以煤粉燃烧器和烘干筒作为分析系统进行数值模拟,研究煤粉燃烧器钝体关键参数对燃烧性能的影响.结果表明,端径比和钝体锥角显著影响煤粉燃烧性能,随着端径比的增大,NO质量分数和CO/CO2比值先降低后升高;钝体锥角对NO、CO、CO2的质量分数均具有显著影响,但对燃烧性能的影响无明显规律性;当端径比为0.55,钝体锥角为50°时,NO的质量分数最小;当端径比0.55,钝体锥角55°时,CO/CO2比值最小.从煤粉燃烧器燃烧效率和NO排放量的角度综合考虑,适宜选用端径比0.55和钝体锥角55°. 展开更多
关键词 煤粉燃烧器 钝体锥角 端径比 燃烧效率 NO质量分数
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Selection Vector for Direct Cloning of Proof Reading Polymerase Chain Reaction Products Based on the Lethal <i>ccdB</i>Gene in <i>Escherichia coli </i>
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作者 Pascal Weibel Miriam Ender +2 位作者 Jerzy Madon Annelies S. Zinkernagel Reto A. Schuepbach 《Advances in Microbiology》 2013年第1期14-20,共7页
Introducing PCR products into plasmids vectors is key for molecular techniques. Ideally cloning vectors are easy to construct, modify and propagate, neither require advanced techniques nor special equipment or reagent... Introducing PCR products into plasmids vectors is key for molecular techniques. Ideally cloning vectors are easy to construct, modify and propagate, neither require advanced techniques nor special equipment or reagents and efficiently incorporate PCR products at close to zero empty vector background. We provide an easy to engineer self-made cloning vector, neither requiring sophisticated tools or techniques nor advanced cloning knowledge. Through recombination we obtained the pUC18ccdB vector, carrying the ccdB suicide gene within the pUC18 backbone. When SmaI cleaved (within the ccdB) vector was T4 ligated with small (0.2 kbp) and intermediate (1.3 to 2.2 kbp) blunt end PCR-products and transformed into E. coli, the amount of clones with incorporated PCR product was comparable to commercial PCR-cloning kits and at a close to zero PCR product negative background. In conclusion we present a simple, versatile and cheap approach to an efficient “home made” PCR-cloning vector that allows integration of crude blunt end PCR products at close to zero background. 展开更多
关键词 PCR-Cloning VECTOR blunt end ccdB Toxic GENE
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牛油果大小头自动定向运动规律的试验研究 被引量:2
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作者 姜松 贾丹凤 +2 位作者 朱杰 杨德勇 管国强 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第12期170-179,共10页
为了解决牛油果大小头自动定向问题,方便牛油果采后分级加工包装,对牛油果定向运动进行单因素试验和正交试验,探讨牛油果大小头自动定向运动规律,分析牛油果定向装置最佳工作参数。试验结果表明,分列翻转式禽蛋大小头自动定向技术对牛... 为了解决牛油果大小头自动定向问题,方便牛油果采后分级加工包装,对牛油果定向运动进行单因素试验和正交试验,探讨牛油果大小头自动定向运动规律,分析牛油果定向装置最佳工作参数。试验结果表明,分列翻转式禽蛋大小头自动定向技术对牛油果定向是可行的。牛油果定向运动中的轴向运动规律符合交错轴摩擦轮机构的传动原理,翻转运动规律符合凸轮机构的传动原理。牛油果定向运动参数中水平偏转角与输送辊间距、转动线速度呈负相关,与输送辊直径呈正相关;轴向运动位移与输送辊间距呈负相关,与输送辊转动线速度呈正相关;翻滚距离、导向杆作用距离和侧偏角与输送辊间距呈负相关,与导向杆弯曲角度呈正相关,侧偏角与输送辊直径呈负相关,建立了牛油果轴向运动和翻转运动参数的理论计算方法。最佳装置工作参数为输送辊材质尼龙、输送辊直径40 mm、输送辊间距30 mm、输送辊转动线速度/输送速度70 mm/s、导向杆弯曲角度30°。为牛油果定向装置的设计和优化提供理论依据,为卵形体水果定向问题提供参考。 展开更多
关键词 牛油果 大小头 自动定向 轴向运动 翻转运动
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