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25份抗BmNPV家蚕育种素材对人工饲料育的适应性
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作者 刘敏 李继娅 +4 位作者 范永慧 廖鹏飞 杨海 李国灿 董占鹏 《中国蚕业》 2024年第1期10-14,共5页
为选育出对人工饲料育适应性优良的抗BmNPV家蚕品种,对云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所保存的25份抗BmNPV家蚕育种素材进行了人工饲料育适应性研究,调查分析了这些家蚕育种素材24 h疏毛率、2眠蚕体质量及3龄蚕存活率。结果表明:供试的2... 为选育出对人工饲料育适应性优良的抗BmNPV家蚕品种,对云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所保存的25份抗BmNPV家蚕育种素材进行了人工饲料育适应性研究,调查分析了这些家蚕育种素材24 h疏毛率、2眠蚕体质量及3龄蚕存活率。结果表明:供试的25份家蚕育种素材中,24 h疏毛率在90.10%~100%之间的有18份,在80.10%~90.00%之间的有5份;人工饲料育2眠蚕体质量多数低于桑叶育,但是其中有5份高于桑叶育,明8C高出桑叶育43.08%;3龄蚕存活率在90.10%~100%之间的有6份,在80.10%~90.00%之间的有13份,在60.10%~80.00%之间的有6份;24 h疏毛率在80.00%以上且与3龄蚕存活率差距在10个百分点以内的有11份,对该11份家蚕育种素材的24 h疏毛率和3龄蚕存活率相关性分析结果表明,它们的相关系数为0.634,呈显著相关。通过本试验,筛选出24 h疏毛率高和3龄蚕存活率高的家蚕育种素材,为选育出对人工饲料育具有良好适应性的抗BmNPV家蚕新品种打下基础。 展开更多
关键词 家蚕 bmnpv 育种素材 人工饲料 疏毛率 3龄蚕存活率
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家蚕热激蛋白Hsp25.4对BmNPV增殖的影响 被引量:1
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作者 唐芬芬 杨伟克 +4 位作者 张祖芸 何超 沈登荣 张睿 谢昆 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期3757-3762,共6页
【目的】探究家蚕热激蛋白(Hsp25.4)基因在家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nuclear polyhedrovirus,Bm NPV)侵染家蚕后的表达变化规律,明确敲低该基因表达后对BmNPV增殖复制的影响,为深入解析BmHsp25.4蛋白在BmNPV侵染家蚕过程中发挥... 【目的】探究家蚕热激蛋白(Hsp25.4)基因在家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nuclear polyhedrovirus,Bm NPV)侵染家蚕后的表达变化规律,明确敲低该基因表达后对BmNPV增殖复制的影响,为深入解析BmHsp25.4蛋白在BmNPV侵染家蚕过程中发挥的作用提供参考依据。【方法】以5龄家蚕幼虫为研究对象,经口添食10μL预先制备好的BmNPV-T3株病毒悬液(5×108个/mL),对照组添食等量灭菌水,采用实时荧光定量PCR检测BmHsp25.4基因在BmNPV侵染6 h各组织的表达情况,并选择相对表达量较高的3个组织,分析BmHsp25.4基因时空表达图谱;注射双链RNA(dsRNA)检测BmHsp25.4基因在体内的干涉效果,采用实时荧光定量PCR检测BmHsp25.4基因干涉后对BmNPV增殖复制的影响。【结果】BmNPV侵染家蚕6 h,BmHsp25.4基因在家蚕血液、中肠和脂肪体组织中的相对表达量升高;时空表达谱结果显示,BmHsp25.4基因在3个组织中的表达谱均呈先升高后降低的变化趋势,其中血液和中肠组织的相对表达量均在6h达峰值,而脂肪体则在BmNPV侵染12h时相对表达量达最高;注射dsRNA干涉后,试验组BmHsp25.4基因的相对表达量与对照组相比极显著降低61.81%(P<0.01,下同),说明BmHsp25.4基因的相对表达量被成功干涉;BmHsp25.4基因干涉后,感染24 h ds BmHsp25.4的gp41基因在各时期相对表达量极显著高于对照ds GFP处理,感染48 h二者差异显著(P<0.05)。【结论】BmNPV侵染能引起BmHsp25.4基因的表达,并且敲低BmHsp25.4基因的表达能提高BmNPV早期在虫体内的增殖,推测Hsp25.4蛋白在家蚕的抗病毒免疫中发挥关联功能。 展开更多
关键词 家蚕 家蚕核型多角体病毒(bmnpv) 热激蛋白 RNA干扰
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家蚕Tret1-X1基因对家蚕核型多角体病毒(BmNPV)的基因表达和基因组复制的影响
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作者 宋秋云 高娟 +3 位作者 邵露璐 张业顺 方瑷 张国政 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期244-253,共10页
家蚕促海藻糖转运蛋白1异构体X1(Bombyx mori facilitated trehalose transporter Tret1-like isoform X1,BmTret1-X1)主要参与家蚕糖代谢过程。为探究其在家蚕抗BmNPV感染过程中的作用,克隆BmNPV抗性家蚕品系AN与易感品系C108的BmTret1... 家蚕促海藻糖转运蛋白1异构体X1(Bombyx mori facilitated trehalose transporter Tret1-like isoform X1,BmTret1-X1)主要参与家蚕糖代谢过程。为探究其在家蚕抗BmNPV感染过程中的作用,克隆BmNPV抗性家蚕品系AN与易感品系C108的BmTret1-X1基因,发现基因编码区存在4个SNP导致的氨基酸改变,两者的预测蛋白质结构存在差异。利用pIZT/V5-His-mCherry表达载体在BmN细胞中过表达BmTret1-X1,BmNPV感染后24 h、48 h的BmNPV增殖受到抑制,BmNPV基因lef-3、vp39、p10和gp64的转录水平低于对照组(P<0.05),其中感染后24 h vp39基因的表达量与对照组相比差异达1 089倍,细胞中病毒基因组DNA复制也受到明显抑制。转染BmTret1-X1基因siRNA使BmN细胞中该基因表达量降低约一半,BmNPV的lef-3、vp39、p10和gp64转录水平升高,但BmNPV增殖和基因组DNA复制水平未见明显变化。综上所述,BmN细胞中BmTret1-X1基因的高表达对BmNPV的基因表达、DNA复制及病毒增殖具有抑制作用,该基因在家蚕对BmNPV的抗性形成过程中具有一定作用。 展开更多
关键词 家蚕 BmTret1-X1基因 bmnpv抗性 病毒复制 病毒基因表达
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BmNPV多角体蛋白基因编码区结合蛋白的鉴定
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作者 陈官平 孔祥硕 +1 位作者 赵书荻 吴小锋 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期51-57,共7页
家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)是一种具有较强传染性的病毒,在感染的极晚期超高水平表达一种约29 kD的碱溶性多角体蛋白。但该蛋白为病毒复制的非必需蛋白,因此,利用该基因可以被删除或被外源基因替换而... 家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)是一种具有较强传染性的病毒,在感染的极晚期超高水平表达一种约29 kD的碱溶性多角体蛋白。但该蛋白为病毒复制的非必需蛋白,因此,利用该基因可以被删除或被外源基因替换而不影响病毒的复制的原理构建重组病毒,可以实现外源基因的高水平表达。然而,目前虽已经有较多文献研究多角体蛋白高水平表达的分子机制,但迄今对于多角体蛋白基因编码区的结合蛋白尚不明确。本研究通过DNA pull-down联合质谱技术对结合在多角体蛋白编码区的蛋白质进行鉴定,共鉴定到78个宿主来源的蛋白和49个病毒自身编码的蛋白。对这些蛋白进行GO注释,结果表明这些蛋白除了具有共同的核酸结合功能外,还有其他不同的生物学功能,共同在多角体蛋白的超高水平表达过程中发挥作用。进一步从上述蛋白中筛选出了最值得深入研究的9个宿主蛋白和10个病毒蛋白。对这些蛋白进行深入研究,将为深入揭示多角体蛋白超高水平表达的分子机制提供新的线索。 展开更多
关键词 bmnpv 多角体蛋白 DNA pull-down 互作蛋白
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家蚕抗BmNPV新品种皖丰×润康
5
作者 王万宏 秦凤 +7 位作者 张彦 童晓琪 黄浩 徐浩 孙健诚 黄德辉 张勇 石凉 《中国蚕业》 2023年第3期66-69,共4页
皖丰×润康(521B·523B×3427)是由安徽省农业科学院蚕桑研究所育成的抗家蚕核型多角体病毒(BmNPV)夏秋用家蚕新品种。主要介绍了家蚕新品种皖丰×润康原种及一代杂交种的特性、饲养技术要点及注意事项。安徽省蚕品种... 皖丰×润康(521B·523B×3427)是由安徽省农业科学院蚕桑研究所育成的抗家蚕核型多角体病毒(BmNPV)夏秋用家蚕新品种。主要介绍了家蚕新品种皖丰×润康原种及一代杂交种的特性、饲养技术要点及注意事项。安徽省蚕品种鉴定成绩表明:皖丰×润康体质强健好养,对BmNPV有很强的抵抗性,产茧量高,耐粗食,发育齐一,老熟齐涌,喜营上层茧,茧形匀整,解舒好,丝质优。2021年通过安徽省蚕品种审定委员会审定,适合在长江流域夏季、中晚秋季及血液型脓病高发的蚕区饲养。 展开更多
关键词 家蚕 皖丰×润康 bmnpv 抗病品种 品种性状 鉴定成绩
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基于BSA-Seq的家蚕NC99R抗BmNPV分子标记鉴定
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作者 唐亮 蒋满贵 +5 位作者 唐名艳 黄深惠 陈小青 董桂清 王平阳 潘志新 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期2406-2414,共9页
【目的】以BSA-Seq测序分析确定抗家蚕血液型脓病品种桂蚕N2抗性亲本NC99R的抗性SNP标记及抗性基因,为NC99R抗性基因鉴定打下基础,也为家蚕抗血液型脓病分子标记辅助育种提供标记资源。【方法】以抗病品种NC99R、感病品种芙蓉为亲本制... 【目的】以BSA-Seq测序分析确定抗家蚕血液型脓病品种桂蚕N2抗性亲本NC99R的抗性SNP标记及抗性基因,为NC99R抗性基因鉴定打下基础,也为家蚕抗血液型脓病分子标记辅助育种提供标记资源。【方法】以抗病品种NC99R、感病品种芙蓉为亲本制备杂交F1、F2代及BC1遗传群体,通过添食核型多角体病毒(BmNPV)分析其遗传规律;在NC99R近等位基因系NC99R-NIL和芙蓉制备杂交的F2代群体中,设病毒浓度差异达4000倍的高浓度和低浓度添食组,在高浓度添食组挑选未发病个体用于构建极端抗性素材DNA混合池,在低浓度添食组挑选具有典型发病症状个体构建极端易感素材DNA混合池,利用二代测序技术完成抗性DNA混合池、易感DNA混合池及2个亲本基因组测序,并通过群体分离分析法(BSA)定位抗性连锁关联区域。【结果】NC99R对BmNPV表现出稳定的高抗性,基因组中携带有抗BmNPV基因,且由显著的抗性主效基因或紧密连锁基因共同调控。对极端抗性DNA混合池、极端易感DNA混合池及其亲本DNA进行全基因组测序分析,共获得19276670个SNP位点和4789615个InDel位点;基于ΔSNPindex的LOESS回归拟合分析,定位到2个与血液型脓病抗性关联的区域,分别为Chr.25:150-11069kb和Chr.27:8700-11009kb。同时将ΔSNP-index设定为≥0.8时,鉴定到3865个与抗性显著相关的SNP标记,其中,在25号染色体关联区域筛选出78个SNP标记,在27号染色体关联区域筛选出2694个SNP标记;再经氨基酸水平非同义突变筛查,定位到25号染色体Zinc carboxypeptidase基因和27号染色体Facilitated trehalose transporter Tret1基因。【结论】利用BSA-Seq在抗家蚕血液型脓病品种NC99R中发现与抗性相关的SNP标记资源有3865个,且初步鉴定到2个与抗BmNPV的相关基因(25号染色体Zinc carboxypeptidase基因和27号染色体Facilitated trehalose transporter Tret1基因),为家蚕抗血液型脓病分子标记辅助育种提供了标记资源。 展开更多
关键词 家蚕 NC99R 核型多角体病毒(bmnpv) 抗性分子标记 BSA-Seq
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从野桑蚕体内分离的NPV与BmNPV、AcMNPV间的RAPD分析
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作者 李兵 沈卫德 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2003年第6期101-102,共2页
将野外收集的野桑蚕核型多角体病毒进行空斑筛选 ,纯化后的病毒通过碱裂解法抽提基因组DNA ,用家蚕核型多角体病毒 (BmNPV)和苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒 (AcMNPV)的基因组DNA作对照 ,用随机引物进行PCR扩增。结果表明 ,野桑蚕分离的NPV... 将野外收集的野桑蚕核型多角体病毒进行空斑筛选 ,纯化后的病毒通过碱裂解法抽提基因组DNA ,用家蚕核型多角体病毒 (BmNPV)和苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒 (AcMNPV)的基因组DNA作对照 ,用随机引物进行PCR扩增。结果表明 ,野桑蚕分离的NPV与BmNPV、AcMNPV存在较大的差异性 ,通过版本为 1.3b的Treecomw软件分析 ,表明野桑蚕体内的NPV与BmNPV的同源关系较近 ,而与AcMNPV的同源关系较远。 展开更多
关键词 野桑蚕 w—bmnpv bmnpv ACMNPV RAPD
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BmNPV对家蚕抗氧化酶基因表达及其酶活性的影响 被引量:12
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作者 唐芬芬 杨伟克 +3 位作者 朱峰 邵榆岚 张永红 白兴荣 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期2308-2313,共6页
【目的】探究喂食家蚕核型多角体病毒(BmNPV)后家蚕血淋巴和中肠组织抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)]的活性及其基因表达变化规律,明确BmNPV侵染对家蚕抗氧化系统的影响,为解析BmNPV的致病机理提供理论依据。【方法】... 【目的】探究喂食家蚕核型多角体病毒(BmNPV)后家蚕血淋巴和中肠组织抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)]的活性及其基因表达变化规律,明确BmNPV侵染对家蚕抗氧化系统的影响,为解析BmNPV的致病机理提供理论依据。【方法】以五龄家蚕为研究对象,经口喂食BmNPV,分别于添食后6、12、18、24、30、36、42和48 h采集家蚕的血淋巴和中肠组织,采用实时荧光定量PCR检测两种抗氧化酶基因(Bmsod和Bmcat)的表达水平,同时以抗氧化酶活性测试盒测定SOD和CAT的活性变化情况。【结果】BmNPV侵染五龄家蚕能引起典型的血液型脓病,主要表现为蚕体环节肿胀,狂躁爬行,体壁易破,体液呈乳白色等。家蚕血淋巴和中肠组织中Bmsod和Bmcat基因均在感染BmNPV中期开始上调表达,在感染后期呈下调表达趋势,其相对表达量也呈先增加后急剧减少的变化趋势。添食BmNPV后,家蚕血淋巴和中肠组织的SOD活性在感染18和24 h时极显著高于对照组(添食等量灭菌水)家蚕(P<0.01,下同),但从感染30 h起SOD活性开始急剧下降,至感染48 h时降至最低值。家蚕血淋巴和中肠组织的CAT活性在感染早期(6 h)略有下降,从感染12 h起CAT活性开始呈上升趋势,血淋巴CAT活性在感染18~30 h极显著高于对照组,随后急剧下降且显著低于对照组家蚕(P<0.05,下同);中肠组织CAT活性仅在感染18和24 h时显著或极显著高于对照组家蚕,从感染30 h起开始持续下降,至感染48 h时降至最低值,约为对照组家蚕的18%。【结论】BmNPV侵染能影响家蚕机体相关保护酶活性及其基因转录水平,SOD和CAT活性及其基因表达量在感染中期增加,感染后期则急剧降低,提示抗氧化酶SOD和CAT在家蚕的抗病毒过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 家蚕 家蚕核型多角体病毒(bmnpv) SOD CAT 酶活性 基因表达
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用构建的新型BmNPV载体在家蚕高效表达人β-干扰素 被引量:6
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作者 邓继先 王少飞 +2 位作者 杨琴 程萱 李琳 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期126-132,共7页
构建了家蚕核多角体病毒新型载体pBm92,该载体将多角体蛋白基因的起始密码ATG改变为ATT,然后在多角体蛋白基因的+12位后连接有5个外源基因的克隆位点。将HuIFN-β基因克隆在多角体蛋白基因的+12位后,构建了... 构建了家蚕核多角体病毒新型载体pBm92,该载体将多角体蛋白基因的起始密码ATG改变为ATT,然后在多角体蛋白基因的+12位后连接有5个外源基因的克隆位点。将HuIFN-β基因克隆在多角体蛋白基因的+12位后,构建了pBmIFN+12;同时构建了Hu IFN-β克隆在-3位后的转移载体pB-mIFN-3。 展开更多
关键词 bmnpv 转移载体 Β-干扰素 基因表达
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由家蚕蛹─BmNPV系统建立环境诱变剂检测分析模型的初步研究 被引量:6
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作者 曹阳 徐兴耀 +2 位作者 黄自然 钟仰进 谭佩婵 《蚕业科学》 CAS CSCD 1997年第4期202-206,共5页
报道了9─氨基吖啶(9-AA)、甲基磺酸乙酯(EMS)和丝裂毒素C(MMC)3种强诱变剂在新设计的家蚕蛹─BmNPV系统致突变检测分析模型中得到的初步结果。9-AA和EMS以非中毒剂量分别与BmNPV混合注射于蚕蛹体腔后,2种诱变剂处理组蚕蛹发... 报道了9─氨基吖啶(9-AA)、甲基磺酸乙酯(EMS)和丝裂毒素C(MMC)3种强诱变剂在新设计的家蚕蛹─BmNPV系统致突变检测分析模型中得到的初步结果。9-AA和EMS以非中毒剂量分别与BmNPV混合注射于蚕蛹体腔后,2种诱变剂处理组蚕蛹发病时间比只注射病毒对照组延迟2~3d,随剂量增高,发病死亡率下降,蚕蛹生存率上升,存在明显的剂量效应。镜检3种诱变剂处理组蛹的血淋巴,发现部分病蛹中出现5%~20%的异常形态多角体,说明蛹体内部分BmNPV的基因可能被诱变损伤。试验结果符合模型分析第一阶段的预期结果。 展开更多
关键词 家蚕 bmnpv 环境诱变剂 检测 模型 蚕蛹
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抗BmNPV家蚕新品种粤蚕11号的育成 被引量:3
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作者 肖阳 李庆荣 +2 位作者 邢东旭 赵超艺 杨琼 《广东农业科学》 CAS 2020年第8期118-126,共9页
【目的】选育适于广东蚕区饲养的抗BmNPV家蚕新品种,为BmNPV病易发季节提供稳产性能好的家蚕品种。【方法】通过累代病原胁迫、航空诱变的方法创制抗性家蚕种质,再采用杂交与系统选育的方法,分别育成中系品种和日系品种,在此基础上进行... 【目的】选育适于广东蚕区饲养的抗BmNPV家蚕新品种,为BmNPV病易发季节提供稳产性能好的家蚕品种。【方法】通过累代病原胁迫、航空诱变的方法创制抗性家蚕种质,再采用杂交与系统选育的方法,分别育成中系品种和日系品种,在此基础上进行中·中×日·日四元杂交组合的组配,以广东省现行家蚕品种两广二号为对照,进行实验室品比、抗BmNPV能力检测和连续2年的实验室共同鉴定、农村生产鉴定。【结果】育成中系家蚕品种芙抗、春5N和日系家蚕品种航7、7532N,并组配获得四元杂交组合芙抗·春5N×航7·7532N,命名为粤蚕11号。该品种对BmNPV的抗性极显著高于对照,在实验室共同鉴定试验中的综合表现为:龄期经过与对照品种两广二号相当,生命力强,虫蛹率97.58%,全茧量1.712 g,茧层量0.369 g,茧层率21.55%,万蚕收茧量16.874 kg、万蚕茧层量3.636 kg,一粒茧丝长942 m、解舒率80.15%,茧丝纤度2.568 dtex、净度93.5分。【结论】粤蚕11号发育、眠起齐一,对BmNPV具较强抗性,产量高,茧丝质优良,是一个易繁易养、综合性状优良的家蚕新品种,于2019年10月通过广东省农作物新品种鉴定,适宜在广东蚕区全年饲养。 展开更多
关键词 bmnpv抗性 耐高温多湿 家蚕 新品种选育
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离体昆虫细胞对AcNPV和BmNPV的敏感性测定与分析 被引量:2
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作者 张欣 冯颖 +1 位作者 丁伟峰 马涛 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2011年第3期321-326,共6页
采用来源于3个目14种昆虫的离体细胞系对苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒AcNPV(Autographa californica nuclear polyhedrosis virus)和家蚕核型多角体病毒BmNPV(Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus)进行敏感性测定。试验结果表明:各... 采用来源于3个目14种昆虫的离体细胞系对苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒AcNPV(Autographa californica nuclear polyhedrosis virus)和家蚕核型多角体病毒BmNPV(Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus)进行敏感性测定。试验结果表明:各昆虫细胞系对两种病毒的敏感性不同,来源于双翅目及直翅目的细胞系均不能被这两种病毒感染;AcNPV可侵染来源于鳞翅目的Sf21、Sf9、HighFive、RIRI-PX及HZ,宿主范围较广;而BmNPV仅能侵染BmN细胞,宿主专一。AcNPV对Sf9细胞的感染率最高,接种病毒10 d后感染率平均达84.0%,而RIRI-PX的AcNPV病毒产量最高,形成的多角体数目为43.9PIBs/感染细胞。接种BmNPV10 d后,BmN的感染率为72.2%,形成的多角体数目为23.1.PIBs/感染细胞。 展开更多
关键词 昆虫细胞系 ACNPV bmnpv 感染
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分子标记技术检测家蚕品种抗BmNPV性能 被引量:3
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作者 钱荷英 高丽 +2 位作者 张月华 孙平江 徐安英 《江苏农业科学》 北大核心 2013年第6期41-43,共3页
通过经口添饲家蚕核型多角体病毒BmNPV,比较家蚕新品种871C、872C及其杂交种和871、872及其杂交种对BmNPV抵抗性的强弱,结果表明,家蚕新品种具有很强的抗BmNPV性能。用分子标记技术对不同品种进行辅助选择,抗性品种871C、872C显示为阳性... 通过经口添饲家蚕核型多角体病毒BmNPV,比较家蚕新品种871C、872C及其杂交种和871、872及其杂交种对BmNPV抵抗性的强弱,结果表明,家蚕新品种具有很强的抗BmNPV性能。用分子标记技术对不同品种进行辅助选择,抗性品种871C、872C显示为阳性,而易感品种871、872显示为阴性;并在抗病品种中扩增出长度为999 bp的DNA片段,推测该分子片段与家蚕品种的抗BmNPV性能相关。 展开更多
关键词 家蚕 bmnpv 抵抗性 分子标记
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BmNPV对家蚕BmN细胞周期及周期蛋白基因表达水平的影响 被引量:2
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作者 刘丽华 沈卫德 +1 位作者 李兵 王文兵 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2014年第2期41-45,共5页
【目的】研究家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori Nucleopolyhedroviruses,BmNPV)对家蚕卵巢细胞系(BmN)细胞周期及细胞周期蛋白基因转录水平的影响。【方法】用BmNPV感染家蚕BmN细胞,分别在病毒感染后的不同时间(12,24,36,48h),应用实时... 【目的】研究家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori Nucleopolyhedroviruses,BmNPV)对家蚕卵巢细胞系(BmN)细胞周期及细胞周期蛋白基因转录水平的影响。【方法】用BmNPV感染家蚕BmN细胞,分别在病毒感染后的不同时间(12,24,36,48h),应用实时荧光定量PCR方法检测细胞周期蛋白基因CyclinA、CyclinB、CyclinE的表达情况,用流式细胞仪检测细胞周期的变化。【结果】BmNPV感染24h后,BmN细胞出现明显感染症状,变为圆形;48h后细胞核内出现多角体。随着感染时间的延长,CyclinA、CyclinB、CyclinE基因表达量均下降,分别在感染12,24,36h后,表达量降低为0。流式细胞仪检测结果显示,在BmNPV感染后24h左右,抑制于G2/M期的BmN细胞达到68%。【结论】BmNPV感染家蚕BmN细胞后,导致CyclinB、CyclinE基因表达量降低,对CyclinA基因表达量的影响较小;同时BmNPV感染可以将BmN细胞发育抑制于G2/M期。 展开更多
关键词 bmnpv Cyclin基因 细胞周期
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BmNPV对鳞翅目害虫的侵染试验初报 被引量:2
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作者 吴福泉 蔡月仙 +2 位作者 廖森泰 应霞玲 王森才 《广东农业科学》 CAS CSCD 1999年第4期35-36,共2页
BmNPV对小菜蛾、菜粉蝶、银纹夜蛾没有致病性,但对斜纹夜蛾和甜菜夜蛾均有一定的致病作用,发病率分别为33.3%和8.3%。BmNPV和SlNPV混合侵染家蚕和斜纹夜蛾的发病率比单一病毒侵染的发病率高。镜检表明,混合... BmNPV对小菜蛾、菜粉蝶、银纹夜蛾没有致病性,但对斜纹夜蛾和甜菜夜蛾均有一定的致病作用,发病率分别为33.3%和8.3%。BmNPV和SlNPV混合侵染家蚕和斜纹夜蛾的发病率比单一病毒侵染的发病率高。镜检表明,混合侵染斜纹夜蛾病死虫多角体大小与SlNPV多角体大小相当,而混合侵染家蚕致病的多角体大小则介于BmNPV多角体和SlNPV多角体之间,而且可同时致使家蚕和斜纹夜蛾幼虫发病。 展开更多
关键词 bmnpv 鳞翅目 侵染
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从野桑蚕分离的NPV与BmNPV、ApNPV间的RAPD分析 被引量:1
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作者 沈卫德 李兵 +1 位作者 季平 刘丽华 《蚕业科学》 CAS CSCD 2003年第2期148-150,共3页
将野外收集的野桑蚕核型多角体病毒(w-BmNPV)进行空斑筛选,纯化后的病毒通过碱裂解法抽提基因组DNA,以家蚕核型多角体病毒(BmNPV)和柞蚕核型多角体病毒(ApNPV)的基因组DNA为对照,用随机引物进行PCR扩增。结果表明:野桑蚕分离的NPV和BmNP... 将野外收集的野桑蚕核型多角体病毒(w-BmNPV)进行空斑筛选,纯化后的病毒通过碱裂解法抽提基因组DNA,以家蚕核型多角体病毒(BmNPV)和柞蚕核型多角体病毒(ApNPV)的基因组DNA为对照,用随机引物进行PCR扩增。结果表明:野桑蚕分离的NPV和BmNPV、ApNPV间存在较大的差异性,通过版本为1.3b的Treecomw软件分析,野桑蚕体内的NPV和BmNPV的同源关系较近,而与ApNPV的同源关系较远。 展开更多
关键词 野桑蚕核型多角体病毒 分离 NPV bmnpv APNPV RAPD分析 家蚕核型多角体病毒 柞蚕核型多角体病毒
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BmNPV对家蚕不同组织ALP活性及其基因表达的影响 被引量:2
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作者 高建华 杨大平 +1 位作者 杨伟克 丁志伟 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第5期1101-1104,共4页
【目的】探究家蚕感染BmNPV后,不同组织碱性磷酸酶(ALP)及其基因表达变化规律,为阐明BmNPV的侵染机制及培育抗NPV蚕品种的选育提供借鉴和思考。【方法】通过经口添食BmNPV,检测分析家蚕中肠、血淋巴和脂肪体ALP基因的表达水平及其编码... 【目的】探究家蚕感染BmNPV后,不同组织碱性磷酸酶(ALP)及其基因表达变化规律,为阐明BmNPV的侵染机制及培育抗NPV蚕品种的选育提供借鉴和思考。【方法】通过经口添食BmNPV,检测分析家蚕中肠、血淋巴和脂肪体ALP基因的表达水平及其编码的碱性磷酸酶活性变化情况。【结果】家蚕中肠ALP基因在感染BmNPV后6、9和12 h呈现上调表达趋势,其编码的碱性磷酸酶活性显著高于对照组,在感染24 h基因表达被抑制,同时酶活性显著降低。血淋巴碱性磷酸酶及ALP基因对BmNPV的响应略晚于中肠,ALP基因在感染9 h开始上调表达,在12 h表达量最高,在24 h表达量急剧降低。碱性磷酸酶活性在9和12 h极显著高于对照组,而在24 h急剧减弱,显著低于对照组。脂肪体ALP基因表达量及碱性磷酸酶活性仅在感染12 h显著高于对照组。【结论】家蚕感染BmNPV后,中肠、血淋巴和脂肪体ALP基因表达水平及碱性磷酸酶活性变化均是呈现先升高后急剧减弱的趋势。基因的表达情况与酶活性变化规律一致,这与家蚕感染BmNPV后,其自身机体的生理代谢进程存在紧密联系,暗示碱性磷酸酶在家蚕抗病毒过程中发挥了重要作用。 展开更多
关键词 bmnpv 碱性磷酸酶 基因表达
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家蚕DNA甲基转移酶功能预测及其在BmNPV感染下的表达特征 被引量:1
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作者 张一川 张永红 +1 位作者 邵榆岚 白兴荣 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期2665-2673,共9页
【目的】明确家蚕DNA甲基转移酶基因(BmDNMT)生物信息学基本特征及其在家蚕核型多角体病毒(BmNPV)感染前后的表达情况,揭示DNA甲基化在家蚕抗病毒免疫方面的作用机制,为挖掘家蚕抗病毒标志基因和药物靶标蛋白等提供理论依据。【方法】通... 【目的】明确家蚕DNA甲基转移酶基因(BmDNMT)生物信息学基本特征及其在家蚕核型多角体病毒(BmNPV)感染前后的表达情况,揭示DNA甲基化在家蚕抗病毒免疫方面的作用机制,为挖掘家蚕抗病毒标志基因和药物靶标蛋白等提供理论依据。【方法】通过OrthoDB、MultiLoc2、SherLoc2、PSORTII、SMART、SWISS-MODEL及Schr?dinger等在线生物信息学分析软件进行BmDNMT蛋白氨基酸同源比对、系统进化分析、亚细胞定位、功能结构域预测、三级结构同源建模及小分子配体对接口袋预测,并采用实时荧光定量PCR分析BmDNMT基因在家蚕感染BmNPV后不同时间不同组织中的时空表达特征。【结果】BmDNMT基因包含BmDNMT1和BmDNMT2,分别位于家蚕8号染色体和11号染色体上,其推导BmDNMT氨基酸序列均与烟草天蛾DNMT氨基酸序列的亲缘关系最近。BmDNMT1蛋白大量存在于细胞核,少量分布在细胞质;而BmDNMT2蛋白大量存在于细胞质,少量分布在细胞核及线粒体。BmDNMT1蛋白的功能结构域多于BmDNMT2蛋白,二者均含有DNA甲基化酶功能结构域,且具有潜在药物结合口袋。BmNPV感染会影响BmDNMT1和BmDNMT2基因在家蚕不同组织中表达差异,BmNPV感染4 h后这2个基因在家蚕中肠的表达差异已非常明显,说明家蚕DNA甲基化可能在病毒感染早期已发生,且中肠可能是最早响应的组织。BmNPV感染后,BmDNMT1和BmDNMT2基因的相对表达量和表达趋势并不一致。【结论】BmDNMT1和BmDNMT2基因的染色体位置、亚细胞定位及功能结构域等存在差异,BmNPV感染后二者在家蚕不同组组织中的相对表达量和表达趋势也不一致,推测BmDNMT1和BmDNMT2基因在家蚕DNA甲基化过程中行使不同的功能。BmDNMT1和BmDNMT2蛋白三维结构具有潜在的药物结合口袋,可能是直接影响DNA甲基化状态的药物靶标。 展开更多
关键词 家蚕核型多角体病毒(bmnpv) DNA甲基转移酶(DNMT) DNA甲基化 药物靶标
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接种BmNPV后抗性品种和非抗性品种家蚕组织中2种酶活性的比较研究 被引量:1
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作者 李龙 张蕾 +4 位作者 张东阳 刘泽玉 徐安英 钱荷英 武国华 《安徽农业科学》 CAS 2015年第11期123-126,共4页
[目的]探讨抗性品种和非抗性品种家蚕接种家蚕核型多角体病毒(Bm NPV)后体内羧酸酯酶(Car E)和乙酰胆碱酯酶(Ach E)活性的变化规律。[方法]对抗性品种及其对照品种家蚕添食Bm NPV,测定并比较中肠和血液中羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶的活性... [目的]探讨抗性品种和非抗性品种家蚕接种家蚕核型多角体病毒(Bm NPV)后体内羧酸酯酶(Car E)和乙酰胆碱酯酶(Ach E)活性的变化规律。[方法]对抗性品种及其对照品种家蚕添食Bm NPV,测定并比较中肠和血液中羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶的活性变化。[结果]家蚕接种Bm NPV后,抗性品种的中肠中羧酸酯酶活性上升,而对照品种羧酸酯酶活性先升高,然后从第3天开始活性降低。抗性品种前2 d中肠的乙酰胆碱酯酶活性降低,而对照品种与之相反。家蚕接种Bm NPV后,抗性品种在第2天血液羧酸酯酶活性有所升高,此后基本保持不变,而非抗性品种在第3天羧酸酯酶活性升高后下降;抗性品种血液乙酰胆碱酯酶活性升高,对照品种前2 d乙酰胆碱酯酶升高后降低。[结论]抗性品种在感染Bm NPV病毒后其中肠中羧酸酯酶活性高于未感染的抗性品种,表明抗性品种对感染病毒做出了有效应答和防御;而在感染病毒后抗性品种的中肠与血液中乙酰胆碱酯酶活性均变化相对较小。据此推测,抗性品种在感染病毒后仍保持了相对稳定的代谢过程。 展开更多
关键词 家蚕 bmnpv 羧酸酯酶 乙酰胆碱酯酶
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饲料中维生素和无机盐对rBmNPV-Bm表达系统植酸酶基因表达活性的影响(英文) 被引量:1
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作者 尚金燕 王冰 +2 位作者 崔为正 吴小锋 张志芳 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期575-579,共5页
【目的】为查明宿主的营养对重组家蚕杆状病毒-家蚕表达系统(rBmNPV-Bm)外源基因表达活性的影响,探寻提高家蚕Bombyx mori生物反应器产率的新途径。【方法】以家蚕BmNPV病毒为表达载体,以人工饲料饲养的5龄家蚕为宿主,以植酸酶基因为报... 【目的】为查明宿主的营养对重组家蚕杆状病毒-家蚕表达系统(rBmNPV-Bm)外源基因表达活性的影响,探寻提高家蚕Bombyx mori生物反应器产率的新途径。【方法】以家蚕BmNPV病毒为表达载体,以人工饲料饲养的5龄家蚕为宿主,以植酸酶基因为报告基因,探讨了家蚕人工饲料中维生素和无机盐对外源基因表达产物活性的影响。【结果】家蚕血淋巴中外源植酸酶的活性随着饲料中维生素和无机盐添加量的不同而发生显著变化。在本试验设区范围内,当维生素C的含量为饲料干物质量的1 %,B族维生素混合物为0.25 %,无机盐混合物为1 %,维生素B6为100 g饲料干物中含2 mg时,血淋巴中植酸酶活性达到最大值。【结论】通过改变家蚕饲料中微量营养成分的含量是提高rBmNPV-Bm表达系统外源基因表达活性的有效途径。 展开更多
关键词 bmnpv-Bm表达系统 维生素 无机盐 植酸酶基因 表达 酶活性
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