家蚕Tret1-X1基因对家蚕核型多角体病毒(BmNPV)的基因表达和基因组复制的影响

家蚕促海藻糖转运蛋白1异构体X1(Bombyx mori facilitated trehalose transporter Tret1-like isoform X1,BmTret1-X1)主要参与家蚕糖代谢过程。为探究其在家蚕抗BmNPV感染过程中的作用,克隆BmNPV抗性家蚕品系AN与易感品系C108的BmTret1-X1基因,发现基因编码区存在4个SNP导致的氨基酸改变,两者的预测蛋白质结构存在差异。利用pIZT/V5-His-mCherry表达载体在BmN细胞中过表达BmTret1-X1,BmNPV感染后24 h、48 h的BmNPV增殖受到抑制,BmNPV基因lef-3、vp39、p10和gp64的转录水平低于对照组(P<0.05),其中感染后24 h vp39基因的表达量与对照组相比差异达1 089倍,细胞中病毒基因组DNA复制也受到明显抑制。转染BmTret1-X1基因siRNA使BmN细胞中该基因表达量降低约一半,BmNPV的lef-3、vp39、p10和gp64转录水平升高,但BmNPV增殖和基因组DNA复制水平未见明显变化。综上所述,BmN细胞中BmTret1-X1基因的高表达对BmNPV的基因表达、DNA复制及病毒增殖具有抑制作用,该基因在家蚕对BmNPV的抗性形成过程中具有一定作用。

凋亡相关基因Bcl-2、Bcl-xl和Bax mRNA在大鼠缺血预处理脑组织中的表达

目的 检测脑缺血预处理大鼠脑组织中凋亡调控基因Bcl 2、Bcl xl和Bax的表达。方法 假手术对照组、预处理对照组、预处理缺血组和缺血组Wistar大鼠分别再灌 2 4h ,48h和 72h ,采用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)和原位分子杂交 (ISH)方法对脑组织Bcl 2、Bcl xl和BaxmRNA的表达进行检测。结果 半定量RT PCR显示 :与假手术对照组相比 ,预处理对照组大鼠再灌 2 4h、48h和预处理缺血组大鼠再灌 2 4h脑组织Bcl 2mRNA的表达增高 ;预处理对照组和预处理缺血组大鼠再灌 2 4h脑组织Bcl xlmRNA的表达增高 (P <0 0 5 )。而四组大鼠BaxmRNA的表达无显著性差异 (P >0 0 5 )。ISH方法显示与假手术对照组及缺血组相比 ,预处理对照组和预处理缺血组大鼠再灌 2 4h脑组织Bcl 2、Bcl xlmRNA的表达增高 (P <0 0 5 ) ,各组大鼠BaxmRNA的表达无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 脑缺血预处理后Bcl 2、Bcl xlmRNA的表达增高 ,可能是脑缺血预处理内源性抗损伤的机制之一。