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家蚕碱性核酸酶BmdsRNase的原核表达和对dsRNA的降解效果
1
作者
冯韵锖
陈佩婵
+1 位作者
李佳璇
刘吉升
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第5期566-572,共7页
dsRNase是一种DNA/RNA非特异性碱性核酸酶,这类酶具有广泛的底物特异性,可影响鳞翅目昆虫的RNA干扰效率。为验证从家蚕消化液分离的BmdsRNase能否在家蚕体外表达并降解dsRNA,根据其功能域构建了3个不同基因片段的表达载体,转化大肠埃希...
dsRNase是一种DNA/RNA非特异性碱性核酸酶,这类酶具有广泛的底物特异性,可影响鳞翅目昆虫的RNA干扰效率。为验证从家蚕消化液分离的BmdsRNase能否在家蚕体外表达并降解dsRNA,根据其功能域构建了3个不同基因片段的表达载体,转化大肠埃希菌进行原核表达,体外诱导培养后进行dsRNA的降解试验。SDS-PAGE显示BmdsRNase的3个基因片段均能在原核系统中表达,最适宜的蛋白质诱导时间为2 h,表达产物主要以包涵体形式存在。实时定量PCR结果表明,3种重组表达菌的表达产物均可降解dsRNA。上述结果为后续研究BmdsRNase的功能,以及鳞翅目昆虫的RNA干扰机制提供了实验数据。
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关键词
昆虫
RNA干扰
bmdsrnase
dsRNA降解
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题名
家蚕碱性核酸酶BmdsRNase的原核表达和对dsRNA的降解效果
1
作者
冯韵锖
陈佩婵
李佳璇
刘吉升
机构
广州大学生命科学学院
出处
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第5期566-572,共7页
基金
国家自然科学基金项目(31501898)
广东省普通高校特色创新类项目(2019KTSCX133)
“攀登计划”广东大学生科技创新培育专项(pdjh2020a0455)
文摘
dsRNase是一种DNA/RNA非特异性碱性核酸酶,这类酶具有广泛的底物特异性,可影响鳞翅目昆虫的RNA干扰效率。为验证从家蚕消化液分离的BmdsRNase能否在家蚕体外表达并降解dsRNA,根据其功能域构建了3个不同基因片段的表达载体,转化大肠埃希菌进行原核表达,体外诱导培养后进行dsRNA的降解试验。SDS-PAGE显示BmdsRNase的3个基因片段均能在原核系统中表达,最适宜的蛋白质诱导时间为2 h,表达产物主要以包涵体形式存在。实时定量PCR结果表明,3种重组表达菌的表达产物均可降解dsRNA。上述结果为后续研究BmdsRNase的功能,以及鳞翅目昆虫的RNA干扰机制提供了实验数据。
关键词
昆虫
RNA干扰
bmdsrnase
dsRNA降解
Keywords
Insect
RNA Interference
bmdsrnase
dsRNA degradation
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
S881.2 [农业科学—特种经济动物饲养]
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作者
出处
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被引量
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1
家蚕碱性核酸酶BmdsRNase的原核表达和对dsRNA的降解效果
冯韵锖
陈佩婵
李佳璇
刘吉升
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2020
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