马耳他布鲁氏菌sRNA Bmsr10缺失株的构建及其对毒力的影响

为评估布鲁氏菌sRNA Bmsr10对布鲁氏菌毒力的影响,本研究以布鲁氏菌M28为亲本株,利用同源重组方法构建了稳定遗传的sRNA Bmsr10缺失株M28ΔBmsr10和回补株M28ΔBmsr10-com。对其生长曲线进行测定,结果显示与亲本株M28相比,M28ΔBmsr10体外生长速率无明显变化;将M28ΔBmsr10按MOI 100感染RAW264.7细胞后,分别于感染后6 h、24 h和48 h裂解细胞进行细菌计数,结果显示:与亲本株M28相比,M28ΔBmsr10感染24h后,在巨噬细胞内的分菌数显著低于M28;以1×10^6cfu/100μL/只感染小鼠后于不同时间采集小鼠脾脏进行细菌计数和称重,检测M28ΔBmsr10在小鼠体内的增殖水平,结果显示感染M28ΔBmsr10后各时间点小鼠脾脏分菌数(p<0.01)和脾脏重量(p<0.01)与M28相比均显著降低,表明sRNA Bmsr10缺失显著降低了M28在小鼠体内的增殖能力和引起的炎症反应。结果证明:sRNA Bmsr10缺失可显著降低布鲁氏菌的毒力。本研究为探究Bmsr10影响布鲁氏菌毒力的分子机制及疫苗开发奠定了重要基础。