油菜BnSGS3基因克隆及转基因拟南芥病毒抗性

为阐明甘蓝型油菜BnSGS3抗病毒功能,用5′-RACE和巢氏PCR方法从油菜中克隆了BnSGS3。该基因全长2638bp,包含4个内含子和1个1824bp的完整开放阅读框。序列对比发现,BnSGS3与其他SGS3基因同源性在58.9%～97.5%之间。构建BnSGS3过表达载体（BnSGS3-Ov）和干扰表达载体（BnSGS3-Si）,通过浸花（Floral-dip）法转化拟南芥,经除草剂筛选及PCR检测,获得2种转基因拟南芥各30株。拟南芥接种黄瓜花叶病毒（CMV）的抗性鉴定显示,转BnSGS3-Ov植株发病轻,株型基本正常,后期能正常开花结籽,对CMV表现中抗;而转BnSGS3-Si植株发病重,不能正常开花结籽。接种油菜花叶病毒（YoMV）后,2种转基因和非转基因拟南芥均对YoMV表现感病,说明BnSGS3对CMV有一定抗性,但对YoMV无明显抗性。