重组病毒BoHV-1 gG^-/tk^-/gD^+和BoHV-1 gG^-/tk^-/gD5^+的兔体内安全性和免疫原性

【目的】牛传染性鼻气管炎由BoHV-1感染引起,我国对该病的防控尚缺乏商品化标记疫苗,本实验室前期成功研制了BoHV-1 gG^-/tk^-基因缺失疫苗,并通过将BoHV-1和Bo HV-插入BoHV-1 gG^-/tk^-的tk位置,构建了重组病毒BoHV-1 gG^-/tk^-/g D+和BoHV-1 gG^-/tk^-/g D5+。本研究的目的在于评价该重组病毒在兔体内5的免疫原性最好的糖蛋白g D的胞外区序列分别的安全性和免疫原性及对BoHV-1保护力和Bo HV-5的交叉保护力,以期开发出更为有效的牛传染性鼻气管炎标记疫苗。【方法】选用30只日本大耳白兔并随机分成6组,鼻腔接种和攻毒。通过临床症状观察、体温测量和鼻腔排毒检测进行安全性评估。接种28 d后分别使用wt BoHV-1和wt Bo HV-5对兔体进行攻击,并通过临床症状观察、体温测量、鼻腔排毒、病理组织学和组织病毒的分离鉴定进行保护力研究。使用间接ELISA、中和实验和外周血单核细胞的增殖水平对重组病毒免疫原性进行评估。【结果】接种BoHV-1 gG^-/tk^-/g D+和BoHV-1 gG^-/tk^-/g D5+后兔体均未出现显著临床症状,无鼻腔排毒现象,并且肺组织未分离到病毒;BoHV-1 gG^-/tk^-接种组有一只兔肺组织分离到病毒。攻毒后,BoHV-1 gG^-/tk^-/g D+和BoHV-1 gG^-/tk^-/g D5+可以减少临床症状、鼻腔排毒并维持正常肺组织形态,表现为对BoHV-1的保护力以及Bo HV-5的交叉保护力提高。与BoHV-1 gG^-/tk^-相比,BoHV-1 gG^-/tk^-/g D+和BoHV-1 gG^-/tk^-/g D5+免疫诱导更高水平的中和抗体、ELISA抗体以及PBMC增殖。【结论】BoHV-1 gG^-/tk^-/g D+和BoHV-1gG^-/tk^-/g D5+安全性良好,同时,与BoHV-1 gG^-/tk^-相比,免疫原性得到提高。

对从大洋洲进口牛的疱疹病毒Ⅰ型五种检疫方案的评估

牛疱疹病毒Ⅰ型是引起牛传染性鼻气管炎和传染性脓疱性外阴阴道炎的病原,也是近十多年来我国从大洋洲大量进口奶牛以来,检出率最高的病原之一。为了更加有效地防范其传入,本文在分析其感染特点、防控措施、大洋洲流行特点、世界动物卫生组织和中国现行检疫要求的基础上,对中国从大洋洲进口牛时该病5种检疫方案进行了风险分析,提出了以接种能区分免疫和自然感染的基因缺失疫苗代替接种灭活疫苗为主要内容的检疫的新建议。

牛疱疹病毒Ⅰ型检测技术概述

牛疱疹病毒Ⅰ型(BoHV-1)可以引起多种临床疾病,如牛传染性鼻气管炎(IBR)、传染性脓疱性外阴阴道炎(IPV)以及结膜炎等,是牛的一种急性、热性、接触性传染病,对乳牛产奶量、公牛繁殖力及役用牛的使役力均有较大影响,每年造成极大的经济损失。牛疱疹病毒Ⅰ型的早期准确诊断和治疗对于该病的防控具有重要作用。目前,牛疱疹病毒Ⅰ型的检测方法主要有临床诊断、病原学诊断和血清学诊断等,各有优缺点。该文总结概述了牛疱疹病毒Ⅰ型的各种常用诊断方法,旨在为该病的进一步研究和诊断防控提供参考。

牛传染性鼻气管炎病毒(gN-TK-gG-)三基因缺失突变株的构建

牛传染性鼻气管炎是由牛疱疹病毒I型（BoHV-1）引起的一种牛的传染病，可导致严重的经济损失。疫苗接种是用于防控该病的重要手段，但现有疫苗在多个方面都有改进的余地。本试验利用pBoHV-1 BAC载体和4次Red E／T重组，依次构建了BoHV-1 gN^-（CT^-）、BoHV-1 gN^-（CT^-30-32^-）、BoHV-1 gN^-TK^-和BoHV-1 gN TK gG^-基因缺失突变株，其中gN缺失了胞外区30-32位氨基酸、胞质尾区CT端，TK基因缺失了1079bp，gG基因缺失了1335bp。pBoHV-1 gN^-TK^-gG^-经磷酸钙法转染MDBK细胞后，出现细胞病变，成功拯救出三基因缺失病毒株BoHV-1 gN TK^-gG^-。研究结果为牛传染性鼻气管炎新型基因缺失标记疫苗的开发奠定了基础。