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Research progress of bone sialoprotein in osteoclast differentiation and bone resorption
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作者 ZENG Jun-ming HE Xiao-ning 《Journal of Hainan Medical University》 CAS 2023年第18期65-69,共5页
Bone sialoprotein(BSP)is an important non-collagen extracellular matrix protein(EMC)that promotes bone formation and induces bone resorption.BSP is secreted by odontoblasts,it plays an important role in cementum,alveo... Bone sialoprotein(BSP)is an important non-collagen extracellular matrix protein(EMC)that promotes bone formation and induces bone resorption.BSP is secreted by odontoblasts,it plays an important role in cementum,alveolar bone formation and mineralization,and periodontal function.Bone resorption is controlled by a complex molecular network,and BSP can promote osteoclast differentiation and bone resorption.It is also associated with the metastasis of a range of malignancies.Osteoclasts(OC)are thought to be the only cells involved in bone resorption and play an important role in bone formation and late developmental remodeling.Osteoporosis and periodontal disease are caused by excessive bone resorption.This article will summarize the osteoclasts differentiation,the biological function of bone resorption,and explore the progress of the prevention and treatment of the related bone resorption diseases such as osteoporosis and periodontal disease through the regulation of osteoclasts. 展开更多
关键词 bone sialoprotein bone resorption OSTEOCLASTS OSTEOPOROSIS PERIODONTITIS
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Predictive Value of Serum Bone Sialoprotein and Prostate-specific Antigen Doubling Time in Patients with Bone Metastasis of Prostate Cancer 被引量:3
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作者 王焱 张晓飞 +3 位作者 戴吉 郑咏池 张明根 何建军 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2013年第4期559-562,共4页
Summary: This study aimed to evaluate the diagnostic and prognostic significance of serum bone sialoprotein (BSP) and prostate-specific antigen doubling time (PSADT) in patients with bone metastasis (BM) from p... Summary: This study aimed to evaluate the diagnostic and prognostic significance of serum bone sialoprotein (BSP) and prostate-specific antigen doubling time (PSADT) in patients with bone metastasis (BM) from prostate cancer (PC). A total of 116 patients with PC, 120 patients with benign prostatic hyperplasia (BPH) and 120 healthy controls were enrolled in this study. PC patients were divided into bone metastasis (BM) group (n=56) and non-bone metastasis (NBM) group (n=60). Serum BSP was detected by Sandwich ELISA. Severity of bone pain was evaluated using visual analogue score (VAS). Serum f-PSA and t-PSA levels were measured by using electrochemiluminescence immunoassay (ECLIA). PSADT was calculated according to the formula: PSADT=lg(2)/[log(PSA2)--log(PSA1)]. The mean serum BSP level in PC patients with BM was significantly higher than in PC patients without BM, BPH patients and controls (P〈0.001 for all). Pearson's analysis showed that serum BSP level was posi- tively correlated with VAS in PC patients with BM (P〈0.05). Receiver operating characteristics (ROC) analysis demonstrated that BSP discriminated patients with BM from those without BM at the cutoff value of 33.26 ng/mL. The sensitivity and specificity were 78.21% and 79.28%, respectively. The opti- mal cutoff value of PSADT was 131 days, with sensitivity of 85.69% and specificity of 85.36%. Kap- lan-Meier analysis revealed that subjects with higher BSP levels/shorter PSADT had a shorter BM-free period than those with lower BSP levels/longer PSADT. Serum BSP and PSADT are useful biomarkers for the diagnosis of BM from PC, and can be regarded as independent factors for predicting the progno- sis of BM from PC. Combined determination of BSP and PSADT can improve accuracy and positive rate of BM from PC significantly. 展开更多
关键词 bone sialoprotein prostate cancer bone metastasis PROGNOSIS
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Design of nano-piezoelectric immunosensor array to detect bone sialoprotein
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作者 陈钰 《外科研究与新技术》 2011年第2期125-125,共1页
Objective With the unique properties of Au nano-particles,a nano-piezoelectric immunosensor microarray was designed using AT-cut 10 Hz quartz crystal to detect blood sialoprotein (BSP) expression from clinical serum.M... Objective With the unique properties of Au nano-particles,a nano-piezoelectric immunosensor microarray was designed using AT-cut 10 Hz quartz crystal to detect blood sialoprotein (BSP) expression from clinical serum.Methods 展开更多
关键词 Design of nano-piezoelectric immunosensor array to detect bone sialoprotein
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2型糖尿病小鼠牙齿牙合向伸长运动过程中根尖周组织的变化
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作者 郑毅 魏舟丹 +5 位作者 郭栋 师子清 牛蔚然 许倬瑜 李鹏翠 李文晋 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第32期5196-5202,共7页
背景:临床工作中经常会遇到一些糖尿病患者的牙齿缺失情况,牙齿缺失后如果未及时行修复治疗,会导致对颌牙伸长,引起垂直向牙合间隙减少、咬合早接触、牙合干扰,甚至需要拔除等一系列问题。目的:观察糖尿病小鼠牙齿牙合向伸长过程中根尖... 背景:临床工作中经常会遇到一些糖尿病患者的牙齿缺失情况,牙齿缺失后如果未及时行修复治疗,会导致对颌牙伸长,引起垂直向牙合间隙减少、咬合早接触、牙合干扰,甚至需要拔除等一系列问题。目的:观察糖尿病小鼠牙齿牙合向伸长过程中根尖周组织内晚期糖基化终产物受体和骨唾液蛋白的表达,探究糖尿病在牙齿牙合向伸长运动过程中对根尖周组织的影响。方法:将120只雄性C57BL小鼠随机分为3组,即糖尿病组、阴性对照组和空白对照组(n=40)。糖尿病组腹腔注射70 mg/kg的链脲佐菌素建立糖尿病模型,阴性对照组腹腔注射等量的柠檬酸钠溶液,空白对照组则不做处理。建模成功后,3组中均随机选出30只小鼠拔除右侧上颌磨牙,再将3组小鼠分为0,3,6,9,12 d 5个亚组(n=6),按组别定时处死,提取右侧下颌骨。通过实时荧光定量PCR及免疫组化染色观察小鼠磨牙根尖周组织中晚期糖基化终产物受体和骨唾液蛋白的mRNA和蛋白表达水平。结果与结论:①实时荧光定量PCR结果:晚期糖基化终产物受体mRNA相对表达量糖尿病组高于其他两组,骨唾液蛋白mRNA的相对表达量糖尿病组少于其他两组(P<0.05),阴性对照组与空白对照组相比无明显差异(P>0.05);随着拔牙时间延长,3组中2种基因的相对表达量均呈持续增长的趋势,糖尿病组在3-6 d时表达量增加最快,阴性对照组及空白对照组在6-9 d时增长速度较快;糖尿病组晚期糖基化终产物受体mRNA相对表达量的增长趋势整体较其他两组明显,骨唾液蛋白mRNA相对表达量的增长趋势整体较其他两组平缓;②免疫组化染色结果:3组小鼠磨牙根尖周晚期糖基化终产物受体和骨唾液蛋白的阳性率随拔牙时间延长均越来越高;糖尿病组晚期糖基化终产物受体阳性率在拔牙后各时间点均显著高于其他两组(P<0.05);骨唾液蛋白阳性率在拔牙后的6,9,12 d显著低于其他两组(P<0.05);阴性对照组与空白对照组骨唾液蛋白和晚期糖基化终产物受体的阳性率相比无明显差异(P>0.05);③提示糖尿病小鼠牙齿牙合向伸长过程中根尖周组织内晚期糖基化终产物受体和骨唾液蛋白随着拔牙时间的延长表达量均逐渐增加,骨唾液蛋白的增长速度及表达量均低于阴性对照组及空白对照组,提示糖尿病可能抑制骨唾液蛋白的表达;但晚期糖基化终产物受体高水平可能与糖尿病加速根尖周组织破坏、延缓组织重建速度有关。 展开更多
关键词 骨唾液蛋白 糖尿病小鼠 晚期糖基化终产物受体 牙齿伸长 免疫组化染色 实时荧光定量PCR
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骨唾液酸蛋白在恶性肿瘤中的研究进展
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作者 李振连 康小玲 +3 位作者 李辉斌 廖燕霞 彭大云 郜红艺 《国际医药卫生导报》 2023年第14期1940-1943,共4页
骨唾液酸蛋白(BSP)是由骨基质和肿瘤细胞分泌,存在于细胞外基质(ECM)中的一种非胶原磷酸化糖蛋白,通过与整合素avβ3结合,可以介导肿瘤细胞与ECM的黏附作用、促进ECM的降解、参与血管生成和体液免疫等,在恶性肿瘤增殖、侵袭和转移过程... 骨唾液酸蛋白(BSP)是由骨基质和肿瘤细胞分泌,存在于细胞外基质(ECM)中的一种非胶原磷酸化糖蛋白,通过与整合素avβ3结合,可以介导肿瘤细胞与ECM的黏附作用、促进ECM的降解、参与血管生成和体液免疫等,在恶性肿瘤增殖、侵袭和转移过程中起着关键作用,被认为是一种新的肿瘤标志物。本文概述了BSP的生物学特性及近年来BSP与恶性肿瘤的相关性研究,进而评估其在恶性肿瘤早期诊断、疗效评价和预后监测的临床意义。 展开更多
关键词 恶性肿瘤 骨唾液酸蛋白 整合素avβ3 进展
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骨涎蛋白在破骨细胞分化和骨吸收中的研究进展 被引量:2
6
作者 曾俊铭 贺小宁 《海南医学院学报》 2023年第18期1425-1429,共5页
骨涎蛋白是一个重要的非胶原细胞外间质蛋白,具有促进骨形成以及诱导骨吸收的功能,可刺激成骨细胞分化,并诱导矿化组织的出现。骨的吸收由一个复杂的分子网络控制,而骨涎蛋白可以促进破骨细胞分化与骨吸收,同时它也与一系列恶性肿瘤的... 骨涎蛋白是一个重要的非胶原细胞外间质蛋白,具有促进骨形成以及诱导骨吸收的功能,可刺激成骨细胞分化,并诱导矿化组织的出现。骨的吸收由一个复杂的分子网络控制,而骨涎蛋白可以促进破骨细胞分化与骨吸收,同时它也与一系列恶性肿瘤的转移息息相关。目前认为破骨细胞是骨吸收的唯一细胞,在骨骼的形成以及后期的发育改建中发挥重要作用。骨质疏松症和牙周病都是因过度骨吸收而引起的。本文将对骨涎蛋白在破骨细胞分化和骨吸收中的生物学功能进行总结,并探讨通过调控破骨细胞从而预防和治疗骨质疏松和牙周病等骨吸收相关疾病的进展。 展开更多
关键词 骨涎蛋白 骨吸收 破骨细胞 骨质疏松 牙周病
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BSP和NTx在骨转移癌诊断中的作用研究
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作者 冯青青 张少丽 +1 位作者 王亮 司玉玲 《继续医学教育》 2023年第5期157-160,共4页
目的研究恶性肿瘤患者骨转移及其他脏器转移时血清骨唾液酸蛋白(bone sialoprotein,BSP)、I型胶原氨基末端肽(N-terminal telopeptide of type I collagen,NTx)的水平变化。方法收集天津市第四中心医院肿瘤血液科2013年9月至2014年9月... 目的研究恶性肿瘤患者骨转移及其他脏器转移时血清骨唾液酸蛋白(bone sialoprotein,BSP)、I型胶原氨基末端肽(N-terminal telopeptide of type I collagen,NTx)的水平变化。方法收集天津市第四中心医院肿瘤血液科2013年9月至2014年9月间收治的资料完整的恶性肿瘤患者49例,其中无转移组(CO组)17例,其他脏器转移组(CM组)15例,骨转移组(CB组)17例,酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒检测BSP、NTx血清水平。结果1)CB组BSP水平明显高于CO及CM组[分别为(4305.45±964.83)pg/mL、(3302.50±748.67)pg/mL、(3326.34±920.94)pg/mL],且组间差异有统计学意义(P值分别为0.002、0.007)。2)CB组NTx水平明显高于CO及CM组[分别为(58.66±14.33)ng/mL、(39.24±12.62)ng/mL、(47.71±15.49)ng/mL],且组间差异有统计学意义(P值分别为<0.001、0.047)。3)CO与CM组之间BSP及NTx水平近似,组间差异无统计学意义(P值分别为0.963、0.099)。结论血清BSP及NTX水平测定可以作为临床早期监测恶性肿瘤骨转移的特异性指标,试验方法简单,操作方便,有利于临床上广泛开展。 展开更多
关键词 骨唾液酸蛋白 Ⅰ型胶原氨基末端肽 恶性肿瘤 骨转移癌 早期监测 特异性指标
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NLR联合血清CA15-3、NGF、BSP对三阴性乳腺癌患者术后发生骨转移的预测价值 被引量:2
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作者 单世胜 王华龙 +2 位作者 王飞 王健雄 王冰 《检验医学与临床》 CAS 2023年第10期1369-1373,共5页
目的探讨中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)联合血清糖类抗原15-3(CA15-3)、神经生长因子(NGF)、骨唾液酸蛋白(BSP)对三阴性乳腺癌患者术后发生骨转移的预测价值。方法选择2017年2月至2020年3月该院收治并进行手术治疗的三阴性乳腺癌患者13... 目的探讨中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)联合血清糖类抗原15-3(CA15-3)、神经生长因子(NGF)、骨唾液酸蛋白(BSP)对三阴性乳腺癌患者术后发生骨转移的预测价值。方法选择2017年2月至2020年3月该院收治并进行手术治疗的三阴性乳腺癌患者132例为研究对象,术后随访24个月,根据患者是否出现骨转移分为骨转移组和无骨转移组。比较两组术前NLR及血清CA15-3、NGF、BSP水平,纳入临床资料,采用多因素Logistic回归分析三阴性乳腺癌患者术后发生骨转移的危险因素及建立回归预测模型,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析NLR联合血清CA15-3、NGF、BSP对三阴性乳腺癌患者术后发生骨转移的预测价值。结果术后随访24个月,根据患者是否出现骨转移分为骨转移组28例和无骨转移组104例。骨转移组术前NLR、CA15-3、NGF、BSP水平明显高于无骨转移组,差异有统计学意义(P<0.05)。骨转移组有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ期比例高于无骨转移组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,NLR、CA15-3、NGF、BSP水平升高及有淋巴结转移是三阴性乳腺癌患者术后发生骨转移的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示NLR联合血清CA15-3、NGF、BSP预测三阴性乳腺癌患者术后发生骨转移的曲线下面积最大,为0.828。结论三阴性乳腺癌术后发生骨转移患者的术前NLR、CA15-3、NGF、BSP水平升高,4项指标联合对三阴性乳腺癌患者术后发生骨转移具有较高的预测价值。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 骨转移 中性粒细胞/淋巴细胞比值 糖类抗原15-3 神经生长因子 骨唾液酸蛋白
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联合检测血清NTx和BSP对乳腺癌和肺癌骨转移的意义 被引量:21
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作者 王薇 王雅杰 傅强 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第5期478-483,共6页
目的:探讨骨代谢生化指标血清Ⅰ型胶原交联氨基末端肽(N-telopeptide of typeⅠcollagen,NTx)和骨涎酸蛋白(bone sialoprotein,BSP)的检测对肺癌和乳腺癌骨转移的临床意义。方法:选择2006年1月至2006年7月长海医院肿瘤科经病理确诊的肺... 目的:探讨骨代谢生化指标血清Ⅰ型胶原交联氨基末端肽(N-telopeptide of typeⅠcollagen,NTx)和骨涎酸蛋白(bone sialoprotein,BSP)的检测对肺癌和乳腺癌骨转移的临床意义。方法:选择2006年1月至2006年7月长海医院肿瘤科经病理确诊的肺癌或乳腺癌患者105例,分为两组,其中骨转移组50例,无骨转移组55例。应用ELISA法检测患者血清NTx和BSP浓度。结果:骨转移组患者血清NTx和BSP水平均明显高于无骨转移组(P<0.01)。NTx诊断骨转移的灵敏度和特异度分别为90.0%和67.3%,BSP诊断骨转移的灵敏度和特异度分别为84.0%和70.9%。临床发生骨相关事件(skeletal related event,SRE)的骨转移患者,血清NTx水平明显高于未发生SRE的骨转移患者(P<0.05)。在6~13个月随访期内,21例患者确诊了新发骨转移;采用Cox比例风险回归模型分析,血清NTx浓度升高提示骨转移发生的相对危险度为1.127;乳腺癌患者血清BSP增高是唯一预测骨转移的危险因素(P<0.05),其相对危险度为1.058。随访期共有33例患者死亡;无论肺癌还是乳腺癌,血清BSP增高患者的累积生存率均明显低于血清BSP正常组(P<0.05)。结论:血清NTx和BSP是诊断肺癌和乳腺癌骨转移的重要参考指标,其水平的增高是预测骨转移发生的高危因素;BSP可能是肺癌和乳腺癌患者独立预后指标。 展开更多
关键词 Ⅰ型胶原交联氨基末端肽 骨涎酸蛋白 肺癌 乳腺癌 骨转移 诊断 预后
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BSP基因RNA干扰对乳腺癌MDA-MB-231BO细胞生物学特性的影响 被引量:8
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作者 燕慧 王捷 +4 位作者 杨自飞 张宏斌 夏冰 冼江 王江涛 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期142-145,共4页
旨在研究RNA干扰(RNA interference,RNAi)抑制骨唾液酸蛋白(bone sialoprotein,BSP)基因表达后对人乳腺癌细胞MDA-MB-231BO生物学特性的影响。应用pSilencer5.1-U6Retro构建针对BSP基因的siRNA逆转录病毒重组表达质粒,将重组质粒转染29... 旨在研究RNA干扰(RNA interference,RNAi)抑制骨唾液酸蛋白(bone sialoprotein,BSP)基因表达后对人乳腺癌细胞MDA-MB-231BO生物学特性的影响。应用pSilencer5.1-U6Retro构建针对BSP基因的siRNA逆转录病毒重组表达质粒,将重组质粒转染293细胞制备病毒悬液感染MDA-MB-231BO细胞,利用嘌呤霉素筛选抑制BSP表达的乳腺癌细胞。Western blotting检测细胞内BSP蛋白表达,采用MTT法和集落形成试验检测细胞的增殖,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果显示,成功构建BSP基因RNAi稳定转染的231BO-BSP27细胞。231BO-BSP27细胞内BSP蛋白表达抑制率为69.3%,与对照组细胞相比,231BO-BSP27细胞的生长速率和克隆形成率明显降低;S期细胞数量明显减少,G0/G1期细胞增多。由此证实,逆转录病毒介导的RNAi能实现BSP基因稳定沉默,从而抑制MDA-MB-231BO细胞的生长和增殖。 展开更多
关键词 骨唾液酸蛋白 RNA干扰 增殖 细胞周期
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抗重组人骨唾液酸蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:6
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作者 王捷 刘增田 +3 位作者 杨太成 杨静 冼江 刘大志 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2006年第6期323-325,共3页
目的研制重组人骨唾液酸蛋白(rhBSP)单克隆抗体(mAb),并鉴定其特性。方法以纯化的rhBSP免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗rhBSP mAb;用亚型鉴定试剂条鉴定IgG亚类;ELISA鉴定mAb的特异性和效价。结果获得2株能稳定分泌特异性mAb的抗rh... 目的研制重组人骨唾液酸蛋白(rhBSP)单克隆抗体(mAb),并鉴定其特性。方法以纯化的rhBSP免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗rhBSP mAb;用亚型鉴定试剂条鉴定IgG亚类;ELISA鉴定mAb的特异性和效价。结果获得2株能稳定分泌特异性mAb的抗rhBSP的杂交瘤细胞系AHB1和AHB5,Ig亚类分别为IgG2a和IgG1,轻链均为κ型,其效价分别为1×10-3和1×10-7。腹水mAb经Protein A亲和色谱柱纯化后,纯度达92%以上。结论获得抗rhBSP的mAb,为进一步研究BSP的生物学功能和用于临床诊断实验研究创造了条件。 展开更多
关键词 人骨唾液酸蛋白 单克隆抗体 重组 制备 特性鉴定
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釉基质蛋白对人牙周膜细胞合成骨桥蛋白、骨涎蛋白的影响 被引量:8
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作者 杜岩 吴织芬 +3 位作者 万玲 董广英 张贤华 袁乃梅 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2004年第3期126-129,共4页
目的 :观察釉基质蛋白对体外培养的人牙周膜细胞合成骨桥蛋白、骨涎蛋白能力的影响。方法 :乙酸法提取猪釉基质蛋白 ,改良组织块法原代培养人牙周膜细胞 ,免疫细胞化学方法和图像分析方法观察细胞合成骨桥蛋白、骨涎蛋白的能力。结果 :... 目的 :观察釉基质蛋白对体外培养的人牙周膜细胞合成骨桥蛋白、骨涎蛋白能力的影响。方法 :乙酸法提取猪釉基质蛋白 ,改良组织块法原代培养人牙周膜细胞 ,免疫细胞化学方法和图像分析方法观察细胞合成骨桥蛋白、骨涎蛋白的能力。结果 :人牙周膜细胞胞浆骨桥蛋白、骨涎蛋白染色阳性 ,2 0 0、10 0、5 0mg/L釉基质蛋白作用下可以使细胞胞浆骨桥蛋白、骨涎蛋白染色不同程度地加深。人牙周膜细胞在釉基质蛋白作用下 ,最早从第 3d开始骨桥蛋白表达增加、从第 7d开始骨涎蛋白表达增加。结论 :一定浓度的釉基质蛋白在特定的时间可以促进牙周膜细胞合成骨桥蛋白、骨涎蛋白。 展开更多
关键词 牙周膜细胞 釉基质蛋白 骨桥蛋白 骨涎蛋白
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羟基磷灰石陶瓷诱导成骨细胞的研究 被引量:8
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作者 王朝元 段友容 +3 位作者 Boban Markovic C. Hala Zreiqat Rolfe Howlett 张兴栋 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期1110-1113,共4页
通过定量检测在羟基磷灰石(HA)表面生长的成骨细胞骨涎蛋白和骨钙蛋白的表达,研究了羟基磷灰石陶瓷对成骨细胞的影响.研究结果表明,随着成骨细胞培养时间的延长,在羟基磷灰石表面生长的成骨细胞骨钙蛋白和骨涎蛋白的表达量相对于对照组... 通过定量检测在羟基磷灰石(HA)表面生长的成骨细胞骨涎蛋白和骨钙蛋白的表达,研究了羟基磷灰石陶瓷对成骨细胞的影响.研究结果表明,随着成骨细胞培养时间的延长,在羟基磷灰石表面生长的成骨细胞骨钙蛋白和骨涎蛋白的表达量相对于对照组有显著增加.由于骨钙蛋白和骨涎蛋白是成骨细胞分化晚期高度表达的两种标志性蛋白质,因此其表达量的显著提高意味着羟基磷灰石陶瓷可以诱导成骨细胞的成熟.这一结果可进一步为理解HA陶瓷的生物相容性和生物活性提供分子生物学依据. 展开更多
关键词 羟基磷灰石陶瓷 成骨细胞成熟 骨钙蛋白 骨涎蛋白
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间充质干细胞的成骨细胞分化和免疫组织化学鉴定 被引量:4
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作者 蔡敏 林建立 +2 位作者 侯建明 江亚涛 晋龙 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期628-632,共5页
目的探讨脐带的间充质干细胞分化为成骨细胞的影响因素和免疫组织化学鉴定。方法收集306例冻存的健康胎儿脐带,采用华尔通胶组织块贴壁法从脐带组织中分离间充质干细胞,利用荧光显微镜观察原代细胞的细胞形态。脐带间充质干细胞的免疫... 目的探讨脐带的间充质干细胞分化为成骨细胞的影响因素和免疫组织化学鉴定。方法收集306例冻存的健康胎儿脐带,采用华尔通胶组织块贴壁法从脐带组织中分离间充质干细胞,利用荧光显微镜观察原代细胞的细胞形态。脐带间充质干细胞的免疫表型和细胞周期采用免疫组织化学检测。复苏冻存的脐带间充质干细胞,并传代培养至10代。对第10代的脐带间充质干细胞进行成骨诱导,其成骨能力分别通过钙结节和骨涎蛋白的免疫荧光检测以及茜素红染色检测来确定。结果免疫组织化学结果显示,培养的细胞高表达间充质干细胞的表面标志物CD73、CD90和CD105,但是不表达造血细胞的表面标志物CD34和CD45。复苏后细胞的存活率是90%。细胞周期显示,第10代的细胞有80%处于G0/G1期,20%处于S+G2/M期。成骨细胞刺激因子诱导干细胞的骨涎蛋白染色呈阳性,并形成矿化的钙结节。结论冻存的脐带间充质干细胞在成骨细胞刺激因子下能被诱导分化为成骨细胞,具有高度自我增殖和多向分化能力。 展开更多
关键词 间充质干细胞 成骨细胞 骨涎蛋白 细胞三维培养 免疫组织化学
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骨唾液蛋白非融合荧光蛋白载体的构建及其在特异性骨转移乳腺癌细胞中的稳定表达 被引量:3
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作者 杜红延 王捷 +3 位作者 郭勇 郑霖 杨静 刘大志 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期410-412,共3页
目的构建骨唾液蛋白(BSP)非融合荧光表达载体,建立稳定高效表达BSP和荧光蛋白的乳腺癌细胞系,为进一步研究BSP在乳腺癌细胞骨转移中的作用奠定基础。方法从构建好的pB hBSP载体中用PCR方法扩增hBSP基因,通过BglⅡ和PstⅠ两个限制性酶切... 目的构建骨唾液蛋白(BSP)非融合荧光表达载体,建立稳定高效表达BSP和荧光蛋白的乳腺癌细胞系,为进一步研究BSP在乳腺癌细胞骨转移中的作用奠定基础。方法从构建好的pB hBSP载体中用PCR方法扩增hBSP基因,通过BglⅡ和PstⅠ两个限制性酶切位点定向克隆至真核表达载体pIRES2EGFP,构建重组载体pIRES2hBSP EGFP。利用脂质体转染的方法将构建好的重组质粒转入特异性骨转移的乳腺癌细胞株MDA MB231BO中,并利用G418和流式细胞仪筛选阳性克隆。结果成功构建hB SP和EGFP非融合表达的真核表达载体pIRES2hBSP EGFP,并成功转染特异骨转移的乳腺癌细胞株,获得hBSP的稳定转染细胞株,荧光显微镜下可观察到荧光蛋白标记。结论真核表达载体pIRES2hBSP EGFP的构建及hBSP稳定转染细胞株的获得为研究BSP在乳腺癌骨转移中的作用奠定了的基础。 展开更多
关键词 骨唾液蛋白 荧光蛋白 乳腺癌细胞 基因转染 稳定表达 非融合荧光蛋白载体 特异性骨转移
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骨唾液酸蛋白(BSP)的结构与功能 被引量:5
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作者 董燕 杨连生 王捷 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2002年第3期50-53,共4页
骨唾液酸蛋白 (Bonesialoprotein ,简称BSP)是细胞外基质中的一种糖蛋白 ,主要分布在矿化组织中 ,参与骨代谢 ,但近年研究发现BSP在癌细胞的骨转移中发挥作用并对血管生成有促进作用。本文对BSP的结构与功能及研究状况作一介绍。
关键词 骨唾液酸蛋白 BSP 结构 功能 肿瘤 骨转移
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人骨唾液酸蛋白酵母工程细胞的构建与表达 被引量:4
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作者 董燕 王捷 +2 位作者 张宏斌 武捷 郑文岭 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2003年第3期109-112,共4页
目的构建表达重组人骨唾液酸蛋白 (rhBSP)的巴斯德毕赤酵母工程细胞 ,实现rhBSP的酵母胞外分泌性高表达。方法通过PCR扩增获得人BSP基因后 ,构建重组表达载体pPICZaA hbsp ,经电转化导入到毕赤酵母GS115菌中 ,获得GS115 pPICZaA hbsp... 目的构建表达重组人骨唾液酸蛋白 (rhBSP)的巴斯德毕赤酵母工程细胞 ,实现rhBSP的酵母胞外分泌性高表达。方法通过PCR扩增获得人BSP基因后 ,构建重组表达载体pPICZaA hbsp ,经电转化导入到毕赤酵母GS115菌中 ,获得GS115 pPICZaA hbsp工程菌 ,通过Zeocin高抗性筛选和摇瓶发酵筛选出高表达rhBSP的菌株 ,并进行高密度发酵提高表达量。结果rhBSP分子量接近 6 6 0 0 0 ,产物可达上清液总蛋白的 80 % ,浓度约 0 .2 4 8g L。结论基因工程菌GS115 pPICZaA 展开更多
关键词 人骨唾液酸蛋白 毕赤酵母 基因表达 发酵
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牙本质基质蛋白1、骨桥蛋白及骨涎蛋白在小鼠牙骨质形成中的组织学定位 被引量:3
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作者 李纾 潘克清 +3 位作者 葛少华 谢瑞阅 段学静 杨丕山 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2005年第1期28-32,共5页
目的:研究牙本质基质蛋白1(dentinmatrixprotein1,DMP1)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)及骨涎蛋白(bonesialoprotein,BSP)在小鼠成牙骨质细胞分化及牙骨质形成中的时空分布特点。方法:取出生后第5、10、15、25天的BALB/c小鼠36只,引颈处死... 目的:研究牙本质基质蛋白1(dentinmatrixprotein1,DMP1)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)及骨涎蛋白(bonesialoprotein,BSP)在小鼠成牙骨质细胞分化及牙骨质形成中的时空分布特点。方法:取出生后第5、10、15、25天的BALB/c小鼠36只,引颈处死,解剖分离含下颌第一磨牙区的下颌骨,新鲜配制4%多聚甲醛固定过夜,甲酸-甲酸钠复合脱钙液脱钙1~3周,常规石蜡包埋,近远中向5μm连续切片,免疫组化PV二步法检测DMP1、OPN及BSP的表达。采用CMIAS2000多功能真彩色病理图像分析系统,高倍镜下每张切片阳性部位沿牙骨质表面随机选取不相重叠的10个视野,计算机测量其积分光密度值,取其均值,计为该指标的1个标本的积分光密度值。相同指标重复3次,均值作为该指标在该标本中的表达强度,各指标在不同发育期的积分光密度值采用重复测量数据方差分析,分别进行统计学处理。结果:DMP1、OPN及BSP在小鼠成牙骨质细胞分化及牙骨质形成过程中呈先后不同的时相表达。DMP1表达最早,出生后第5天在牙囊细胞中表达阳性,一旦牙囊开始分化为牙周膜细胞、成牙骨质细胞和成骨细胞,其表达开始转为阴性;而OPN至出生后第10天出现表达,第15天达到高峰,此后持续表达至牙发育完成的第25天;BSP直到第15天开始表达,持续到第20天后开始减弱,至牙根发育第25天近阴性表达。对3种调节因子的染色积分光密度值的方差分析结果显示:除OPN在第15~25天之间无显著性差异外,其他各因子两两比较差异均具有显著性。结论:牙骨质是由不同序贯发生的多种调节信号顺序启动牙囊细胞分化成牙骨质细胞而形成,DMP1、OPN及BSP在这一过程中先后起着重要的调节作用。 展开更多
关键词 牙本质基质蛋白1 骨桥蛋白 骨涎蛋白 免疫组织化学
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牙周韧带细胞体外矿化的研究——骨唾蛋白与骨桥素在矿化过程中的表达 被引量:11
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作者 王燕 汪说之 +1 位作者 樊明文 李纾 《口腔医学纵横》 CSCD 2002年第1期11-13,I002,共4页
目的 :研究骨唾蛋白与骨桥素在体外培养的人牙周韧带细胞矿化过程中的表达。方法 :体外培养的人牙周韧带细胞 ,经地塞米松矿化液诱导 ,分别于不同的时间在相差显微镜下观察其矿化结节的形成 ,采用免疫细胞化学的方法观察骨唾蛋白与骨桥... 目的 :研究骨唾蛋白与骨桥素在体外培养的人牙周韧带细胞矿化过程中的表达。方法 :体外培养的人牙周韧带细胞 ,经地塞米松矿化液诱导 ,分别于不同的时间在相差显微镜下观察其矿化结节的形成 ,采用免疫细胞化学的方法观察骨唾蛋白与骨桥素的表达情况。结果 :矿化培养 1周细胞呈复层生长 ,骨桥素呈阳性染色 ;两周细胞密集呈结节状 ,骨唾蛋白与骨桥素均为阳性 ,胞浆染成黄褐色 ;3周出现矿化结节 ,矿化以后骨唾蛋白与骨桥素保持稳定表达。结论 :牙周韧带细胞在适当的条件下可以向成骨细胞表型分化 ,表达矿化相关蛋白 ,形成矿化结节。 展开更多
关键词 牙周韧带细胞 矿化 骨唾蛋白 骨桥素 牙周病
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人骨唾液酸蛋白在巴斯德毕赤酵母中的高效分泌表达 被引量:2
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作者 董燕 王捷 +2 位作者 杨连生 张宏斌 郑文岭 《华南理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第1期26-29,共4页
以PCR方法扩增人bsp基因 ,与分泌型表达载体 pPICZαA重组 ,重组质粒经电击转化毕赤酵母GS115菌株 ,获得的GS115 /pPICZαA_hbsp表达菌株能高效分泌表达rhBSP .SDS_PAGE和Westernblot分析结果表明 ,产物的分子质量接近 6 6ku ,能发生特... 以PCR方法扩增人bsp基因 ,与分泌型表达载体 pPICZαA重组 ,重组质粒经电击转化毕赤酵母GS115菌株 ,获得的GS115 /pPICZαA_hbsp表达菌株能高效分泌表达rhBSP .SDS_PAGE和Westernblot分析结果表明 ,产物的分子质量接近 6 6ku ,能发生特异性抗原 展开更多
关键词 人骨唾液酸蛋白 巴斯德毕赤酵母 基因表达 分泌型表达载体 PCR方法 抗原-抗体反应
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