毛叶海棠(Begonia cathayana Hemsl)的组织培养和体细胞胚的发生

取毛叶海棠的叶片作外植体 ,接种于 8种 IAA、2 ,4- D、6 - BA浓度配比不同的 MS培养基上 ,45 d后 ,含有 IAA10 mg/ L 和 6 - BA1ml/ L 的培养基上获得了胚状体。此培养基即为毛叶海棠胚状体诱导的最佳培养基。解剖观察表明胚状体源于叶表皮单细胞的垂周分裂。毛叶海棠胚状体的诱导需要适当浓度的 IAA和 6 - BA相互配合。相同的外植体在相同诱导条件下既可发生愈伤组织又可发生胚状体 。

黄花倒水莲(Polygala fallax Hemsl)组培快繁技术研究

以当年生黄花倒水莲幼嫩带腋芽茎段作为外植体,开展组织培养试验研究。结果表明:最佳外植体诱导培养基为1/2 MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,诱导率可达95.1%;最佳增殖培养基为WPM+BA 1.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L,增殖系数为6.12,周期为25 d,不定芽生长状况好;最佳生根培养基为1/2 WPM+IBA0.1 mg/L+ABT0.4 mg/L,生根率为95.67%;以泥炭土∶黄泥土∶珍珠岩(2∶1∶1)为移栽基质,移栽成活率可达92.6%,苗木长势好,叶色绿。

药用植物单面针离体胚培养的研究

为了满足市场对单面针Zanthoxylum dissitum Hemsl资源的需求,解决单面针自然繁殖率低的问题,采用L9(34)正交设计,以单面针种子胚为外植体进行胚培养.结果表明:6-BA、NAA、消毒时间3因素的最佳水平组合为MS+6-BA 1 mg/L+NAA 0.4mg/L+消毒时间8 min,发芽率可达86.7%.

蚬壳花椒组培苗的生根试验

以蚬壳花椒无菌组培苗为试材,采用单因子、双因子以及正交试验研究IBA、NAA、IAA、活性炭、基本培养基(大量元素、微量元素、有机质)对组培苗生根的影响。试验结果表明,基本培养基、IBA、NAA对不定报的分化有较大影响,蚬壳花椒组培苗适宜的生根培养基为1／3MS+IBA 0．3 mg·L-1+NAA 0．05 mg·L-1．生根率达78％,移栽成活率可达95％。

酸碱胁迫对蚬壳花椒组培苗内源激素的影响

为了研究不同酸碱度对蚬壳花椒组培苗的影响，在MS基本培养基上进行了pH值分别为2、3、4、6、8、10、11．5等不同酸碱度的胁迫处理，用酶联免疫法（ELISA）测定其在不同处理下的吲哚乙酸、脱落酸、赤霉素、玉米素核苷这4种内源激素含量的变化．结果表明：组培苗在pH值为3～8的范围内基本能正常生长，而pH值为2、10、11．5的处理明显受到伤害；4种内源激素含量对于不同的胁迫处理均呈现出一定的变化，pH值为6时，吲哚乙酸含量高于其它处理，其变化与脱落酸含量变化呈相反的趋势；玉米素核瞢的含量在2～3d时达到高峰，处理后期pH值为6的处理含量最高；赤霉素含量总体上呈波浪状上升的趋势．

鄂西红豆离体培养及植株再生研究

【目的】对外植体采用特殊处理方法,并对不同培养时期的基本培养基进行调整,以建立高效、快速、繁殖系数高的鄂西红豆再生技术体系。【方法】以成熟度为80%的鄂西红豆种子为外植体,通过向培养基中添加不同质量浓度和配比的植物生长调节物质,筛选适宜的芽诱导培养基、继代增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基,并对诱导生根培养的试管苗进行炼苗移栽,观察其成活率。【结果】最适芽诱导培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋KT0.5mg/L＋NAA 0.5mg/L＋维生素B10.1mg/L＋蔗糖30g/L＋琼脂6.5g/L＋活性炭1.5g/L,诱导率达85%;最适芽继代增殖培养基为WPM＋6-BA 1.5 mg/L＋KT 0.3 mg/L＋TDZ 0.02 mg/L＋NAA 0.5 mg/L＋蔗糖30g/L＋琼脂6.5g/L＋活性炭1.5g/L;无根苗壮苗培养基为WPM＋NAA 0.5 mg/L＋IBA 1.0 mg/L＋IAA 1.0mg/L＋蔗糖30g/L＋琼脂6.5g/L＋活性炭1.5g/L。当无根苗生长到4-5cm时形成完整植株并转接到生根培养基上诱导生根,最适生根培养基为1/2WPM＋IBA 0.5mg/L＋NAA 1.5mg/L＋新型基因诱导生根剂0.05mg/L＋蔗糖30g/L＋琼脂6.5g/L＋活性炭1.5g/L。【结论】建立的鄂西红豆再生技术体系可获得75%-85%的正常萌芽,生根率达85%以上,瓶苗移栽成活率达90%。

峨眉山珍稀植物鹅掌楸组培过程中的膜脂过氧化

鹅掌楸(Liriodendron chinense(Hemsl.)Sarg.)是中国特有珍稀树种。鉴于目前还鲜有野生鹅掌楸组培过程生理生化变化的相关报道。本研究以峨嵋山野生鹅掌楸茎尖芽为外植体进行组织培养,并对其继代培养再生过程中超氧阴离子自由基(O2-)、过氧化氢(H2O2)和丙二醛(MDA)含量的变化进行了测定。研究结果表明,随着培养时间的延长,植物体中O2-和MDA含量呈现逐渐增加的变化趋势。这表明在连续继代培养条件下,植物体内活性氧会积累,引起膜脂过氧化。H2O2含量呈"S"形曲线变化,并随着再生芽的分化而上升,因此,H2O2不仅参与了膜脂过氧化过程,还可能作为一种细胞信号物质参与诱导细胞分化和再生芽的形成。该研究也为进一步用组织培养法保存峨眉山珍稀植物鹅掌楸种质资源提供了参考。

灯台树组培快繁技术研究

以灯台树带顶芽的茎段为外植体,进行了组培快繁研究。结果表明,启动培养基采用WPM+BA0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L+GA31 mg/L为宜;继代增殖培养基采用M+BA 1 mg/L+IBA 0.2 mg/L+GA32 mg/L为宜,增殖系数达4.4;生根培养则以1/2M+IBA 3 mg/L配合10 d暗培养效果最好,生根率达60.0%。

总序香茶菜的组织培养与快繁研究

目的对总序香茶菜进行组织培养和离体快速繁殖。方法以总序香茶菜带芽茎段为外植体,在附加有不同种类和不同浓度激素的MS培养基上进行培养。结果最佳芽诱导培养基:MS+BA0.05～0.5mg/L+NAA0.01～0.05mg/L;最佳芽增殖培养基:MS+BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L(或IAA0.01mg/L);最佳生根培养基:MS+NAA0.1mg/L+活性炭0.05%;最佳愈伤组织诱导与生长培养基为:MS+2,4-D1.0～2.0mg/L+BA0.1～0.2mg/L。结论成功建立了快速无性繁殖系。

蚬壳花椒资源繁育与有效成分研究进展

总结了蚬壳花椒的一般特性及生长发育特征、地理分布差异、组织培养、扦插嫁接、有性繁育、遗传多样性分析、药用成分的种类、有效成分的分离纯化方法、有效成分的鉴定方法等方面的研究,提出了蚬壳花椒渐危的主要原因及其具体解决措施。认为蚬壳花椒种子资源库的建立,有性人工繁育,GAP规范化栽培研究,主要药用成分的药理、药剂、药代动力学考察,新的药用成分的分离、纯化、鉴定,药用成分的合成途径及其基因组学研究等将成为未来研究的方向与重点。

通城虎组织培养技术

以通城虎植株幼嫩茎段为外植体,研究不同消毒方式对茎段污染率、褐化率及不同分化培养基、生根培养基与移栽基质对通城虎丛生芽分化、生根及移栽的影响。结果表明,采用75%酒精浸泡10~30 s、0.1%升汞溶液浸泡处理8 min对通城虎幼嫩茎段的消毒灭菌效果相对较好;通城虎诱导分化的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+KT 1.0 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L,通城虎丛生芽分化率相对最高,达100%;通城虎增殖培养的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L;诱导生根的最佳培养基为1/2 MS+IBA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,其生根率相对最高,为96.3%,且长出的根系健壮,数量适中,根长1.5 cm左右;炼苗移栽至轻基质中,成活率达96.6%。本研究结果为通城虎组培苗工厂化育苗和产业化生产提供技术支持。

檫木组培快繁试验

以树龄20 a以上的檫木基部萌条为外植体,对其进行诱导试验,增殖培养及生根培养试验,结果表明,诱导培养MS+6-BA 0.5～1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L,诱导率78%,增殖培养MS+6-BA 0.5～0.8 mg/L+IBA 0.1 mg/L,增殖倍数4,生根培养1/2 MS+IAA 0.1～0.2 mg/L,生根率33%。

香花槐组织培养的初步研究

本文研究了香花槐以MS培养基作为基本培养基的组织培养,着重分析了在培养过程中,培养基中不同激素成分和含量对诱导、增殖及生根的影响。

杂交鹅掌楸组培技术研究

对园林植物杂交鹅掌楸组培技术进行研究。结果表明:最适诱导培养基为:MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L+GA_3 0.5 mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂粉;最佳增殖培养基为:MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂粉,增殖系数达3.0以上,适宜的光照为:1 000～2 000 lx;适宜的生根培养基为:1/2 MS+IBA 0.05 mg/L+2%蔗糖+0.6%琼脂粉,生根率达到67%以上,生根苗平均根数2.3条。

黄花倒水莲研究进展

黄花倒水莲主要分布于我国湖南、广西、广东、福建和云南等地,是一种珍贵的药用植物。对近年来黄花倒水莲在化学成分、药理活性和人工繁殖等方面的研究进行了概述,提出了存在的问题,给出了一定的建议,以期为该植物进一步的合理开发利用提供参考。

不同激素组合对诱导滇龙胆顶芽及腋芽产生不定芽的研究

用滇龙胆的顶芽及侧芽为外植体,以MS培养基为基本培养基,以6-BA/NAA和KT/IAA两组不同浓度组合进行对比实验,研究诱导滇龙胆顶芽及侧芽萌发产生不定芽的最佳条件。发现在诱导率、产生的不定芽数、长势及不定芽出现时间等方面上,BA/NAA两种激素的互作用效果明显优于KT/IAA。其中以MS+BA3.0mg/l+NAA1.5—2.0mg/l的培养基上诱导率较高,可达100%,且小植株生长茁壮,叶色浓绿,大部分在10d左右可萌发出不定芽,产生不定芽数达7—9个。

傅里叶变换红外光谱(FTIR)技术对滇龙胆组织培养的研究

野生药用植物资源的不断减少,使得寻找其原植物的合适替代品显得尤为重要。利用组培材料代替野生药用植物作为药源已取得重大进展,但利用傅里叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)技术筛选合适的组培材料作为野生药用植物替代资源方面的应用鲜有报道。本研究采用FTIR结合偏最小二乘判别分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)对滇龙胆组织培养形成的愈伤组织(肉质部、茎、叶)、增殖苗(肉质部、茎、叶)、生根苗(根、茎、叶)进行比较。结果显示:(1)从原始FTIR光谱图上看,滇龙胆肉质部和根部峰形相似,茎和叶峰形相似;(2)二阶导数光谱图扩大了样品间的差异。在龙胆苦苷的主要吸收峰1612 cm-1附近,吸收峰强度依次为:生根苗叶>增殖苗叶和生根苗茎>增殖苗茎>愈伤组织叶,愈伤组织茎及肉质部、增殖苗肉质部和生根苗根部在该处无吸收峰;(3)PLS-DA得分图表明,同一组培阶段相同组织部位样品聚集在一起,而愈伤组织、增殖苗、生根苗及其各组织部位能够较好的分开。其中:肉质部、根部与茎叶之间距离较远,表明其化学成分和含量可能差异较大;肉质部和根部样品间距离较近,茎和叶样品间距离也较近。二阶导数光谱图显示,组培材料有望代替其原植物满足药用需求;若以龙胆苦苷含量为评价对象,生根苗叶则可能具有更大的开发潜能,有望代替野生滇龙胆以缓解其资源稀缺局面。本研究结果表明,采用傅里叶变换红外光谱法可以简便有效地对药用植物不同组培阶段不同组织部位的替代潜力及开发利用进行初步评估。

利用响应面法优化毛叶木姜子茎段腋芽诱导条件

为了最大限度提升毛叶木姜子茎段腋芽萌发有效芽的诱导率,降低褐变对有效芽的影响,本研究采用单因素试验和Box-Behnken响应面法,探究不同浓度的6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、苯基脲类衍生物(TDZ)和聚乙烯比咯烷酮(PVP)对茎段腋芽诱导褐化率和有效芽诱导率的影响。结果表明,3个因素对腋芽诱导褐化率的降低程度为PVP>TDZ>6-BA,对提升有效芽诱导率的促进程度为6-BA>TDZ>PVP;最佳的茎段腋芽诱导培养条件为B5+6-BA 1.80 mg/L+TDZ 0.04 mg/L+PVP 1.30 g/L,最优有效芽诱导率为79.39%,褐化率为15.71%。实际验证结果有效芽诱导率为77.78%,褐化率为17.78%。本研究结果不仅为毛叶木姜子茎段腋芽诱导培养条件提供了最优路径,也为后续培养条件的优化拓宽了可靠的技术手段。