设施栽培番茄灰霉病(Botrytis cinerea Pers)发生规律初步研究

为了掌握番茄灰霉病的发生发展规律。通过单体大棚和联体大棚栽培试验,研究大棚温湿度变化、番茄灰霉病发生时间和消长动态,并分析了番茄灰霉病发生与生育期、温湿度和叶花果病情的关系。从3月初至6月中旬,单体大棚和联体大棚湿度变化均呈两谷三峰的趋势,而温度变化表现为跳跃式波动。联体大棚相对湿度较单体大棚变化幅度大,且相对湿度略低。联体大棚温度变化比单体大棚平稳,且略低于单体大棚。早播、中播和晚播番茄的病害初发期分别为4月2日、4月7日和5月7日,中播和晚播番茄的最高病指明显低于早播番茄。番茄移栽越早,发病越早,病情越严重。单体大棚番茄灰霉病发病高峰期在4月底~5月上旬,集中出现在5月初。联体大棚番茄各轮花果灰霉病的发病高峰期在4月中下旬~5月中下旬,集中出现在4月底~5月初。10~15℃中低温和90%以上的相对湿度最利于病害发生。叶病发生情况与花、果病发生无显著相关,而花、果病的发生显著正相关。该研究为建立番茄灰霉病预测模型奠定了基础。

Biological Characteristics of Ginseng Botrytis cinerea Pers

[ Objective ] The study systematically studied the biological characteristics of ginseng Botrytis cinerea Pers. [ Method ] The pure pathogenic fungus was isolated from ginseng B. cinerea collected in the field by tissue segregation and purification cultivation. Subsequently, using PDA medium plate culture method, the effect of various culture conditions on mycelium growth and sporulation of ginseng B. cinerea was detected. [ Result] The optimum temperature for mycelium growth and sporulation of B. cinerea was 25 ℃. The appropriate temperature for conidia germination ranged from 20 to 25 ℃. And the optimum pH value for mycelium growth and conidia germination was 6.0. The optimum carbon source was sucrose, followed by glucose and fructose. The optimum nitrogen source was peptone, fol- lowed by beef extract, yeast extract, alanine and ammonium nitrate. Among the media, the growth of mycelium cultured on PDA medium was the fastest with the production of gray mycelium and dense colonies. Lethal temperatures for sclerotia, mycelium and conidia were 60, 55 and 50 ℃, respectively. [ Conclusion] The study provided the scientific basis for the research on the incidence law of B. cinerea and its control.

T90-1木霉菌的筛选和对草莓灰霉病菌作用机制的研究

木霉菌 (Trichoderma)作为一种重要的生防因子 ,可以产生几丁质酶降解植物的多种病原真菌细胞壁。利用低能离子束注入木霉菌使其产生变异 ,再通过初筛选和复筛选两个过程 ,获得T90_1木霉菌株 ,并用草莓灰霉病菌(BotrytiscinereaPers.)来检验T90_1防治真菌病害的能力。发现该菌株通过侵染、缠绕等多种重寄生方式 ,并分泌降解病原真菌细胞壁的物质 ,使病原菌原生质外渗 ,改变细胞内有序的代谢状况 ,从而抑制或杀死病原菌。初步揭示该菌株抗真菌的相关机制。

油菜素内酯诱导黄瓜幼苗抗灰霉病研究

采用根际注射结合叶面喷施的方法,研究了油菜素内酯(Brassinolide,BR)对黄瓜灰霉病的诱抗作用及其生理机制.结果表明,BR降低了黄瓜幼苗的病情指数,最高幅度达28.4%,提高了苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)活性,增加了木质素和类黄酮含量,促进了灰霉病菌侵染下黄瓜幼苗的生长发育,壮苗指数最高增加了23.4%.说明BR能诱导黄瓜幼苗对灰霉病的抗性,且最佳处理浓度为0.05mg/L.

植物内生枯草芽孢杆菌Em7菌株对葡萄灰霉病菌的抑菌活性

通过室内皿内对峙抑菌试验、分生孢子萌发抑制试验、离体果实接种试验以及电镜技术,研究测定了分离自小麦根部的植物内生枯草芽孢杆菌Em7菌液对葡萄灰霉病菌Botrytis cinerea Pers.的抑制作用及抑菌机理。结果表明:用Em7菌液处理葡萄灰霉病菌后,在PDA培养基上形成了明显的抑菌圈,直径达2.81 cm;菌液对分生孢子萌发的抑制率达到88.65%;经Em7菌液处理后,离体果实病情指数明显低于空白对照,相对防治效果达到78.92%。电镜观察发现,处理组菌丝生长异常,体表凹凸不平,局部膨大成结或缢缩,分枝变多,菌丝体内液泡增多,细胞壁增厚,细胞膜透性发生变化。表明植物内生枯草芽孢杆菌Em7菌株对葡萄灰霉病菌有良好的抑制作用,并且可以有效控制葡萄灰霉病的发生。

摘花与套袋防治黄瓜灰霉病效果研究

田间试验研究结果表明,灰霉病菌对黄瓜瓜条侵染部位主要为开败的花瓣,占总侵染数的90 .2 %～93.0 % ,侵染柱头及花萼占6 .9%～9.3%。首次提出摘花及套袋防治黄瓜灰霉病新技术,对黄瓜灰霉病防治效果分别为80 .3%～94 .7%和6 1.4 %～95 .6 %。开花至花败后1～2d及花前至开花期分别为摘花和套袋防治黄瓜灰霉病最佳时期。开花至花败后1～2d摘花对黄瓜瓜条生长发育无明显负作用,且化瓜率降低18.0 %～2 0 .6 %。黄瓜瓜条不同发育时期套袋均表现增产效应,瓜条长增加7.4 %～10 .3% ,瓜条重量增加6 .7%～10 .8%。花败前套袋化瓜率降低11.3%～30 .2 % ,畸形瓜率降低4 1.2 %～6 1.6 %。

灰霉病原菌对速克灵的抗性监测

经从山西晋中、晋南、晋东南、晋北4地区22个市县采集分离到的188个灰霉病菌菌株[BotrytiscinereaPers.]对速克灵的抗性鉴定,得到速克灵敏感菌株76个,抗性菌株112个;并对4地区的抗性频率进行了测定。毒力测定结果显示:敏感菌株的平均EC50值为0 2307μg·mL-1,EC90值为3 1898μg·mL-1;抗性菌株的平均EC50值为2 7921μg·mL-1,EC90值为16 7015μg·mL-1,抗性倍数为12 10倍。结果表明,灰霉病菌对速克灵的抗性表现为低水平抗性。且MIC的室内测定表明,速克灵抗性菌的MIC值均小于25μg·mL-1,这与生产中灰霉病菌对速克灵的低水平抗性是一致的。

灰霉病菌对三种杀菌剂的抗性表现型分布及稳定性测定

采用最低抑制浓度法(MIC)和菌落直径法,对采自山西晋中、晋南、晋东南和晋北4个地区的188个灰霉病菌株对3种杀菌剂的抗性表现型和稳定性进行了测定,旨在了解灰霉病菌的抗药性状况和预测其抗性发展趋势。结果表明:对多菌灵的抗性表现型可分为敏感(S)、低抗或中抗(RM)和高抗(R),对腐霉利和乙霉威可分为敏感(S)和抗性(R)。以对多菌灵、腐霉利和乙霉威的抗性为序,检测出8种不同类型的抗性表现型,即RRR、RRS、RSR、RSS、RMRS、RMSR、RMSS和SSR。各表现型的分布频率随各地区用药历史和水平的不同而变化,并与抗性监测结果相一致。对55个不同抗性表现型的单孢菌株的稳定性测定结果表明:继代无药培养10代后,以RRR和RSS型表现最稳定,而其余类型菌株均不同程度发生了变异,尤其是RMSS和RMRS型菌株100%发生了变异,抗性表现型不稳定的菌株占52.7%。对多菌灵的抗性变化趋势是由敏感向低抗、再向高抗发展;对腐霉利的抗性变化主要是由抗性转变为敏感;而对乙霉威的抗性则相对比较稳定。

木醋液对人参黑斑病菌和人参灰霉病菌的抑菌作用

目的:生产上用于生物防治人参黑斑病菌和灰霉病菌的药剂种类较少,本试验为将木醋液作为一种新型植物源杀菌剂提供理论依据。方法:采用菌丝生长速率法和孢子萌发法,测试了木醋液对人参黑斑病菌和灰霉病菌的离体抑菌活性。结果:木醋液的浓度在3.0%及以上时,对人参黑斑病菌的菌丝生长抑制率为100%,而木醋液的浓度在2.25%时,菌丝生长抑制率和孢子萌发抑制率分别为70.68%和84.47%;木醋液的浓度在2.25%及以上时,对人参灰霉病菌的菌丝生长抑制率和孢子萌发抑制率均为100%。结论:2.25%以上浓度的木醋液可作为生物防治人参黑斑病菌和灰霉病菌的药剂,为进一步田间药效试验奠定了基础。

天津市茄子灰霉病菌的抗药性检测

从天津市茄子保护地中分离出１２２个茄子灰霉病菌株中，多菌灵的抗性菌占４１０％，且多为高抗菌株；多菌灵与乙霉威间表现负交互抗性关系；速克灵和扑海因的抗性菌比率为２７９％，均为低抗水平，ＥＣ５０为２３０１１２０３８１０μｇ／ｍＬ，两种药剂存在交互抗性；对多菌灵、速克灵、扑海因均有抗性的菌株占供试菌株的２７９％，均敏感的菌株占５９０％，对多菌灵有抗性而对速克灵和扑海因敏感的菌株只占１３１％。

灰霉病原菌对多菌灵的抗性监测

对从山西各地数十县市采集分离到的188个灰霉病菌菌株[Botrytis cinerea Pers.]对多菌灵的抗性进行了监测。毒力测定结果显示:敏感菌株的平均EC_(50)值为0.0428μg·mL^(-1),EC_(90)值为0.1280μg·mL^(-1);中抗菌株的平均EC_(50)值为11.2415μg·mL^(-1),EC_(90)值为128.4351μg·mL^(-1),中度抗性菌株的抗性倍数为262.7倍;由于大多数高抗菌株的抗性太高,无法测得其EC_(50)值,但实验表明,EC_(50)值均大于50μg·mL^(-1),且大部分高抗菌EC_(50)值大于100甚至500μg·mL^(-1),即抗性倍数在1000倍以上。山西各地灰霉菌对多菌灵的抗性均较为严重,晋中、晋南、晋东南和晋北的抗性频率分别为86％、87.2％、93.5％和100％,除晋北高抗菌株频率较低外(33.3％),其它地区高抗频率均在50％以上。从各地区的抗性情况看,晋南和晋东南较重,晋中和晋北相对则较轻。

苍耳提取物对番茄灰霉病菌抑制机理的研究

以番茄灰霉病菌为供试材料,对苍耳提取物的抑菌机理进行了研究.结果表明:苍耳提取物对番茄灰霉菌的菌丝生长、分生孢子的形成和萌发都具有较强的抑制作用,当处理浓度为30 mg/mL时,苍耳提取物对番茄灰霉菌菌丝生长的抑制率达78.1%,对分生孢子形成和萌发的抑制率分别为85.1%和77.4%.苍耳提取物能引起番茄灰霉菌菌丝细胞膜透性发生变化,造成菌丝体内含物的渗漏,从而导致液体培养基电导率增加.用苍耳提取物处理番茄灰霉病菌后,可使菌丝体可溶性蛋白含量下降.

创制杀菌剂啶菌恶唑的生物活性及应用研究(Ⅱ)黄瓜灰霉病

啶菌恶唑是一种结构新颖、作用方式独特的新型杀菌剂,具有保护、治疗效果及良好的内吸传导性。对子囊菌、担子菌和半知菌引起的多种植物病害具有良好的防治作用。啶菌恶唑对黄瓜灰霉病具有很高的杀菌活性,室内离体试验结果啶菌恶唑对黄瓜灰霉病 (Botrytis cinerea Pers) 的EC50值为0.199μg/ml;1998～2002年多点的田间小区试验结果表明:啶菌恶唑对黄瓜灰霉病具有良好的防治效果,在200～400 g a.i./hm2处理剂量下、施药2～3次、间隔期6～8d可有效控制黄瓜灰霉病的发生与危害。防效优于目前生产上推广使用的多菌灵、腐霉利、菌核净、嘧霉胺等常规杀菌剂。

黄瓜灰霉病菌对多菌灵、速克灵及乙霉威的抗性检测

为了明确山西省晋中地区黄瓜灰霉病菌对多菌灵、乙霉威及速克灵的抗性水平,运用组织分离法从太谷、祁县和平遥的罹病黄瓜上分离到30个灰霉病菌菌株(Botrytis cinerea Pers.),并用最低抑制浓度法(MIC)和菌落直径生长法分别测定了这30个菌株的抗性频率和抗性水平。结果表明,30个菌株对乙霉威、多菌灵和速克灵的抗性频率分别为70%,80%和90%;3种杀菌剂敏感菌株的平均EC50分别为0.036 9,0.057 4,0.269 2μg/mL;3种杀菌剂抗性菌株的平均抗性倍数分别为66.0倍、421.5倍和55.3倍。表明山西晋中地区黄瓜灰霉病菌对乙霉威和速克灵的抗性达到中抗,对多菌灵的抗性为高抗。建议在该地区生产中停止使用多菌灵,减少使用乙霉威和速克灵或与其他药剂混合使用。

绿色木霉HT-01的生物学特性和抑菌特性

从淮安市城南栽培番茄的菜园土中分离出绿色木霉HT-01,研究不同培养条件对该木霉菌丝生长和孢子产生的影响,以及该木霉对番茄灰霉病的抑制效果。结果显示,25℃、pH为5时最有利于菌丝生长和产孢;葡萄糖和蔗糖为菌丝生长和产孢的最佳碳源;光照处理对菌丝生长影响不明显,但明显促进孢子产生;菌株在玉米粉培养基上生长最快,但在纯糠培养基上产孢量最大。木霉HT-01对番茄灰霉病(Botrytis cinereaPers)的抑制率为0.452±0.020,用木霉HT-01孢子悬浮液喷布番茄叶面和灌根处理接种灰霉病菌的番茄幼苗,使叶片感病率分别降低38.1%和42.1%,植株感病率分别降低15%和20%。

蛇床子提取物对番茄灰霉病菌的抑制效果

为研究蛇床子提取物对番茄灰霉病的抑菌效果及抑菌活性的稳定性,以番茄灰霉病菌作为供试菌种,用蛇床子提取物作为抑菌剂,采用生长速率法测定其抑菌效果。结果表明,蛇床子不同溶剂提取物对供试菌种均表现出抗菌效果,并筛选出最佳提取溶剂为乙醇(φ=95%),其抑菌率达到76.92%;提取时间和方式是超声提取30min,抑菌率达到78.87%,超声波提取10、60min与震荡1、2、3d变化不大;在不同质量浓度下测定蛇床子抑菌效果,当提取物质量浓度为20g.L-1时,接菌后3.5d菌丝生长抑制率可达到最大值,为77.35%;蛇床子提取物抑菌活性的试验中,蛇床子在-20℃和100℃时抑菌活性低于0～80℃处理;蛇床子的光稳定性在光照超过48h之后抑菌活性有所下降;蛇床子的有效保存时间在0d最大,以后逐渐降低,超过25d抑菌率明显下降。因此,蛇床子提取物对番茄灰霉菌的最佳抑菌条件是用乙醇(φ=95%)提取,超声波提取30min,质量浓度为20g.L-1,避光保存于4℃的冰箱中,保存时间不超过25d。

山西省灰霉病菌对乙霉威的抗性监测

对分离到的188个灰霉病菌菌株[BotrytiscinereaPers.]进行了乙霉威的抗性监测。用MIC法测出乙霉威敏感菌株114个,抗性菌株74个,并测定了4地区的抗性频率。毒力测定结果显示:敏感菌株的平均EC50值为0 0085μg·mL-1,EC90值为0 2596μg·mL-1;抗性菌株的平均EC50值为1 5563μg·mL-1,EC90值为3 0512μg·mL-1;抗性菌株的抗性倍数为183 09倍。晋北、晋中、晋东南和晋南的抗性频率分别为0%、26 0%、51 6%和52 3%。从山西省四大地区抗性监测结果看,晋南和晋东南抗性较强,晋中和晋北则相对较弱。

辽宁树莓灰霉病发生危害及病原鉴定

首次对辽宁地区树莓灰霉病进行了调查、采样,并将病菌分离纯化。根据病害症状特点、病菌形态特征、培养性状和致病性测定等进行鉴定。结果表明:树莓灰霉病是由灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea Pers.)侵染所致。

EMS离体诱变及抗草莓灰霉病愈伤组织的筛选

用甲基磺酸乙酯(EMS)处理草莓愈伤组织后通过草莓灰霉病病原毒素(Toxin)离体筛选获得抗病愈伤组织并诱导成苗。EMS诱变处理‘幸香’草莓离体叶片产生的愈伤组织,用经毒力检测的草莓灰霉菌毒素粗提液进行离体筛选,通过在愈伤组织继代培养中附加不同浓度毒素粗提液,以确定适宜的抗病选择压,获得抗灰霉病突变体材料。结果表明,将愈伤组织直接进行EMS处理的成活率高于将愈伤组织切割成小块继代培养后再经EMS处理的愈伤组织;且0.2%EMS处理1h为最佳选择。在含80%毒素粗提液的培养基中培养10 d为抗性筛选的适宜选择压。诱变处理后的867块愈伤组织,在经不连续二次筛选后有195块成活,成活率22.5%,其中有82块再生出了不定芽,再生率为42.1%。不定芽经生根后移栽至田间进一步进行抗性鉴定。

苦参提取物抑制番茄灰霉病菌活性的研究

以苦参提取物做为抑菌剂,采用生长速率法和悬滴法,室内测试不同浓度（1,5,10,20g·L-1）苦参提取物对番茄灰霉病菌的抑菌活性。结果表明：不同苦参提取物浓度对番茄灰霉病菌菌丝均具有抑制作用,且作用强度随浓度增加而增强。接菌后4d,20g·L-1苦参提取物处理的菌丝抑制率达92.14%;苦参提取物对病菌孢子萌发抑制作用较强,且随着提取物浓度的增大,萌发抑制作用增强。20g·L-1苦参提取物处理的孢子萌发抑制率为97.46%,且均与对照差异达显著水平。不同温度、pH值、保存时间对苦参提取物抑菌的影响结果表明：在-20~100℃,随着处理温度升高,其抑菌活性下降显著,100℃处理时抑菌率降至62.43%;pH值5～9抑菌活性最高且变化较小,pH值为11时,抑菌率下降到71.07%;在4℃下保存5d与0d的抑菌率无差异,随着保存时间的延长,抑菌率逐渐降低,超过21d抑菌率显著下降。