肉毒杆菌B诱导大鼠干眼模型中泪腺Lacritin蛋白表达的研究

目的建立肉毒杆菌B诱导大鼠干眼模型,通过观察泪腺Lacritin蛋白表达变化,初步探讨其在干眼症中的作用机理。方法 30只(30眼)健康8周雌性SD大鼠,随机分为2组,20只为实验组,10只为对照组。实验组右侧泪腺注射肉毒杆菌B 0.1 mL,对照组右侧泪腺注射生理盐水0.1 mL。分别于术前1 d及术后3 d、7 d、14 d、28 d、42 d观察基础泪液分泌量、角膜荧光染色。通过免疫组织化学染色和Western blot方法定性、定量分析Lacritin蛋白表达变化。结果实验组从术后3 d时出现泪液分泌减少,实验组为(2.56±0.72)mm,对照组为(3.04±0.72)mm,组间差异无统计学意义(P>0.05);实验组术后7 d、14d、28 d时分别为(2.03±0.86)mm、(2.01±0.78)mm、(1.04±0.46)mm,对照组分别为(3.01±0.42)mm、(2.78±0.54)mm、(3.00±0.21)mm,2组间差异均有统计学意义(均为P<0.05);在28 d实验组泪液分泌减少达到最低(1.04±0.46)mm;42 d后泪液分泌恢复,与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。实验组角膜荧光染色3 d时出现,持续到42 d,除术前1 d和术后3d外,余时间点与对照组评分差异均有统计学意义(均为P<0.05)。实验组泪腺组织Lacritin蛋白含量检测显示:3 d开始减少,7 d达到最低,28 d时含量仍呈低表达,42 d开始恢复;对照组Lacritin蛋白含量各时间点未出现变化。结论泪腺注射肉毒杆菌B可以成功诱导大鼠炎症干眼模型,Lacritin蛋白的减少与眼表损坏有密切关系。

B型肉毒毒素中毒的实验诊断及分析

目的:于2003年初,在江苏地区,因食入自制豆酱后,引起家庭内食物中毒病因的检测。方法:由临床医生依据患者的主诉和症状,初步判定为疑似食物中毒,病因不明。经过流行病学调查,收集患者进食的剩余食品,样品经过处理,进行肉毒毒素的毒力测定试验,肉毒毒素的分型试验以及肉毒梭菌的分离和培养试验。结果:测定自制豆酱中肉毒毒素含量LD50为2万单位;所检出的毒素为肉毒毒素B型。结论:综合临床诊断,流行病学调查资料和实验诊断结果,推断此次食物中毒的病因为自制豆酱中的B型肉毒毒素。

肉毒杆菌B诱导大鼠干眼模型中泪腺炎症因子表达研究

目的: 建立肉毒杆菌B诱导大鼠炎症干眼模型,通过观察泪腺炎症因子表达变化为干眼病实验研究提供实验依据。方法: 健康8周龄雌性SD大鼠,30只,随机分为2组,20只为实验组,10只为对照组。右侧泪腺注射肉毒杆菌B0.1mL(20mU),生理盐水0.1mL。分别于实验前1d及实验后第3d;1,4,6wk,观察基础泪液分泌量、角膜荧光染色,并且酶联免疫吸附试验(ELISA)检测泪腺组织中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和巨噬细胞移动抑制因子(MIF)变化。结果: 术后实验组从第3d时出现泪液分泌减少,4wk达到高峰,6wk后恢复;角膜荧光染色第3d时出现,持续6wk;泪腺组织IL-1β从第3d开始出现增加,持续6wk;TNF-α表达水平未增加,MIF检测从第4wk开始表达增加,持续6wk。结论: 泪腺注射肉毒杆菌B可以成功诱导大鼠炎症干眼模型,炎症因子的表达变化具有一定的特征性,为干眼病实验提供较理想的动物模型。