人脑转移癌组织裸小鼠脑内移植模型的建立

目的建立人肺腺癌脑转移瘤的裸小鼠原位移植模型，并分析移植瘤的生物学特征。方法取人肺腺癌脑转移瘤组织块，接种于裸小鼠右尾状核。致瘤后即用裸小鼠的瘤组织进行其原位传代接种，观察致瘤率及荷瘤鼠生存期；MRI观察移植瘤在鼠脑内的大体形态；HE染色分析各代移植瘤的组织学形态；免疫组化染色观察移植瘤中CEA的表达；Alcian blue／PAS特殊染色检测移植瘤中粘液的性质。结果移植瘤组织在裸小鼠右尾状核已连续传至6代，共65只鼠。荷瘤鼠生存期：原代为（47．6±1．8）d，2～3代有所缩短，4～6代稳定在（38．0±0．9）d；移植瘤MRI类圆形，瘤周无水肿。移植瘤病理为低分化腺癌，不向周围正常鼠脑组织浸润；移植瘤中CEA表达阳性，有酸性粘液存在。结论人肺腺癌脑转移瘤组织块接种于鼠脑内建立的原位移植模型能更好地模拟临床原发肿瘤的病理学特征，本方法为研究人肺腺癌脑转移瘤的生物学特性及实验治疗提供了一个可靠的动物模型。

非小细胞肺癌裸鼠体内肿瘤药物筛选分析及其临床应用

目的 评价非小细胞肺癌裸鼠体内肿瘤药物筛选结果及临床应用疗效。方法 新鲜非小细胞肺癌组织块植入裸鼠肾包膜下 ,选用常用抗非小细胞肺癌药物进行肿瘤药敏试验。临床实验组依据肿瘤药敏结果进行肺癌根治术后辅助化学治疗 ;临床对照组选取同期非小细胞肺癌根治术后接受CAP方案辅助化学治疗。结果 人体癌细胞植入裸鼠体内后能很好地保持肿瘤细胞形态 ,移植瘤细胞可见率为 87 8%。临床实验组 3a生存率为 60 0 % ,临床对照组 3a生存率为 5 0 0 % ,差异无显著性 (P >0 0 5 ) ,两组Ⅲ期 3a生存率分别为 5 2 6%和 3 3 3 % ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论 裸鼠肾包膜下筛选抗肿瘤药物进行术后辅助化疗有非常显著临床效果 ,3a生存率有一定提高 ,避免肿瘤化学治疗上的盲目性。

重组人肿瘤坏死因子及其与更生霉素联合抗人卵巢癌裸鼠移植瘤作用

在体外实验的基础上,我们用重组人肿瘤坏死因子(rHTNF)单独或联合更生霉素(KSM)对人卵巢癌裸鼠移植瘤模型进行了8个周期的实验治疗。结果显示,rHTNF可显著地抑制移植瘤生长:rHTNF与KSM联合呈现出较强的协同作用,治疗效果更好。

手术联合5－氟尿嘧啶腹腔化疗治疗结肠直肠癌的实验和临床研究

在裸鼠腹腔内人结直癌移植腐模型上观察了腹腔化疗（ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙＩＰＣ）抗癌疗效对３６例中晚期结直肠癌患者手术后早期施行大剂量大容积５－ＦｕＩＰＣ。结果表明：ＩＰＣ能有效的防治裸鼠腹腔内人结肠癌移植瘤的生长扩散，临床应用简便易行．安全，无严重毒副作用和并发症，近期疗效满意．ＩＰＣ是防治中晚期结直肠癌术后腹腔复发和肝转移一种颇有前途的辅助化疗措施。

裸鼠肾包膜下人癌模型在抗癌药物个体化疗中的应用

目的 通过临床病人肿瘤组织抗肿瘤药物敏感试验，为临床个体化治疗提供重要依据。方法 应用裸鼠肾包膜下人癌模型抗肿瘤药物敏感试验测试12种临床常用的抗肿瘤药物，确定出每例肿瘤最敏感药物，并向临床医生推荐使用。结果 共测试了临床肿瘤标本35例，包括肺腺癌、口腔鳞癌、结肠腺癌、乳腺癌和脑星形细胞瘤等。各个病例的最敏感药物不尽相同。结论 不同类型肿瘤以及相同类型肿瘤不同个体对肿瘤药物敏感度不同。该试验可能提高临床个体化疗效果。

NK细胞对人脑胶质瘤细胞裸鼠皮下移植瘤的抑制作用的实验研究

目的观察NK细胞对人脑胶质瘤细胞(HGC)裸鼠皮下移植瘤的抑制作用。方法将分离、培养的NK细胞和HGC按实验设计移植于随机分配的4组(A组:无细胞移植组;B组:HGC移植组;C组:HGC+人NK细胞移植组;D组:人NK细胞移植组)裸鼠体内,观察肿瘤的生长情况。结果 A组和D组无移植细胞生长,B组和C组肿瘤出现时间分别为(9.23±1.64)d、(15.26±1.53)d,B组和C组比较差异有显著性(t=4.328,P=0.000)。结论移植到裸鼠体内的人NK细胞能有效抑制移植的HGC的生长。

肿瘤组织块接种法建立人脑肿瘤裸小鼠移植模型的研究

以脑肿瘤患者肿瘤组织块接种法建立三种人脑脑肿瘤裸小鼠移植模型，成功率为４２．８％。移植瘤在质地、血供、间质结构、生长特征等方面良好保持了原肿瘤特性，其直接、快速、稳定地建立模型的方法优于肿瘤细胞系接种法。较高的建模型成功率有赖于快速接种、较大接种量、长期观察、良好的净化条件等因素。

裸鼠原位和异位脑肿瘤生物发光信号成像实验研究(英文)

目的应用生物发光成像技术,非侵入性地连续检测活体裸鼠原位和异位脑肿瘤发展演进过程。方法用SMPU-R-MND-luc载体转染人脑肿瘤U87MG细胞系,形成具有高荧光素酶活性的细胞克隆。在裸鼠脑内和胁腰部皮下植入持续表达荧光素酶的肿瘤细胞,建立原位和异位脑肿瘤模型,用影像学资料显示肿瘤部位。用光子发射定量分析动态监测肿瘤生长情况。结果成功地建立了表达荧光素酶活性的原位和异位脑肿瘤动物模型。采集反映肿瘤生长的生物发光信号,肿瘤细胞植入后不同时间点的发光信号值呈显著正相关,而且原位和异位脑肿瘤间存在明显差异。但生物发光脑肿瘤生物发光信号值在第4 d和第14 d时无显著差异。结论体内生物发光成像可以非侵入性地动态检测活体内脑肿瘤演进过程,为研究肿瘤发展机制及最佳治疗策略的选择提供了新的手段和工具。

肿瘤组织块接种法建立人脑肿瘤裸小鼠移植模型的研究

以脑肿癌患者的肿瘤组织块接种法建立3种人脑肿瘤裸小鼠移植模型,成功率为44.4%。移植瘤的质地、血供、间质结构、生长特征等方面良好地保持了原肿瘤特性。其直接、快速、稳定地建立模型的方法,优于肿瘤细胞系接种法。建模型成功率有赖于快速接种、较大接种量、长期观察、良好的净化条件等因素。

抗癌药物敏感性的动物试验和临床研究

~3H—TdR注入荷瘤裸小鼠腹腔后,0.5h就被增殖旺盛的组织摄取,游离部分大多数在18h内从尿中排出。在抗癌药物作用下,移植瘤、小肠和股骨对~3H—TdR 的摄取量,因其对抗癌药敏感性不同而异。以掺入量为指标,可用于动物模型和临床肿瘤患者个体药敏试验,并可观察其毒性副作用。

脑转移瘤动物模型的制备方法及研究进展

脑转移瘤(brain metastasis)是指源于中枢神经系统以外的肿瘤细胞转移到脑组织的颅内常见恶性肿瘤。目前脑转移瘤造模有外周接种和直接脑内接种瘤细胞两大类方法。外周接种方法包括造模动物左心室或颈动脉内注射、原位接种等途径;脑内接种方法包括肿瘤细胞株直接接种于动物特定脑区的简化方法和临床脑转移瘤活检标本直接接种于裸大鼠脑内的新方法。该文综述了脑转移瘤模型的制备方法,包括可选用的接种动物、瘤细胞系、接种方法和模型的检测方法,并介绍这一领域的最新研究进展。

青藤碱基于CASC11/AKT3轴对脑胶质瘤原位荷瘤裸鼠肿瘤生长及血管生成的抑制作用

目的观察青藤碱对脑胶质瘤原位荷瘤裸鼠肿瘤生长及组织血管生成的抑制作用,并基于癌易感候选基因11(CASC11)/丝氨酸/苏氨酸激酶3(AKT3)探讨相关机制。方法取对数生长期U87-MG细胞,将CASC11过表达质粒CASC11 mimics转染至U87-MG细胞,48 h后用于后续实验。取45只BALB/c裸鼠,随机抽取10只设为空白组;其余25只裸鼠给予U87-MG细胞悬液建立脑胶质瘤原位荷瘤模型,将成功建模的20只裸鼠随机分为脑胶质瘤组、青藤碱组,各10只;剩余的10只裸鼠注射转染48 h后的U87-MG细胞悬液,设为mimics联合青藤碱组。建模完成后7 d,给予青藤碱组、mimics联合青藤碱组裸鼠腹腔注射青藤碱(20 mg/kg),其余组腹腔注射等体量生理盐水。干预14 d后,测定抑瘤率与脾脏指数,检测肿瘤组织的微血管密度和AKT3蛋白的表达量。结果mimics联合青藤碱组、青藤碱组的抑瘤率分别为(30.29±4.46)%、(52.10±6.87)%,前者较后者降低(P<0.05)。与空白组相比,脑胶质瘤组的脾脏指数降低(P<0.05);与脑胶质瘤组比较,青藤碱组的脾脏指数升高,血管密度、AKT3蛋白的表达量均降低(均P<0.05);与青藤碱组比较,mimics联合青藤碱组的脾脏指数降低,血管密度、AKT3蛋白的表达量均升高(均P<0.05)。结论青藤碱可提升脑胶质瘤原位荷瘤裸鼠的免疫功能,抑制肿瘤血管生成和肿瘤生长,其可能通过抑制CASC11表达进而下调AKT3蛋白表达来发挥作用。

NRP-1单抗联合节律化疗对裸鼠胃癌移植瘤生长的抑制

目的:探讨NRP-1单抗联合多西他赛节律化疗对胃癌裸鼠移植瘤的抗肿瘤疗效。方法:BALB/c裸鼠皮下接种胃癌BGC-823细胞制备移植瘤模型,将荷瘤裸鼠以数字随机表法随机分为对照组、NRP-1单抗组、节律化疗组(MCT)、联合组(NRP-1mAb+MCT),每组6只。除对照组,其余各组于造模第8天开始分别给予相应治疗,给药2周,观察裸鼠一般状况,隔天测量裸鼠体重及肿瘤体积。裸鼠处死后称瘤质量,H-E染色观察瘤组织形态,免疫组化检测裸鼠瘤组织中NRP-1蛋白、VEGF、MVD表达。结果:联合组移植瘤的体积和质量显著低于其他各组[(0.394±0.128)vs(0.748±0.152)、(0.867±0.361)、(1.247±0.494)g;(0.613±0.223)vs(0.866±0.115)、(1.098±0.343)、(1.474±0.644)cm^3。均P<0.05],抑瘤率较其他治疗组差异有统计学意义(P<0.05)。对照组癌组织细胞生长良好,血管丰富,给药组癌组织出现不同程度的片状坏死,血管成分减少。免疫组化染色显示,对照组NRP-1表达明显高于治疗各组(P<0.05),联合组的NRP-1、VEGF、MVD表达均显著低于其余各组(P<0.05)。结论:NRP-1单抗联合多西他赛节律化疗可能通过下调NRP-1表达而显著抑制BGC-823胃癌移植瘤的生长及血管生成。

THERAPEUTIC EFFECTS OF rhTNF ALONE AND INCOMBINATION WITH KENGSHENGMYCIN INEXPERIMENTAL HUMAN OVARIAN CANCER

Based on experiments in vitro, we examined the therapeutic effect of rhTNF both alone and in combination with Kengshengmycin(KSM) on human ovarian cancer transplanted in nude mice. The results showed a considerable antitumor effect of rhTNF when it was used alone and a marked synergistic effect when it was used in combination with KSM on the xenograft tumors.

人脑肿瘤组织块裸小鼠原位移植方法研究及移植瘤的亲本特征分析

目的用肿瘤组织块直接接种法建立人脑肿瘤裸小鼠原位移植模型，通过分析移植瘤的生物学特征来证明本操作方法的可行性。方法取人肺腺癌脑转移瘤的新鲜组织或人脑多形性胶质母细胞瘤（GBM）裸小鼠皮下移植瘤组织，剪成小块，置入专用套管针，通过事先钻好的颅骨孔．徒手推入裸小鼠右尾状核。观察致瘤率、移植瘤的组织细胞形态、相关标志物、MRI图像特征和荷瘤鼠生存期。结果肺腺癌脑转移瘤和GBM组织在鼠与鼠之间分别传了6代和13代，荷瘤鼠生存期分别为（38．0±0．9）d和（19．0±1．3）d。肺腺癌脑转移瘤移植瘤不向周围正常鼠脑组织侵袭，分泌酸性粘液及表达癌胚抗原等生物学特征与其亲本肿瘤一致：而GBM移植瘤具有向周围正常鼠脑组织高度侵袭及高表达表皮生长因子受体的生物学特征也与其亲本肿瘤一致。结论肿瘤组织块直接注入裸小鼠脑内建立的实验动物模型比肿瘤细胞悬液接种方法相对简易，且移植瘤能更好地保持亲本肿瘤的特征。此法可进一步在各种脑肿瘤动物原位移植实验中推广应用。

高压氧联合药物治疗脑胶质瘤模型鼠效果研究

目的 探讨高压氧（HBO）联合胶质瘤化疗药宁得朗（ACNU）治疗胶质瘤干祖细胞SU3移植瘤的疗效.方法 将SU3移植于生长在独立送风系统小鼠笼（IVC）内的普通NC裸小鼠皮下.致瘤后,取肿瘤组织接种于全身发绿色荧光的NC裸小鼠皮下,第3天按数字表法随机分成4组：HBO组（7只）、ACNU＋ HBO组（7只）、ACNU组（7只）和对照组（12只）,前2组置于早先建立的无特殊病原体（SPF）的HBO-IVC装置内,每天1次每次100 min HBO治疗;第2、第3组按30 mg/kg ACNU腹腔注射,每周1次,共3次.每3d1次用游标卡尺测肿瘤体积和天平称荷瘤鼠体质量.实验结束时,测量肿瘤体积和质量,取部分组织行相关分子Rt-PCR检测,余下的制作病理切片.结果 各组移植瘤质量并与对照组比：ACNU＋ HBO组为（2 252.86±1 062.54） mg （P=0.006）;ACNU组为（1 914.28 ±744.55） mg（P =0.002）;HBO组为（4 680.00±2 538.40） mg （P=0.925）;对照组为（4 760.83±1 989.18） mg.移植瘤组织和分子病理方面：对照组肿瘤组织坏死性出血灶十分普遍,出血区域旁肿瘤血管较多,血管内皮细胞增生活跃;这种情况HBO组较少见,而ACNU、ACNU＋ HBO组没有见到新鲜出血,陈旧性出血亦较少,血管增生相对不活跃,同时TNF-α和CD105的mRNA表达值较对照组明显低（分别为P=0.028,P=0.008）.结论 ACNU联合HBO治疗荷人胶质瘤荧光裸小鼠皮下移植瘤有明显的抑制肿瘤生长的作用.虽然单独HBO治疗的抑瘤作用不明显,但无促进肿瘤生长作用.因此,恶性肿瘤患者进行康复治疗时,HBO辅助治疗不应视作禁忌性措施.

2-氯乙基-3-肌氨酸酰胺-1-亚硝脲对荷人脑胶质瘤动物模型的疗效分析

目的 探讨新型亚硝脲类抗癌药２氯乙基３肌氨酸酰胺１亚硝脲（ Ｓａｒ Ｃ Ｎ Ｕ） 在动物体内抗人脑胶质瘤的效果。方法 腹腔给 Ｓａｒ Ｃ Ｎ Ｕ 和 Ｂ Ｃ Ｎ Ｕ、 Ｖ Ｍ２６ ，观察位于皮下和颅内移植瘤的生长情况、宿主的体重变化。结果 Ｓａｒ Ｃ Ｎ Ｕ 与对照组相比能明显抑制皮下移植瘤的生长和延长宿主的生存期。结论 Ｓａｒ Ｃ Ｎ Ｕ 比目前临床上常用的 Ｂ Ｃ Ｎ Ｕ 和 Ｖ Ｍ２６ 具有更强的抑制人脑胶质瘤生长的作用。

NC系裸小鼠的饲育及其在人脑胶质瘤研究中的应用

目的总结本实验室SPF级环境中NC系裸小鼠繁殖和应用情况。方法用♀Nu/+与♂Nu/Nu交配法繁殖仔鼠后随机观察10窝裸小鼠的繁殖情况,然后用人脑胶质瘤组织或细胞悬液在裸小鼠体内建立原位和异位移植瘤模型,并分析模型生物学特性及实验治疗效果。结果 NC系裸小鼠每胎平均产仔9.1只,Nu/Nu占1/2,总离乳率为94.5%,年存活率达100%,未检测到病菌和寄生虫等。原位移植瘤能够复制其原发人脑胶质瘤侵袭性的生长特性,治疗后可以明显看到移植瘤缩小及血管生成抑制。结论 SPF级环境中用♀Nu/+与♂Nu/Nu交配法能稳定繁殖裸小鼠;裸小鼠为人脑恶性肿瘤模型的建立及实验治疗提供了理想的载体。

GE11多肽对表皮生长因子受体阳性乳腺癌脑转移瘤的靶向性研究

目的探讨GE11多肽对表皮生长因子受体（EGFR）阳性乳腺癌脑转移瘤靶向结合的可行性，为构建特异性靶向乳腺癌脑转移瘤的分子探针寻找合适的靶向基团。方法应用Western blot及流式细胞仪检测人三阴性乳腺癌脑转移细胞株（MDA-MB-231-BR）的EGFR表达，采用细胞免疫荧光染色及流式细胞仪检测荧光标记的GE11多肽对MDA-MB231-BR细胞株的体外靶向结合特性，选择GK-13多肽为对照肽，并利用皮下荷瘤裸鼠进行活体水平靶向性验证。采用两样本t检验分析数据。结果Western blot及流式细胞检测结果显示EGFR在MDA-MB-231-BR细胞株中表达率为88.60%，呈高表达。流式细胞检测结果显示，10 μmol/L浓度GE11多肽与MDA-MB-231-BR细胞结合率为38.4%，明显高于相同浓度对照肽的结合率（0.6%；t＝16.941，P〈0.01）；细胞荧光染色结果显示GE11多肽与细胞共温育后可检测出更强的荧光信号，且结合具有浓度及温度依赖性。活体实验结果显示GE11多肽在肿瘤部位有较强的信号，其他组织信号较弱。结论GE11多肽与EGFR阳性的乳腺癌脑转移瘤具有特异性靶向结合特性。

CX43对S24细胞裸鼠脑移植瘤放射敏感性影响

目的:研究缝隙连接蛋白43(CX43)对胶质母细胞瘤(S24-GBM)细胞间网络连接的影响及其在GBM放射抵抗中的作用。方法:采用基因敲除S24-GBM干细胞(S24-GBMSCs)表面CX43的表达或生胃酮(CBX)特异性阻断CX43的功能后,用多光子激光扫描显微镜观察S24-GBMSCs移植裸鼠大脑中肿瘤细胞表面微管(TMs)的形成和小分子物质(Ca^2++和SR101)在细胞间的传递。采用MRI检测放射对GBM体积变化的影响,记录和分析裸鼠生存时间。结果:与对照组相比,敲除CX43基因后S24-GBMSCs的TMs明显缩短,TMs参与形成的网络连接减少;细胞间Ca^2+同步性和SR101扩散能力下降,肿瘤体积缩小,荷瘤裸鼠生存时间显著延长(P均<0.01);CBX可以抑制Ca^2+和SR101的扩散,延缓GBM的生长,但不影响TMs的形成(P>0.05)。采用CBX阻断TMs形成缺陷的S24-GBMSCs表面CX43的功能可以进一步增强上述效应,提高S24-GBM对放射的敏感性(P均<0.05)。结论:CX43参与S24-GBM细胞间网络连接的形成,影响细胞间信号分子的传递,在S24-GBM放射抵抗中起着重要作用。