看护培养和子叶部位对儿菜(Brassica juncea Coss.var.gemmifera Lee et Lin)再生芽发生的影响

以‘种都1号儿菜’(BrassicajunceaCoss.var.gemmiferaLeeetLincv.Zhong-DouNo.1)无菌子叶为材料,对看护培养效果及子叶部位对再生芽发生的影响进行了研究。结果表明,子叶可以直接分化产生再生芽。在接种子叶的同时,接种已有芽点分化的子叶外植体,可以提早再生芽的发生,并能显著提高芽再生率,但对平均再生芽数无明显影响。带子叶柄的完整子叶,其芽再生率最高,并极显著高于不带子叶柄的子叶叶片,但平均再生芽数以不带子叶柄的完整子叶叶片最高;子叶柄培养未能获得再生芽。

三种类型油菜(Brassica spp.)和野芥菜(B.juncea var.gracilis Tsen et Lee)杂交亲和性及F_1的适合度——潜在基因转移的研究

通过人工去雄授粉 ,采用荧光显微镜观察了 3种类型栽培油菜花粉在两地采集的野芥菜柱头上的萌发生长情况 ,结合杂交后的结实率 ,探讨了 3种类型油菜和野芥菜杂交的亲和性 .结果表明 ,甘蓝型油菜和芥菜型油菜与野芥菜的亲和性都非常高 ,亲和性指数达 10 .0以上 ,而白菜型油菜和野芥菜的亲和性较低 ,亲和指数小于 0 .2 .子一代的适合度研究结果表明 ,芥菜型油菜向野芥菜杂交一代的适合度没有降低 ,而甘蓝型及白菜型和野芥菜杂交一代的适合度明显下降 ,表现在花粉活力降低 ,结实率极低 .上述结果表明 ,白菜型油菜和野芥菜的基因转移可能性最小 ,甘蓝型居中 ,而芥菜型极易向野芥菜发生基因转移 .表 4参

芥菜cDNA-AFLP反应体系的优化

选用红叶芥和青叶大头菜为试材,对cDNA-AFLP反应体系中的几个关键影响因素进行优化,建立了适合于芥菜的cDNA-AFLP反应体系.结果表明:在20μL PCR反应体系中,预扩增产物稀释30倍,Mg2+浓度1.2mmol/L,dNTP浓度0.2 mmol/L,TaqDNA聚合酶加入0.8 U时,选扩的效果最佳.

卡那霉素在转基因芥菜中的应用

为了找出芥菜(Brassica juncea Coss.)遗传转化中最佳的卡那霉素(Kan)筛选浓度,将芥菜的子叶接种于含有不同浓度Kan的分化培养基中,当Kan浓度达到30mg/L时,外植体的分化完全受到抑制。将芥菜种子播种于含有不同浓度Kan的培养基中,当Kan浓度达到200mg/L时,长出的幼苗完全白化;利用叶片涂抹方法,将不同浓度的Kan涂抹于田间生长的植株叶片上,当Kan浓度达到200mg/L时,被处理的叶片完全变白。为了对转基因芥菜后代中外源基因的分离情况进行遗传学分析,分别用200mg/L的Kan处理以npt-Ⅱ基因为选择标记基因的转基因芥菜的种子和转基因芥菜后代植株的叶片,利用χ2测验分析试验结果,4个含有单拷贝外源基因的转基因株系后代,对Kan的抗感分离都符合31的分离规律;而2个含有双拷贝外源基因的转基因株系,其中一个对Kan的抗感分离符合31而不符合151,另一个对Kan的抗感分离既符合31也符合151,双拷贝外源基因在转基因芥菜中的整合方式有待进一步的研究。最后,用PCR分析证实了该方法的准确性,因此,利用Kan对转基因芥菜后代进行筛选是可行的。

芥菜转基因再生体系的建立

以叶用和茎用芥菜的子叶、叶片及下胚轴为外植体 ,通过筛选 12种含不同种类和浓度激素的培养基 ,综合分析与确定影响芥菜转基因再生体系各因素的最佳值 ,以及对再生抗性苗的PCR、Southern、Northern及抗虫鉴定 ,筛选到了能稳定表达外源基因的转基因植株 。

芥菜的起源与驯化探索

本文综合分析有关芥菜的考古发现、历史文献记载、演变和分类研究、传播路线、遗传学和基因组学等方面的研究进展,结合芥菜线粒体基因组分析结果,提出芥菜起源于中国,经过杂交渐渗,沿南(茶马古道)、北(丝绸之路)2条途径由东向西传播到印度、巴基斯坦和中亚、中东诸国。

EDTA对2种芥菜型油菜幼苗富集Pb的效应

采用水培试验,研究了乙二胺四乙酸(EDTA)对Pb胁迫下2种芥菜型油菜(BrassicajunceaCzern.etCoss.)幼苗生长及富集Pb的效应。结果表明,单独用0 5和1 0mmol LPb或EDTA处理可显著抑制植株的生长。与单独处理相比,Pb和EDTA复合处理可以降低各自的生物毒性。当Pb和EDTA等浓度复合处理时,植株生物量与对照植株无明显差异,说明游离态Pb或EDTA对幼苗具有毒害作用,而螯合态Pb-EDTA基本不具有生物毒性。EDTA处理促进Pb从根系向地上部运输,促进Pb在地上部积累。当c(EDTA) c(Pb)为1 2时,地上部铅积累总量达到最高。随c(EDTA)的增加,根系铅积累总量反而下降。2个芥菜型油菜品种对EDTA的处理效应表现极为相似,生物量大的品种具有较高的Pb积累总量。

雪菜中芥子苷酶解特性的研究

借助于硫脲紫外分光光度法，对雪菜中的芥子苷的酶解性质进行了研究。经检测，实验用雪菜中芥子苷含量为０．０７％。单因素实验显示，芥子酶的最适ｐＨ６．０～７．０，最适温度７０℃，Ｖｃ对芥子酶有明显的激活作用，而０．５％ＮａＣｌ对芥子酶有显著的抑制作用。正交试验表明，ｐＨ是影响芥子酶活的高度显著性因素，ＮａＣｌ浓度为显著性因素。ＲＳＡ优化试验得出，在室温２０℃下２０％雪菜汁中芥子苷酶解的最佳条件为：ｐＨ６．５６，ＮａＣｌ浓度３．４７％，冷冻干燥芥子酶粗酶粉添加量５．３７ｍｇ（５ｍｌ２０％雪菜汁中），反应１ｈ，最大酶活可达７．６７ｕ。研究结果可供腌制雪菜加工参考使用。

九头芥梅干菜提取物的抗氧化性能研究

研究九头芥梅干菜乙醇提取物的抗氧化活性。得到的提取物分别用石油醚和乙酸乙酯经液-液分相先后得到石油醚相、乙酸乙酯相和萃余相。用DPPH自由基清除活性和还原力测试等方法评价各样品的抗氧化活性。用福林酚法测定各样品的总酚含量。研究结果表明:所有样品均显示不同程度的抗氧化潜力。其中,乙酸乙酯相在DPPH自由基清除活性和还原力测试中活性最强。而且,其总酚含量也最高(17.57mg没食子酸当量/g)。另外,用反相高效液相色谱(RP-HPLC)对各样品中存在的酚类物质进行定性分析,发现九头芥梅干菜乙醇提取物及其各溶剂萃取组分中均含有没食子酸,而且为主要成分。试验证明,九头芥梅干菜的乙醇提取物具有良好的抗氧化活性,可以作为天然抗氧化物质的潜在来源。

人工老化芥菜种子基因组DNA的ISSR标记

应用ISSR分子标记对人工老化的芥菜种子进行DNA损伤程度的分析,从18条ISSR引物中选出6条适用于老化芥菜种子的研究分析,并发现人工老化处理的芥菜种子随着老化时间的延长,ISSR扩增出的条带减少、颜色变浅甚至消失,表明在种子贮藏中,随着老化程度的加剧,DNA破损是影响种质资源保存的因素之一。

高菜游离小孢子培养与植株再生

以3个高菜品种三池高菜、紫高菜、柳川大缩缅为试材,研究不同培养条件对小孢子胚诱导和植株再生的影响。结果表明：基因型是限制小孢子胚发生的主要因素,相同处理条件下,不同基因型之间出胚率有显著差异,紫高菜出胚率为16.00%,三池高菜出胚率为10.67%,而柳川大缩缅未产生小孢子胚;热激诱导时间对胚发生也有明显影响,当热激（33℃）时间为48-72 h时出胚率有较大提高;转胚后适宜胚状体生芽培养基为B5＋0.02 mg.L-1TDZ＋0.02 mg.L-1NAA＋0.05 mg.L-1KT＋1 g.L-1活性炭＋30 g.L-1蔗糖＋8 g.L-1琼脂,生芽率为88%;继代生根培养基以1/2MS＋0.2 mg.L-1NAA＋30 g.L-1蔗糖＋8 g.L-1琼脂为宜,紫高菜生根率为100.00%,三池高菜生根率为96.00%。

雪里蕻腌菜卤汁中有机酸成分气相色谱分析

应用气相色谱法,以十二烷为内标,雪里蕻腌菜卤汁中挥发及不挥发性有机酸醋酸、丙酸、丁酸、乳酸及琥珀酸和苹果酸经处理丁酯化后在HP-1毛细管柱上得到了完全分离定量。对各有机酸组分的含量与比峰面积或比峰高进行了回归分析,相关系数在0.9904-0.9968之间。醋酸、乳酸和琥珀酸以及苹果酸在样品中的回收率分别为91.2%、86.2%、96.5%和88.5%。且可简化样品中有机酸组分的分离提取操作,简化后的检测定量结果仍很理想。

雪里蕻腌菜的质构与果胶组分含量的关系

对雪里蕻腌菜中果胶组分的含量与质构变化进行了检测分析 ,雪里蕻腌菜在正常腌渍过程中总果胶含量趋于稳定 ,而水溶性果胶增加至一稳定值 ,六偏磷酸钠溶解性果胶下降至一稳定值 .在腐烂过程中 ,总果胶含量显著下降 ,同时水溶性果胶组分增加和六偏磷酸钠溶解性果胶下降明显 .研究结果表明 ,可用检测雪里蕻腌菜醇不溶物中果胶组分含量的变化来监测腌菜质构变化 .

西藏芥菜型油菜性状演化与分支分类研究

为明确西藏芥菜型油菜的性状演化与分支分类问题,本文以67份西藏芥菜型油菜为试验对象,52个形态学性状为依据,白花菜科植物醉蝶花为外类群,应用最大同步法,对其进行了研究。结果表明:芥菜型油菜的基生叶、伸长茎叶、薹茎叶和花器的性状,均既有同期演化的,也有非同期演化的,有各自独特的演化规则;西藏芥菜型油菜明显分为野生种和栽培种2大类群,无论是野生类群还是栽培类群中,往往是来自于同一地区或气候相似区的材料聚在一起。表明西藏芥菜型油菜种质资源在形态演化上的相似性与其原产地的地理、气候背景密切相关。

雪里蕻腌菜风味物质的研究(Ⅱ)雪里蕻腌菜挥发性风味成分

借助于有效吸附剂HayeSepQ ,应用动态顶空吸附法及色—质联用技术 (GC -MS)对雪里蕻腌菜的挥发性风味成分进行了分析检测。同时还对捕集到的挥发性风味成分进行了组分分离并结合嗅感评定。雪里蕻腌菜的特征风味在碱性组分中嗅感突出。GC -MS检测解析结果为雪里蕻腌菜的挥发性成分主要为烃、醇、酯、腈及含硫和氮的杂环化合物 。

榨菜下胚轴离体培养植株再生体系的建立

以榨菜(Brassica juncea Czern. et Coss. var. tumida)B2-1014的下胚轴为外植体,研究了不同浓度的激素以及不同激素组合对愈伤组织、不定芽和不定根诱导的影响。结果表明,榨菜茎段离体培养的植株高频再生体系中愈伤组织诱导培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.8 mg/L NAA,不定芽诱导培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,不定根诱导培养基为MS+0.2 mg/L NAA,在此培养条件下,B2-1014愈伤组织的诱导率达90.0%,不定芽诱导率达92.2%,不定根诱导率达97.8%。

不同品种茎用芥菜瘤状茎膨大过程中细胞壁成分的变化

对不同品种茎用芥菜的瘤状茎在膨大过程中细胞壁成分的研究表明，瘤状茎在膨大过程中，细胞壁中果胶、半纤维素２、纤维素、醛酸和总糖含量逐渐下降，特别是膨大后期下降幅度较大．其中，果胶和总糖含量不同品种间差异较大，纤维素的含量在膨大后期，不易空心品种Ｔ８４－６１高于易空心品种Ｔ８４－６６．β－１，３－葡聚糖含量在膨大后期不易空心品种Ｔ８４－６１高于易空心品种Ｔ８４－６６，这与膨大后期Ｔ８４－６１品种β－１，３－葡聚糖合成酶活性增加有关．瘤状茎中的Ｃａ含量Ｔ８４－６１品种在膨大后期高于Ｔ８４－６６，而Ｍｇ含量品种间无明显差异．由此可见，细胞壁中果胶、总糖、Ｃａ和β－１，３－葡聚糖含量的降低。

芥菜在聚乙二醇模拟干旱条件下的生理变化研究

以云南地方芥菜品种"M100"(Brassica juncea Coss.)为试材,研究了5%、8%和10%聚乙二醇(PEG6000)渗透胁迫下芥菜幼苗的叶绿素含量、丙二醛(MDA)含量、脯氨酸含量、可溶性糖含量、相对含水量、相对电导率和Fv/Fm等生理指标随胁迫处理时间的变化。结果表明:随着PEG6000胁迫时间的延长或PEG6000浓度的升高,芥菜叶片叶绿素含量、相对含水量、Fv/Fm下降比较明显,MDA含量、脯氨酸含量、可溶性糖含量和相对电导率则表现出不同程度的增加趋势。其中MDA含量、脯氨酸含量、可溶性糖含量、相对含水量和相对电导率5个指标在PEG6000浓度为10%时,各处理间差异显著,因此,这5个指标可用于测定芥菜的耐旱性。

引物及RAPD标记数对芥菜变种聚类分析的影响

利用ＲＡＰＤ标记对１６个芥菜变种的遗传关系进行研究，并在ＵＰＧＡ聚类分析的基础上建立了亲缘关系系统树图和利用不同的引物数和不同的ＲＡＰＤ标记数对芥菜进行聚类分析。结果表明，聚类结果基本一致。即都可将１６个芥菜变种划分为３组：Ｃ组只有茎瘤芥１个变种，Ａ组和Ｂ组的变种数则略有差异。说明少至２种引物的扩增产物（２７个ＲＡＰＤ标记）也能基本反映１６个芥菜变种间的遗传关系。但随着引物数和ＲＡＰＤ标记数的减少，１６个芥菜变种间的平均遗传距离递减，即从１９种引物、２４０个ＲＡＰＤ标记的７．３４减少到２种引物、２７个ＲＡＰＤ标记的２．３４。而遗传距离的变小，使划分芥菜变种的亲缘关系更加困难。因此，在利用ＲＡＰＤ技术研究芥菜变种间的遗传关系时，有必要保证一定数量的引物和ＲＡＰＤ标记。

芽芥菜生长发育与温度条件的关系研究

观察了芽芥菜的生物学特性 ,分析了芽芥菜发育与温度条件的关系 ,提出芽芥菜通过春化的条件 ,并对栽培中存在的问题进行了探讨。