大白菜雄性核不育基因的染色体定位及AFLP分子标记筛选

【目的】基因定位是遗传研究的重点内容,也是育种工作的重要基础。本研究以大白菜雄性不育两用系‘大阳AB系’和大白菜系列初级三体为材料,对决定大白菜雄性不育性的核基因(ms)进行染色体定位和分子标记筛选,旨在为其分子克隆和遗传利用奠定基础。【方法】基因的染色体定位采用初级三体遗传分析和χ2测验法,分子标记采用AFLP分析方法。【结果】大白菜‘大阳AB系’的雄性不育系(msms)×大白菜系列初级三体(Tri-1、Tri-2、Tri-3、Tri-4、Tri-5、Tri-6、Tri-7、Tri-8、Tri-9)的9个杂交组合中,F1均为可育株;从F1选出三体植株进行自交和测交,其自交子代(F2)和测交子代(Tc)中可育株与不育株的分离比例,只有Tri-4表现为15.5﹕1(F2)和3.24﹕1(Tc)、不符合孟德尔的单基因遗传分离比例(3﹕1和1﹕1),其它三体在2.60﹕1～3.76﹕1(F2)和0.81﹕1～1.48﹕1(Tc)、均符合孟德尔的单基因遗传分离比例(3﹕1和1﹕1),这表明该雄性不育性的遗传与Tri-4的遗传表现一致,即确定该雄性不育性的基因位于大白菜4号染色体上。基于染色体和染色单体分离的三体遗传分析表明,该雄性不育基因位于4号染色体的近着丝点区域,通过对124个AFLP引物组合的筛选,初步获得了一个与雄性核不育基因位点连锁的AFLP标记E34M49(398bp),遗传距离约为1.2cM。【结论】利用初级三体遗传分析首次将大白菜雄性核不育基因定位在第4号染色体上。

气相色谱法同时检测青菜中毒死蜱和氯氰菊酯残留量的方法研究

为更准确、简便地检测青菜中毒死蜱与氯氰菊酯残留,采用气相色谱-微池电子捕获检测器法（GC-μECD）,建立了同时测定青菜中这2种农药残留量的分析方法.样品采用乙腈超声提取,过弗罗里硅土固相萃取柱净化,用丙酮/正己烷（1∶9,V/V）淋洗,淋洗液水浴蒸发近干后以正己烷定容,应用HP-5毛细管柱程序升温分离,微池电子捕获检测器测定,外标法定量.毒死蜱和氯氰菊酯的线性范围分别为0.005～5 mg/L和0.01～5 mg/L,相关系数（r）均大于0.99,添加浓度在0.1～1 mg/kg时,平均回收率为84.2％～116.9％,相对标准偏差（RSD）为2.4％～12.7％,检出限分别为0.0002 mg/kg和0.003 mg/kg.该方法简便、快速、灵敏,准确度及精密度均满足农药多残留检测的要求,适用于青菜中毒死蜱和氯氰菊酯残留量的检测分析.

结球甘蓝小孢子胚胎发生的细胞学研究

游离小孢子培养即小孢子在外界胁迫诱导的条件下,从其配子体发育途径转向孢子体发育途径,诱导小孢子胚胎发生的过程。本研究通过对结球甘蓝小孢子胚胎发生的细胞学观察,为甘蓝游离小孢子培养中的可调控性及相关胚胎发育研究提供理论依据。选用3个在游离小孢子培养中胚胎发生响应有差异的甘蓝杂交种,分别采用醋酸洋红、4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)及荧光素双醋酸酯(FDA)3种染色方法,对甘蓝小孢子体内配子体发育、游离小孢子培养中的胚胎发生过程及细胞死亡现象进行了观察。结果表明:小孢子正常发育方向是单核小孢子经历2次不对称核分裂后发育成三核花粉,而单核靠边期小孢子在体外经32.5℃热激胁迫1 d后,小孢子绝大部分死亡,培养3 d后小孢子死亡率达到90%左右。结球甘蓝游离小孢子培养胚胎发生途径以B途径为主:第1次分裂为对称分裂,其后2个核进行反复分裂形成多细胞团,依次经历球型胚、心型胚、鱼雷胚,直至子叶胚的形成。除了以上典型B途径外,培养过程中还同时存在多种发育途径:第1次不对称分裂后,生殖核继续分裂即为A-G途径;营养核和生殖核两者同时继续分裂的A-VG途径。结论:甘蓝小孢子在体外经32.5℃热激胁迫1 d后,B途径为其主要孢子体发育途径;热激胁迫迅速诱导了小孢子的死亡。

以大豆分离蛋白为壁材喷雾干燥法制备芥末油微胶囊

以大豆分离蛋白为壁材,采用喷雾干燥法制备了芥末油微胶囊。其最佳工艺条件为:固形物含量10%、芯壁比1∶2、乳化剂的添加量为0.1%、均质时间4min(10000r/min)、喷雾干燥进风口温度195℃。在最佳工艺条件下得到的微胶囊产品的包埋率为89.94%。

氮磷钾配比对不同肥力土壤油菜产量与经济性状的影响

为合理利用肥料,发挥品种基因型优势,促进油菜高产稳产,本研究以‘丰油10号’为试验材料,在大田条件下考查了氮磷钾配比对2种不同肥力土壤油菜产量与经济性状的影响,采用统计分析法比较分析了不同肥力土壤对施肥响应的特点与差异。结果表明:与不施肥处理相比,不同氮磷钾配比均可显著提高油菜的产量、株高、有效分枝高和主花序有效角果数,氮磷钾肥配比为15:9:6时,油菜产量及主花序有效角果数均达到最高;相同施肥处理条件下,油菜产量、千粒重、单株有效角果数、一次有效分枝数、株高、有效分枝高、主序有效段长及有效角果数均表现出随土壤肥力升高而增加的趋势,但贫瘠土壤中的油菜产量始终低于中等肥力土壤的产量水平。结果说明,土壤肥力对油菜产量与经济性状具有重要影响,平衡配施氮磷钾肥,培肥土壤肥力,保证油菜全生育期正常生长发育的养分供给,是实现油菜稳产高产的关键。

湛江市几种蔬菜的营养成分分析

对湛江产芥菜（大叶芥菜、小叶芥菜）、芫荽和麦菜的微量元素、氨基酸进行了定量分析。结果表明营养元素如Ｃｕ、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃａ、Ｍｇ、Ｋ、Ｍｎ、Ｎａ等的含量较丰富，也含有多种人体必需的氨基酸，但共同的特征是均缺乏赖氨酸。

甘蓝自交不亲和细胞信号转导的功能基因研究进展

自交不亲和性是开花植物防止近亲繁殖而广泛存在的一种遗传屏障,在育种工作中意义重大,它在遗传上受一个带有复等位基因的多态性S基因座所控制。本文综述了近年来在甘蓝自交不亲和信号转导途径中相关功能基因的研究进展。SRK基因和SP11/SCR基因是控制甘蓝自交不亲和性的两个关键因子。SRK基因是雌蕊柱头中自交不亲和反应的专一决定因子,编码SP11/SCR基因的蛋白在花药壁和花粉中特异表达。编码SLG基因的蛋白在自交不亲和反应中起增强SRK活性的作用。另外也对信号传导途径中下游蛋白质的作用模式作了展望。

结球白菜带柄子叶外植体不定芽离体再生能力的遗传分析

解析控制植物不定芽离体再生能力的遗传因素,有助于从根本上提高离体培养困难材料的不定芽再生能力,是植物基因工程遗传改良的基础。本研究以结球白菜4个纯合亲本及其杂交后代的带柄子叶为外植体,建立了高频率离体不定芽再生技术。据此我们还对白菜不定芽再生能力进行遗传分析,并开展亲本与后代杂种的离体培养及反应研究,包括对培养基的激素需求,不定芽形成频率,不定芽形成数量,芽形态等系列特征。研究结果表明,杂种与亲本在培养基的激素浓度上有类似需求;杂交后代的不定芽再生率均至少高于一方亲本,在一些组合中可以高于双亲;在适宜的杂交组合及培养条件下,结球白菜带柄子叶外植体的不定芽再生率可以达100%,每一外植体上的不定芽数达3～7个。方差分析表明,结球白菜的不定芽离体再生能力存在基因的加性效应。

不同施肥水平对油菜产量的影响

[目的]为油菜创高产提供科学施肥依据。[方法]通过"3414"完全试验,比较不同施肥水平下产量水平,得出最高产量施肥配方的N、P、K处理。[结果]应用数学函数法分析产量结果,得出最佳施肥量N 240 kg/hm2、P2O582.5 kg/hm2、K2O 90 kg/hm2,最佳理论产量2 640kg/hm2。[结论]综合土壤测试值、产量、产投比以及补充地力损失等因素认为生产上推荐施用量:N 240 kg/hm2、P2O5120 kg/hm2、K2O 90 kg/hm2。

甘蓝型油菜优质高配合力质不育系南A_6的选育与应用

本研究拟改良已有高配合力甘蓝型油菜细胞质雄性不育系的品质,以不育系南A2作母本、双低品系92-2作父本测交并连续回交,结合品质定向选择和配合力分析,加速优质不育系选育速度。研究结果:成功选育出低芥酸低硫苷不育系南A6。南A6于2002年3月通过四川省农作物品种审定委员会组织的鉴定,具有不育性稳定、品质优、一般配合力高、农艺性状优良、异交结实率高、抗逆性强、适应性广等特点,与6个恢复系配制出2个高产组合和4个优质组合通过省级或国家审定。研究结果表明不育系南A6已成为四川省油菜雄性不育杂种优势利用的主体不育系,具有广阔的应用前景。

萝卜与苤蓝属间杂种胚离体培养

以萝卜雄性不育系DH303A为母本,以苤蓝为父本进行属间远缘杂交,萝卜与苤蓝杂交的不亲和性发生在胚珠发育过程中,杂交荚荚长快速生长期在授粉后的第2~5天,而横径快速生长期在授粉后第2~4天。在杂种胚发育后第6天和第7天进行胚抢救,用诱导培养基：MS＋2,4-D 2.0 mg/L＋KT 0.5 mg/L＋蔗糖3%＋琼脂0.6%;继代培养基：MS＋2,4-D 2.0 mg/L＋KT 0.5 mg/L＋蔗糖3%＋琼脂0.6%;分化培养基：MS＋IAA 0.5 mg/L＋KT 1.5 mg/L＋蔗糖3%＋琼脂0.6%;生根培养基：MS＋NAA 0.2 mg/L＋IAA 0.5 mg/L＋蔗糖3%＋琼脂0.6%,能成功获得幼苗。

白菜S位点糖蛋白基因的克隆与表达分析

以白菜[Brassica campestris L.ssp.chinensis(L.)Makino]自交不亲和系为材料,采用RT-PCR技术,用特异引物对SLG基因进行克隆,获得SLG基因cDNA序列长度为1324bp,命名为BcSLG。序列分析表明:所获得的白菜BcSLG基因cDNA序列包含一完整的编码框,编码432个氨基酸,含有12个保守的半胱氨酸残基和7个N-糖基化位点。序列比对和系统进化分析表明:BcSLG与其它植物的SLG基因氨基酸序列具有较高的同源性,与大白菜和甘蓝亲缘关系最近。荧光定量PCR分析表明:BcSLG基因在自交不亲和系的柱头中表达量最高,其次是花蕾,叶片中表达最低,在自交亲和系的柱头、花蕾和叶片中相对表达较低。