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题名siRNA表达载体对hTERT基因的效应评价
被引量:2
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作者
赵矫
余红
赵小平
税青林
曾永秋
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机构
泸州医学院生物学与遗传学教研室
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出处
《陕西医学杂志》
CAS
2009年第1期7-10,共4页
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基金
四川省应用基础研究项目(04JY029-020-1)
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文摘
目的:构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的RNA干扰表达载体,探讨其对人乳腺癌MCF-7细胞生长及其hTERT基因表达的影响。方法:设计针对hTERT基因的干扰靶序列并构建重组siRNA表达载体pGenesil-hTERT。酶切测序鉴定后,脂质体转染MCF-7细胞,应用RT-PCR和Weston Blot法检测hTERT基因的表达情况,应用流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果:酶切电泳测序分析表明插入序列正确,重组质粒构建成功,且转染MCF-7细胞后,hTERT mRNA和蛋白质表达水平显著抑制,细胞凋亡率较对照组明显升高(P<0.01)。结论:以DNA质粒为载体的siRNA能有效抑制hTERT基因的表达,进而抑制乳腺癌MCF-7细胞生长、促进细胞凋亡。
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关键词
乳腺肿瘤/病理生理学
核糖核酸酶类/代谢
端粒
DNA指导的rna聚合酶
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Keywords
breast neoplasms/physiopathology ribonucleases/metabolism telomerase dna-directed rna polymerase
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分类号
R733.7
[医药卫生—肿瘤]
R394
[医药卫生—医学遗传学]
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