天津短杆菌T_(6-13)谷氨酸脱氢酶的研究

本文研究了天津短杆菌(Brevibacterium tianjinese)T_(6-15)谷氨酸脱氢酶(GDH)[EC1,4,1.4]的纯化和性质。该酶以辅酶Ⅱ(NADP)为其专一性辅酶,正、逆反应酶活力最适pH 分别为7.5和8.9—9.9,对热较敏感。该酶对还原型辅酶Ⅱ(NADPH)、α-酮戊二酸(α-KG)、NH_3、NADP 和 L-谷氨酸(GA)的 K_m 值分别为0.076、3.23、4.0、0.02和120.48 mmol/L。该酶受反应产物的抑制,逆反应受 NADPH、α-KG 和 NH^+_4的抑制,正反应受 NADP 和谷氨酸的抑制,但该酶所催化的逆反应既不受三羧酸循环代谢中间产物的抑制,也不受氨基酸的抑制和氨基酸的积累抑制。对发酵过程中谷氨酸脱氢酶活力变化的研究表明,前期酶活力逐渐上升,当发酵至16小时左右酶活力最高,其后酶活力逐渐下降;二级种子的酶活力与发酵过程中酶活力最高时相当。