淫羊藿中异戊烯基黄酮的鉴别和含量测定的综合实验设计

为加深学生对传统中药淫羊藿的药效成分异戊烯基黄酮的认识,设计了综合化学实验.将淫羊藿粉末经乙醇热回流提取,蒸馏浓缩得到总浸膏,再将总浸膏溶于水,依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取,得到石油醚相、乙酸乙酯相和正丁醇相.将三相的有机物分别用薄层色谱展开,在紫外灯下观察254 nm和365 nm荧光颜色和强度,同时用硫酸、氯化铁显色,表明各相均含有黄酮.以淫羊藿苷为标品,通过作标准曲线结合紫外光谱对其各相的异戊烯基黄酮含量进行平行测定,同时考察了方法的重复性和样品的稳定性.

基于优化MaxEnt模型的我国淫羊藿潜在适生区预测研究

目的 预测当前气候条件下淫羊藿在我国的潜在适生区,为淫羊藿资源可持续利用及生产规划提供依据。方法 基于经筛选后的267个淫羊藿物种分布数据及8个环境因子,利用R语言kuenm包优化最大熵(MaxEnt)模型参数,分析影响淫羊藿分布的主要环境因子,并预测其潜在分布范围。结果 优化后模型运行结果遗漏率=0.044 8、Akaike信息量准则=6 409.884 5、曲线下面积=0.986,说明模型准确度较高。基于环境因子贡献率与刀切法表明,当前影响淫羊藿分布的关键环境因子主要有7月份平均降水量、2月份平均最高气温、9月份平均降水量、最冷季度降水量、降水量变异系数、温度季节性变化标准差及最暖季度降水量。模拟结果显示,当前气候条件下我国淫羊藿总适生区面积约221.14×10^(4)km^(2),集中分布在我国中部及中南部地区。其中高适生区面积约23.13×10^(4)km^(2),中适生区面积约73.78×10^(4)km^(2),低适生区面积约124.22×10^(4)km^(2)。结论 本研究可为淫羊藿资源人工栽培规划及可持续利用提供参考。

中成药相关肝损伤研究进展

药物性肝损伤是指由化学药品、生物制品、中草药及其制剂等所导致的肝损伤,是临床常见的药物不良反应之一。近年来,含何首乌、补骨脂、淫羊藿的中成药导致肝损伤的临床报道逐渐增多,其导致肝损伤的原因及机制受到广泛关注,并取得一定进展。本文主要对含此类组分的中成药及其肝损伤的原因、发病机制等进行综述。

基于MaxEnt模型的甘肃省南部洮河流域淫羊藿品质变化分析

淫羊藿(Epimedium brevicornu Maxim.)作为野生药材,品质受到自然环境的影响.为研究淫羊藿品质变化趋势,本研究选取甘肃省南部洮河流域内淫羊藿为研究对象,以淫羊藿苷含量为淫羊藿品质标准,运用MaxEnt模型和地理信息技术,对影响淫羊藿品质的环境因子进行筛选分析.结果显示,淫羊藿苷含量与7月份水蒸气压呈线性回归关系(F=26.331,P=0.000,r=0.703,R^(2)=0.494),淫羊藿苷含量随着7月份水蒸气数值增加逐渐降低,在适宜淫羊藿生长的河道两边,距离河流越远淫羊藿苷含量越高,药材品质越好.本研究表明,MaxEnt模型和地理信息技术可作为研究影响野生淫羊藿品质变化的一种有效方法,指导淫羊藿药材资源的保护与开发.

淫羊藿的主要化学成分、药理作用研究进展及质量标志物的预测分析

淫羊藿Epimedium brevicornu Maxim作为我国传统的补益类中药,主要化学成分有黄酮、木脂素、生物碱、挥发油等,其中黄酮类化合物是主要活性成分,在现代药理研究中发现其对于心血管系统、免疫系统等方面有良好的药理作用,是具有巨大临床应用研究价值的中药。但相关研究也发现,淫羊藿对神经系统、肝胆系统、生殖系统等会产生毒性,对机体有一定的损害。结合国内外报道综述淫羊藿的主要化学成分和药理作用研究进展,为进一步研究淫羊藿及其在临床中的安全应用提供理论依据,同时也基于中药质量标志物(Q-marker)理论,从植物亲缘性和化学成分特有性、传统药性、不同产地及化学成分可测性等方面探讨了淫羊藿的Q-marker,在一定程度上能为淫羊藿的质量控制评价提供有效参考。

UPLC一标多测法测定淫羊藿中4个黄酮醇苷的含量

目的:建立测定淫羊藿中淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B和朝藿定C等4个黄酮醇苷含量的超高效液相色谱一标多测分析方法。方法:采用超高效液相色谱,以淫羊藿苷为内参物,建立朝藿定A、朝藿定B和朝藿定C与淫羊藿苷之间的校正因子,并考察校正因子在不同条件下的稳定性,同时比较一标多测法(QAMS)和外标法(ESM)测定结果的差异,验证QAMS的准确性。结果:4个化合物平均回收率分别为100.95%、99.33%、100.30%、98.03%,RSD分别为1.45%、1.14%、0.77%、1.45%。该方法在不同实验条件下耐用性良好;朝藿定A、朝藿定B和朝藿定C 3个化合物相对于淫羊藿苷的校正因子分别为1.21、1.17、1.31,两种分析方法所得结果基本无差异。结论:所建立的QAMS简便、快捷、准确度高,对控制淫羊藿的质量具有参考价值。

淫羊藿激活CREB/BDNF信号通路改善APP/PS1双转基因小鼠的认知功能

目的研究淫羊藿能否通过调节环磷酸腺苷效应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)/脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)信号通路改善APP/PS1双转基因小鼠的认知功能。方法取7月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠30只,按体重随机分为模型对照组和淫羊藿组,每组15只;另取15只同龄的雄性C57BL/6小鼠作为空白对照组。淫羊藿组灌胃给予3 g·kg^(-1)的药物溶液,空白组和模型组给予等体积0.3%CMC-Na,连续灌胃给药28 d,每天1次。筑巢试验检测小鼠日常生活能力;Morris水迷宫试验检测小鼠的学习和记忆能力;苏木素-伊红(H&E)和尼氏(Nissl)染色法观察小鼠脑组织病理学变化;采用TBA法、羟胺法检测小鼠脑组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的水平;免疫荧光化学法检测小鼠脑内β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)的表达情况;Western blot法检测环磷酸腺苷效应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)和脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)信号通路相关蛋白的表达情况。结果与空白组比较,APP/PS1双转基因小鼠的筑巢得分明显降低,逃避潜伏期和游泳距离明显增加(P<0.01),目标象限停留时间和穿越平台次数显著减少;皮层和海马存在明显的神经病理损伤。此外,APP/PS1双转基因小鼠的皮层和海马区域可观察到大量Aβ沉积,并且脑组织中超氧化物歧化酶活性降低,丙二醛水平升高。Western blot结果显示,模型组小鼠脑内环磷酸腺苷效应元件结合蛋白蛋白磷酸化受到抑制,伴随着脑源性神经营养因子蛋白表达明显降低。淫羊藿(3 g·kg^(-1))连续灌胃4周,可明显改善模型小鼠的筑巢能力和认知功能,减轻神经病理损伤,抑制Aβ沉积,减轻氧化应激,促进环磷酸腺苷效应元件结合蛋白环磷酸腺苷效应元件结合蛋白磷酸化,增加脑源性神经营养因子蛋白表达。结论淫羊藿可明显改善APP/PS1双转基因小鼠的认知功能和神经病理损伤,其作用机制可能与激活环磷酸腺苷效应元件结合蛋白/脑源性神经营养因子信号通路有关。

基于配伍淫羊藿防治老年性疾病的药理机制研究进展

淫羊藿为小檗科植物的干燥叶,常用于肾阳虚衰、筋骨痿软等病症。中医以“君臣佐使”为原则,充分考虑药物的特性进行组方,合理配伍可以增加中药疗效,减少不良反应,中医称之为“相须”“相使”。我国人口老龄化已是社会难题,骨质疏松症等老年性疾病困扰着众多中老年患者。目前,有诸多学者针对淫羊藿及其活性成分的配伍制剂防治老年性疾病进行了较为深入的研究,但缺乏对此类研究的系统整理。因此,本研究结合近10年的文献报道,对淫羊藿及其活性成分的配伍制剂防治骨质疏松症、痴呆症、性功能障碍的药理机制研究进行综述,为淫羊藿制剂防治老年性疾病的应用开发提供参考,为中药的配伍研究提供思路。

淫羊藿炮制前后在大鼠体内的药代动力学研究

目的研究生、炙淫羊藿中淫羊藿苷的药代动力学。方法 SD大鼠16只随机分2组,分别给予含等量淫羊藿苷的生、炙淫羊藿提取物,取血浆样品,采用液相-质谱联用(HPLC-MS)技术检测淫羊藿苷血药浓度,DAS2.0软件计算药动学参数。结果生淫羊藿组C max、AUC(0-t)分别为(2.29±0.75)mg/L、(14.94±5.11)mg/(L·h),炙淫羊藿组C max升高到(2.80±0.82)mg/L,AUC(0-t)升高到(25.30±8.12)mg/(L·h)。结论淫羊藿炮制后能提高淫羊藿苷在大鼠体内的生物利用度。

淫羊藿中淫羊藿苷的提取工艺

采用超声波辅助提取淫羊藿(Epimedium brevicornu Maxim.)中淫羊藿苷,以淫羊藿苷的提取率为指标,通过单因素试验确定主要因素和水平,通过正交试验筛选淫羊藿苷的最佳提取工艺条件。结果表明,影响淫羊藿苷提取率的主次因素为料液比、提取温度、超声时间、乙醇体积分数,其中料液比不同水平对提取率有显著影响。最佳提取条件为70%乙醇溶液、料液比1∶100(m/V,g∶mL)、超声时间40 min、提取温度60℃。

淫羊藿醇提物对高脂血症模型小鼠的降血脂作用及其抗氧化活性

目的:探讨淫羊藿醇提物(EEBM)对高脂血症模型小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平的影响,阐明其抗氧化作用。方法:采用铁离子还原力法、2,2-二苯基苦基肼(DPPH)自由基清除法测定EEBM的抗氧化活性。建立高血脂小鼠模型,将小鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组和低、中、高剂量EEBM组,分别采用预防性给药和治疗性给药28和42d。实验结束后,分别测定小鼠血清TC、TG、LDL-C和HDL-C水平。结果:体外抗氧化实验,EEBM对DPPH自由基清除活力的半数抑制率(IC50)为(35.12±0.48)mg·L^(-1),对铁离子还原的半最大效应浓度(EC50)为(148.35±1.38)mg·L^(-1)。降血脂活性,无论是预防性给药还是治疗性给药,与模型组比较,低、中和高剂量EEBM组小鼠血清TC、TG和LDL-C水平均明显降低(P<0.05或P<0.01),HDL-C水平均明显升高(P<0.01)。结论:EEBM可改变高脂血症小鼠血脂质水平使之接近正常水平,EEBM具有明显的降血脂活性。

淫羊藿开花的时空效应对其结实的影响

运用非参数检验和单因素方差分析,研究了淫羊藿开花的花序水平的位置效应与空间效应对结实的影响。结果表明:(1)开花时间效应对内萼片长、内萼片宽、花药长、距宽、距长的影响显著,其参数均是早期和中期大于晚期;花部空间对内萼片长和内萼片宽的影响显著,而对花药长、距长和距宽的影响不显著。(2)开花时期对淫羊藿结实率无显著差异,但早期和中期的结实率要远远高于晚期;时间效应对果实形态参数的影响极显著,且大小均为早期大于中期和晚期;早期和中期的果实重量和种子数要显著高于晚期,而在晚期的果实种子数败育率较高。(3)在开花的空间效应中,基部和中部之间的结实率无显著差异,但两者显著高于顶部的结实率;基部的果实形态参数要高于中部和顶部;从果实重量和种子数来看,基部和中部要大于顶部,但顶部的果实败育率高于基部和中部。因此,对于淫羊藿的实际繁殖或药用,应采摘早期和中期开花的基部果实,其效果会更好。

淫羊藿和熟地煎剂对糖皮质激素受体下调模型大鼠糖皮质激素受体的影响

目的观察温阳、滋阴代表中药淫羊藿、熟地水煎剂对糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)下调模型大鼠GR的影响。方法皮下注射氢化可的松法,建立GR下调模型。72只SD大鼠随机分为正常组、模型组、淫羊藿组、熟地组,每组再分别分为3个不同时间点组(给药第3、7、14天),每组6只大鼠。采用放免法和流式细胞术检测给药后不同时间点(第3、7、14天)各组大鼠血浆皮质酮水平及脾淋巴细胞GR的蛋白表达和结合力的变化。结果不同时间点模型组血浆皮质酮水平与正常对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05),灌胃给药14天后,熟地组血浆皮质酮水平较模型组降低(P<0.05)。GR蛋白表达和结合力模型组较正常组明显下降(P<0.01),熟地给药7天和14天组较模型组均明显上调(P<0.01),淫羊藿给药14天组较模型组也升高(P<0.01)。结论淫羊藿、熟地水煎剂均能不同程度改善GR下调模型大鼠GR的蛋白表达和结合力,但其作用时间点不一致。

淫羊藿花蕾cDNA文库的构建与鉴定(英文)

基于sm art技术构建了淫羊藿花蕾cDNA文库并检测了其质量。结果表明,该文库重组率为95%,平均插入片段大小为1095 bp,文库滴度为2×106pfu/mL,是一个高质量的淫羊藿花蕾cDNA文库。此文库的建立将有助于克隆与次生代谢相关的基因,特别是淫羊藿黄酮特异合成代谢的基因,其次是克隆与花发育相关的基因。

中心组合设计-响应曲面法优化淫羊藿苷超声波提取工艺

【目的】采用中心组合设计-响应面法优化淫羊藿苷的超声波提取工艺。【方法】在单因素试验的基础上采用中心组合设计方法,研究了乙醇用量、超声提取时间、液(mL)固(g)比及其交互作用对淫羊藿苷提取率的影响。【结果】通过岭脊分析确定的淫羊藿苷最优提取条件为:乙醇体积分数68%、超声提取时间23min、液(mL)固(g)比32∶1,该条件下淫羊藿苷的提取率可达到0.661%,与理论值0.663%十分接近。【结论】确定了淫羊藿苷的最佳提取工艺,该工艺具有耗时短、提取率高、能量消耗少且工艺稳定可靠等优点。

基于性激素样作用的淫羊藿有效组分筛选研究

目的:将淫羊藿进行提取分离,拆分成互不交叉的各化学组分,并对各组化学组分进行性激素样作用的活性筛选。方法:将淫羊藿生药材水提并通过聚酰胺树脂进行分离,得到淫羊藿各组化学组分,并通过UPLC检测及PCA分析验证各组化学组分交叉情况。将淫羊藿各组化学组分连续灌胃雌雄各半大鼠12天后,取性腺器官计算其脏器系数,并用酶联免疫法测定其血清中睾酮(T)和雌二醇(E2)含量。结果:脏器系数测定结果显示,与空白组比较,淫羊藿全成分给药组、30%醇给药组和95%醇给药组可显著升高雄鼠的睾丸系数(P<0.05),其中全成分给药组、30%醇给药组对雄鼠精囊系数的升高十分显著(P<0.01)、对雌鼠的子宫系数升高也很明显(P<0.05);血清检测结果显示,与空白组比较,全成分给药组、30%醇给药组和95%醇给药组可显著升高E2含量(P<0.05),其中全成分给药组亦可升高血清中T含量(P<0.05)。结论:淫羊藿可分离成互不交叉的四组化学组分,分别为水层组、30%醇组、95%醇组和多糖组。除多糖组外,各组化学组分对不同性别大鼠均存在不同程度的性激素样作用,其中30%醇组最明显。

淫羊藿种子生活力检测及条件研究

对淫羊藿(Epimedium brevicornu Maxim)种子生活力变化进行研究。结果表明,淫羊藿种子在储藏180 d后生活力快速下降,储藏1年后基本失去生活力。淫羊藿种子生活力测定最佳条件是种子浸泡3 h,用1.0%TTC溶液染色50 min;生产上播种前用水浸泡3 h左右可以增加田间出苗率。

淫羊藿不同提取物的体外抑菌实验研究

目的:考察淫羊藿不同提取物的体外抑菌作用。方法:采用倍比稀释法考察淫羊藿不同提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌和枯草芽孢杆菌的抑菌作用,测定抑菌圈大小、最小抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果:淫羊藿提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌和枯草芽孢氏菌均呈现不同程度的抑菌能力,水提物的抑菌能力强于醇提物(P<0.05或P<0.01);水提物经过不同温度热处理后对各菌株的抑菌能力无显著差异(P>0.05),醇提物经高温处理后抑菌能力呈下降趋势,温度越高抑菌能力越弱(P<0.05)。淫羊藿水提物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌的MIC和MBC相同,分别为7.81,1.95,31.25 mg·ml^(-1),白色念珠菌的MIC和MBC分别为15.63,31.25 mg·ml^(-1);淫羊藿醇提物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的MIC和MBC相同,分别为15.63,3.91,62.5,62.5 mg·ml^(-1)。结论:淫羊藿提取物具有明显的抑菌效果,其中水提物优于醇提物。淫羊藿不同化学成分的极性会对抑菌效果产生影响。

药用植物淫羊藿克隆构型对异质性生境的响应

通过研究异质性生境中淫羊藿克隆构型,初步分析环境因子对淫羊藿克隆生长的影响及克隆构型可塑性对异质性生境的响应。结果表明:生境中相对光强、土壤含水量和土壤有机质含量对淫羊藿的克隆生长影响较大,土壤pH值对其影响较小。建立了淫羊藿克隆构型可塑性特征与环境因子的关系方程。淫羊藿以地下根茎为克隆器官进行克隆生长,在异质性生境中有着较强的克隆构型可塑性。保护淫羊藿地下根茎,以及生境中适当的光照、水分和养分有利于淫羊藿的克隆生长。

基于整合药理学平台探究淫羊藿对高脂血症的作用

目的通过现代生物信息挖掘技术,探究淫羊藿对高脂血症的作用靶标及参与的生物学过程,并通过动物实验观察淫羊藿降血脂效果。方法借助TCMIP 2.0 整合药理学平台,检索淫羊藿的所有成分及靶点,并获得高脂血症的疾病所有靶标,构建蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络,富集分析药物干预疾病关键靶标,取前二十分析淫羊藿在治疗高脂血症中的生物过程及作用途径,通过高脂喂养大鼠,给予淫羊藿,检测大鼠血脂,进行病理切片的HE染色。结果对于淫羊藿治疗高脂血症共获得23个关键核心靶标,其中药物与疾病共有靶标2个,分别为 PPARγ和MTTP,靶标富集的生物学过程主要与蛋白质的活化,能量的代谢等途径相关,淫羊藿对高脂饮食大鼠血脂具有降低作用,对肝脏具有保护作用。结论淫羊藿在治疗高脂血症方面具有一定的作用,可对脂质代谢产生调控。