红肉火龙果α-淀粉酶基因HpAMY3的克隆及功能鉴定

为了解α-淀粉酶在红肉火龙果〔Hylocereus polyrhizus(F.A.C.Weber)Britton et Rose〕果实淀粉降解中的作用,对红肉火龙果α-淀粉酶基因HpAMY3进行克隆和生物信息学分析,检测果实发育期间该酶的活性及其编码基因的表达,同时对HpAMY3重组蛋白的淀粉降解活性进行分析。结果表明:HpAMY3基因的开放阅读框长度为2742 bp,编码913个氨基酸;HpAMY3蛋白的理论相对分子质量为102370,理论等电点为pI 6.02,预测此蛋白位于叶绿体,且为亲水性蛋白。系统进化分析表明HpAMY3与拟南芥〔Arabidopsis thaliana(Linn.)Heynh.〕AtAMY3的亲缘关系最近,均属于AMYⅢ类。亚细胞定位实验结果显示HpAMY3定位于本氏烟草(Nicotiana benthamiana Domin)叶片的叶绿体,表明HpAMY3具有质体定位的特点。在授粉后20和23 d,红肉火龙果果实的α-淀粉酶活性较低;在授粉后25 d,α-淀粉酶活性显著(P<0.05)升高;在授粉后27和30 d,α-淀粉酶活性保持在较高水平。红肉火龙果果实的HpAMY3基因相对表达量在授粉后20和23 d较低,在授粉后25和27 d持续升高,在授粉后30 d略有降低。红肉火龙果果实发育期间α-淀粉酶活性与HpAMY3基因相对表达量的相关性较高(R^(2)=0.94)。体外淀粉降解活性实验结果显示:在含有HpAMY3重组蛋白的反应体系中均检测到麦芽糖和麦芽三糖,且二者含量极显著(P<0.01)高于含有载体对照pDR196的反应体系。综合上述结果,HpAMY3蛋白可能定位于红肉火龙果果实的淀粉体;在果实发育期间,HpAMY3基因上调表达,HpAMY3具有淀粉降解活性。

WHAT I LEARNED FROM BRITTON CHANCE

In this personal and reflective article,I honor the memory of Britton Chance and explain how his mentorship during my tenure at the Johnson Research Foundation greatly impacted my scientific career.I emphasize the critical role of mentors on the development of scientists and present some wonderful and remarkable attributes that characterized Britton Chance's scientific and personal style.

MEMORIES OF BRITTON CHANCE AND THE BRITTON CHANCE AWARD

Britton Chance has been a person of superlative quality,a close friend,a great teacher and researcher,and a well-known and revered scientist in biochemistry.

A PERSONAL REFLECTION ON MY PH.D. ADVISOR DR. BRITTON CHANCE

This article briefly reflects some of my interactions with Dr.Britton Chance(BC),from a perspective of his graduate student.

紫苏、白苏的抑菌实验

用不同溶剂浸泡或处理紫苏后 ,进行抑菌实验 ,结果表明 :10 %以上浓度的紫苏水浸液 ,12 .5%水煎液和乙醇提取液对白色念珠菌、新型隐球菌以及红色毛癣菌、石膏样小孢子癣菌、絮状表皮癣菌有较好的抑菌效果。紫苏、皱紫苏、白苏对真菌和细菌均有抑菌作用 ,但皱紫苏对绿脓杆菌、白苏对克柔氏念珠菌。

紫红肉火龙果果皮色素提取工艺的响应面法优化

在单因素试验基础上,选择提取时间、乙醇体积分数、料液比、pH为影响因素,以紫红肉火龙果[Hylocereus polyrhizus(Weber)Britton&Rose]果皮色素提取液吸光度为响应值,应用中心组合(Box-Behnken)试验设计建立数学模型,进行响应面分析,以优化提取工艺。结果表明,紫红肉火龙果果皮色素提取的最佳工艺条件为提取时间51 min、乙醇体积分数32%、料液比1∶45(m/V,g∶mL)、pH 5.3。

云南紫苏资源的酯酶同工酶分析

采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析了9份云南紫苏地方品种的酯酶同工酶,结果表明:这9份紫苏品种存在着6种酶谱类型,并且聚合成5支,支持将云南省紫苏属植物分成回回苏、紫苏、耳齿紫苏、野生紫苏和白苏5个变种的观点。

不同方法提取的白苏叶挥发油的气质联用成分分析

目的:采用水蒸气蒸馏法及超临界 CO_2流体萃取法从白苏叶中提取挥发油,用气相色谱-质谱联用技术对其化学成分进行分析。方法:采用水蒸气蒸馏法与超临界 CO_2流体萃取法从白苏叶中提取挥发油,采用不同类型的毛细管柱进行分析,找出最佳条件,用归一化法测定其百分含量。并用气相色谱-质谱法对化学成分进行鉴定。色谱条件:SE-54毛细管柱(30m×0.25mm,0.25μm);程序升温:初始温度60℃,保持4min,以12℃·min^(-1)升至180℃,保持2min,再以5℃·min^(-1)升至250℃,保持50min;分流进样,分流比30:1;进样口温度280℃。结果:水蒸气蒸馏法提取挥发油共鉴定了45种成分,占挥发油总成分的88%以上;超临界 CO_2流体萃取法提取的挥发油共鉴定了53种成分,占挥发油总成分的88%以上。结论:超临界CO_2流体萃取法提取的挥发油能更真实、全面地反映药材中的化学成分。

紫苏挥发油抑制皮肤癣菌及的作用

用水蒸气蒸馏法得到紫苏挥发油 ,进行抑菌以及抑制超氧阴离子自由基的实验。结果表明 :紫苏挥发油对红色毛癣菌 ,石膏样小孢子癣菌 ,絮状表皮癣菌有较好的抑菌作用 ,并能有效的抑制O ·2

白苏提取物的毒性研究

瘤胃分别注射白苏挥发油及水煎液 ,观察中毒山羊的临床病理特征 ,研究白苏提取物的毒性。结果表明 ,瘤胃注射 2 0 m L白苏挥发油 (相当于 4.1 6 7kg新鲜白苏茎叶 ) ,山羊出现明显的中毒反应 ;而瘤胃注射 5 0 0 m L白苏水煎液 (相当于 5 kg新鲜白苏茎叶 )对其无影响。中毒山羊的心、肺血流量先上升后下降 ,主要临床病理特征为 :颈静脉怒张 ,胸腔积液 ,心脏扩张、心壁变薄、心肌有出血点 ,肺水肿 ,支气管、细支气管内有大量的泡沫。试验进一步证实 ,白苏挥发油是动物白苏中毒的主要致病因子 ,其病理演变过程为急性心衰 ,导致肺水肿。

紫苏研究的现状与展望

综述了紫苏在挥发油成分的基因调控和资源综合利用等方面的研究成果 ,并对今后紫苏研究的趋势作了展望。

紫苏腺毛的形态结构和发育的研究

紫苏（Perillafrutescens（L．）Britton）叶上腺毛的研究表明：叶上腺毛主要有两种类型，一是头状腺毛，二是后状腺毛。两类腺毛都是由1个基细胞、1个柄细胞和由分泌细胞组成的头部构成。头状腺毛的头部由1个、2个或4个分泌细胞构成，其头部呈圆球形或半圆球形。盾状腺毛的头部也由1个、2个、4个或8个分泌细胞构成，其分泌细胞横向扩展使头部呈盾状。分泌盛期，大量分泌物充满角质层下间隙。两类腺毛的原始细胞均起源于叶原基或幼叶的原表皮层细胞，它通过两次平周分裂形成1个基细胞、1个柄细胞和1个头细胞，头细胞不分裂或依次进行1—3次垂周分裂，分别形成单细胞、2细胞、4细胞或8细胞的头部。

紫苏花蜜腺的发育解剖学研究

紫苏花蜜腺位于不均等分裂的花盘裂片上 ,属于子房基部的盘状蜜腺 . 3枚小裂片上的蜜腺由分泌表皮和产蜜组织组成 ,而另一枚大裂片上的指状蜜腺则由分泌表皮、产蜜组织和维管束组成 . 4枚蜜腺的表皮细胞外均具薄的角质层 ,仅在指状蜜腺的顶部分布着密集的气孔器 .蜜腺来源于花盘表面的 2～ 3层细胞 .在蜜腺发育过程中 ,液泡和淀粉粒呈现有规律的消长变化 ,这与蜜汁的合成与分泌有关 .

紫苏子和白苏子中熊果酸和齐墩果酸的分离与检测

采用反相高效液相色谱-光电二极管阵列检测器联用法（RP-HPLC-PAD）对紫苏子、白苏子中的熊果酸和齐墩果酸进行了分离和含量测定。色谱柱为Kromasil C18柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相为甲醇-水（87：13），检测波长210nm，流速0．8mL／min，柱温28℃。熊果酸进样量在0．10～4．00μg之间呈良好的线性关系，平均加样回收率为100．6％，RSD为1．6％；齐墩果酸进样量在0．05～2．00μg之间呈良好的线性关系，平均加样回收率为98．7％，RSD为1．2％。6批样品测定结果表明，该方法灵敏、准确，重现性好，可用于紫苏子和白苏子中2种三萜酸的含量测定。

紫苏腺毛的形态发生研究

紫苏叶上有两种腺毛：盾状腺毛和头状腺毛。两者都具1个基细胞、1个柄细胞和头部。前者的头部可由1、2、4或8个分泌细胞组成，扩展成盾状；后者的头部由1、2或4个分泌细胞组成，聚成圆球状。两种腺毛的原始细胞都来源于原表皮细胞，经两次平周分裂产生基细胞、柄细胞和顶细胞。在腺毛后期的形态发生中，柄细胞的分化状态决定腺毛的类型。若柄细胞保持扁平状且处于分生状态时，其顶细胞将发育成盾状腺毛的头部；若柄细胞纵向引长并迅速液泡化时，其顶细胞将发育成头状腺毛的头部。

中日两国汇率发展历程及启示

汇率制度的安排对国家的经济发展有重要影响。文章对比中日两国汇率发展历程发现:中日两国汇率发展历程有相似性;汇率变化是各自国内经济社会发展动力和国际经济政治压力综合作用的结果。研究阐明:一国汇率制度的安排应是国家意志的体现;新形势下的人民币汇率变化应立足中国当前国情采取平稳审慎的态度,以避免重蹈日元被动大幅升值给日本经济社会造成负面影响的覆辙,确保金融危机下的中国经济平稳较快地发展。

白苏不同部位中齐墩果酸和乌索酸的测定比较

建立反相高效液相-光电二极管阵列检测器法(RP-HPLC-PAD)测定白苏叶、茎、根中的齐墩果酸和乌索酸,并对2种三萜酸成分进行定性定量分析。采用KromasilC18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以甲醇-0.2%磷酸溶液(90:10,v/v)为流动相进行等度洗脱,流速0.8mL/min,检测波长210nm,柱温25℃。齐墩果酸在0.1248μg^2.496μg、乌索酸在0.2184μg^4.368μg范围内具有良好的线性关系,平均回收率分别为98.5%和101.3%。选定的色谱条件可精确的检测白苏不同部位中齐墩果酸和乌索酸的含量。

环丙沙星在BTR缓冲液中的紫外光谱性质研究与应用

研究了不同缓冲溶液 ,不同pH介质中环丙沙星的紫外光谱性质 ,提出在BrittonRobinson(BTR)缓冲溶液中为紫外分光光度法测定环丙沙星的最佳条件 .在吸收波长 2 77nm处 ,测得其表观摩尔吸收系数为 2 .6 3× 10 4L/mol.cm ,浓度在 3.0～ 2 3.0mg/L范围内 ,吸收度与浓度符合比尔定律 ,该法成功用于药物制剂中环丙沙星含量的测定 。

洛美沙星在酸性介质中的紫外光谱性质的研究及应用

本文首次提出采用三酸作为缓冲液 ,对洛美沙星进行紫外光谱的扫描 ,发现在酸性条件下 ,洛美沙星的紫外吸收增强 ,其最大吸收波长为 2 86 nm,药物浓度在 3 .0 mg/L～ 2 1 .0 mg/L(r=0 .9995 )范围内符合比耳定律 .表观摩尔吸收系数 ε=3 .2× 1 0 4 L· mo L- 1· cm- 1,最低检出限为 1 .5 mg/L.该法可成功地用于药物剂中洛美沙星含量的测定 .

司帕沙星在BTR缓冲溶液中的紫外光谱性质研究与应用

研究了不同pH介质中司帕沙星的紫外光谱性质 ,发现pH3.0的BTR缓冲液为紫外分光光度法测定司帕沙星的最佳条件 .在吸收波长 2 98nm处 ,其表观摩尔吸光系数为 2 .62×1 0 4 Lmol- 1 cm- 1 ,司帕沙星在 1 .8mg/L3.0mg/L浓度范围内符合比尔定律 ,其回收率为 1 0 0 .7% ,相对标准偏差为 0 .2 3% .