蚕豆蛋白的分离提取方法

蚕豆富含蛋白质、淀粉和脂肪等多种营养成分,营养价值丰富,是我国重要的植物资源。本文结合国内外相关领域的研究文献,阐述蚕豆蛋白的分离提取方法,旨在为提高蚕豆蛋白提取率及蚕豆深加工水平提供一定的理论支持。

铜螯合亲和层析分离抗氧化活性蚕豆蛋白酶解物

采用铜离子螯合亲和层析柱对不同铜螯合能力的蚕豆蛋白酶解物组分进行分离,并探讨其抗氧化活性机制与铜螯合能力之间的关系。结果表明,金属亲和层析的最优条件为:平衡缓冲液为p H 5.0,浓度为0.05 mol/L的Na Ac-HAc;上样量为20 mg/m L的蚕豆蛋白酶解物1 m L;洗脱剂为0.04 mol/L咪唑。洗脱得到不能螯合铜的蚕豆蛋白酶解物组分F_1及能螯合铜的组分F_2,测定其总还原力、抑制羟自由基能力与铜螯合量,发现抗氧化活性的关系为F_2>蚕豆蛋白酶解物>F_1(P<0.05),铜螯合量的关系也为F_2>蚕豆蛋白酶解物(未经分离)>F_1(P<0.05),表明蚕豆蛋白酶解物的铜螯合活性越高,其抗氧化活性越高。

酶解蚕豆蛋白制备多肽酒及其抗氧化性研究

以蚕豆蛋白为原料,采用碱性蛋白酶酶解、酒精发酵制备蚕豆多肽酒,并对其抗氧化性进行了研究。结果表明:蚕豆蛋白酶解优化工艺为底物浓度32 g/L,水解温度43.2℃,酶用量9 821.12 U/g,pH 9.50,在此条件下酶解2 h,蚕豆蛋白的水解度达到19.64%。以蚕豆酶解液为原料制备多肽酒的发酵工艺为加糖量20%,酵母接种量0.22%,发酵温度28℃,发酵时间6 d,在此条件下制得的蚕豆多肽酒的酒精含量为9.6%,呈透明的棕黄色,口感醇正、鲜爽、具有发酵酒的醇香。本试验条件下制备的蚕豆多肽酒具有较强的抗氧化性。

Alcalase碱性蛋白酶酶解蚕豆蛋白的研究

蚕豆经去皮、粉碎、除淀粉后,得到蚕豆粗蛋白。采用Alcalase碱性蛋白酶酶解蚕豆蛋白制备蚕豆蛋白水解物。通过单因素试验,调查了pH、底物质量分数、酶用量(E∶S)和酶解温度等因素对Alcalase碱性蛋白酶酶解蚕豆蛋白效果的影响。通过正交试验设计,确定Alcalase碱性蛋白酶酶解蚕豆蛋白适宜的工艺参数:酶解温度60℃,底物质量分数3%,酶用量(E∶S)8%,pH 9.0,此条件下,蚕豆蛋白水解度(DH)达最大,为21.67%。该结果与Alcalase碱性蛋白酶水解大豆蛋白、绿豆蛋白和小麦蛋白等适宜条件参数接近。

碱性蛋白酶水解蚕豆蛋白的条件优化

采用碱性蛋白酶酶解蚕豆分离蛋白,通过正交试验确定最佳酶解反应条件:反应温度为50℃,pH值为8.5,酶与底物比为16000U/g,底物浓度为60g/L。在此条件下,水解度可以达到15.55%。

蚕豆蛋白提取工艺的研究

对酸、碱提取蚕豆蛋白进行了比较研究。结果表明,碱法提取率可达6 8%以上,并通过单因素分析,正交试验,优化出最佳提取工艺条件。

蚕豆蛋白质提取工艺的研究

探讨蚕豆蛋白质提取影响因素,以单因素和正交试验确定最佳工艺条件。结果表明,蚕豆蛋白质的等电点PI为4.5,提取蚕豆中蛋白质最佳工艺条件为:温度40℃,提取时间2h,料液比1∶5,碱液浓度5×10-5mol/L。

超声提取蚕豆蛋白的研究

采用超声波法提取蚕豆蛋白研究了蚕豆蛋白的提取工艺,通过单因素试验,得出最适提取条件:料液比为1:12(g/mL),pH为8.0,超声提取功率为660W,超声提取处理时间为20min,蛋白提取率达到89.17%。通过等电点沉淀法得提取蚕豆蛋白的最佳沉淀pH为4.2,蛋白沉淀率为90.90%。

蚕豆蛋白质的营养价值及其综合利用的研究

本文对蚕豆蛋白的氨基酸组成和其他营养成分进行了分析测定，还介绍了蚕豆浓缩蛋白和分离蛋白的制取工艺以及其在食品、饲料工业中的应用。

具有金属螯合活性的蚕豆蛋白酶解物的制备

目的探究蚕豆蛋白酶解物的金属螯合活性,研究其金属螯合活性与其抗氧化活性的关系。方法分别采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶对蚕豆蛋白进行酶解,并测定其水解物的抗氧化活性与金属螯合活性,选用碱性蛋白酶为酶解蚕豆蛋白制取金属螯合肽的最适酶,以酶解产物的水解度、抗氧化活性及金属螯合活性为测定指标获得合适的水解条件。结果 3种蛋白酶的蚕豆蛋白酶解产物都有金属螯合活性和抗氧化活性,碱性蛋白酶为酶解蚕豆蛋白的最适酶,最适酶解时间为4 h时,得到的酶解产物金属离子螯合率为88.22%,抑制羟自由基能力为220.70 U/mg,总还原力为0.03 U/mg。结论蚕豆蛋白酶解物具有一定的金属离子螯合活性与抗氧化活性,水解度对蚕豆蛋白酶解物的金属离子螯合活性及抗氧化活性有明显的影响,蚕豆蛋白酶解物的金属螯合活性与总还原力及抑制羟自由基能力呈现显著的正相关性,相关系数分别为0.925、0.968(P<0.01)。

胰蛋白酶有限水解蚕豆盐溶性蛋白的研究

研究了胰蛋白酶水解蚕豆盐溶蛋白的动力学及其水解物的水溶性。高压液相色谱的实验结果证实胰蛋白酶可以水解蚕豆盐溶蛋白。底物浓度5%、酶与底物之比(E/S)为10U/g蛋白质、pH8.0、温度45℃的酶反应条件下,水解6000s时的蚕豆盐溶性蛋白的水解度达到6.8。蚕豆盐溶蛋白经过胰蛋白酶有限水解后水溶性显著增加,与蚕豆盐溶性蛋白相比,pH8.0时水解度2.1%、4.5%、6.8%的蚕豆盐溶性蛋白水解物的水溶性分别提高350%、390%和510%。

蚕豆蛋白酶法改性增溶工艺优化及功能性研究

为了拓宽蚕豆蛋白在食品中的应用,解决传统工业方法制备的蚕豆蛋白溶解性差的问题,本文以传统的碱溶酸沉法提取的蚕豆蛋白为原料,采用限制性酶法对其进行增溶改性工艺优化,并对改性后的蚕豆蛋白的功能性质进行了研究。结果表明：风味蛋白酶是提高蚕豆蛋白溶解性的适宜用酶,酶解改性的最佳工艺条件为：料液比1∶14、酶加量（ES）0.1%、温度58℃、pH值7.5、酶解时间30 min,此条件下蚕豆蛋白的溶解性达到99.73%。改性后的蚕豆蛋白的溶解性、起泡性、乳化性及乳化稳定性在酸性和碱性条件下均显著提高,泡沫稳定性在碱性条件下显著提高,持水力在pH值为2～12的范围内显著下降。

不同蚕豆品种的品质分析

[目的]研究不同蚕豆(Vicia faba Linn.)品种的品质差异。[方法]对111个不同蚕豆品种的种子蛋白质、单宁、钙以及硒含量进行了测定。[结果]蛋白质含量优异的品种有13个,单宁含量优异的品种有20个,钙含量优异的品种有16个,硒含量优异的品种有18个,通过对蛋白质、单宁、钙以及硒含量进行排序比对,筛选3个单项优质的品种分别为法7(1638)、青海83-26-12,2005-00,3个多项优质品种分别为H8096-3、青海马牙-1-1和伊拉克45-1。[结论]该研究可为进一步研究和加工利用蚕豆提供参考依据。

蚕豆蛋白的提取及NaCl浓度和pH值对其溶解性和乳化性的影响(英文)

蚕豆蛋白富含微量元素和人体必需的8种氨基酸,具有较高的开发价值。采用超声提取和水提取的方法提取蚕豆蛋白,研究了NaCl浓度和pH对蚕豆蛋白提取率、沉淀、功能性的影响。在pH值为8～12,超声提取和水提取均有较高的提取率。蚕豆蛋白的等电点在pH4.0～4.2之间。在pH4溶解性和乳化性最低,pH值在4～12时溶解性和乳化性随pH值的升高而升高,pH值为12时溶解性和乳化性最高。NaCl浓度从0到1.0mol/L,溶解性和乳化性升高;当NaCl浓度继续增加,在pH4、pH7溶解性和乳化性随之下降。在相同的NaCl浓度和pH值时,超声提取比水提取蛋白的溶解性和乳化性高。该研究为蚕豆蛋白的提取工艺的确定及其在食品中的应用提供依据。

蚕豆萎蔫病毒纯化和病毒蛋白质及RNA组份分析

属蚕豆萎蔫病毒（ＥＢＷＶ）血清Ⅱ型的分离物Ｂ－９３４接种昆诺黎，采收的病叶先用含蔗糖的高浓度磷酸钾盐缓冲液，后用ＴｒｉｔｏｎＸ－１００处理，成功地提取到了大量病毒粒子，提纯病毒得率为１３４ｍｇ／ｋｇ病叶。提纯病毒在电镜下可观察到大量球状病毒粒子，直径约２５ｎｍ。提纯的ＢＢＷＶ经甘油梯度超离心后可观察到３个组份，分别称Ｔ、Ｂ和Ｍ组份，其中Ｔ为空壳蛋白，Ｂ和Ｍ为核蛋白。各组份经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定，证明其外壳蛋白均由两条多肽链组成，分子量分别为４２．５ｋＤ和２１．２ｋＤ。病毒颗粒中ＲＮＡ组份分析及病叶组织中ｄｓＲＮＡ分析均表明，ＢＢＷＶ病毒基因组由两条单链ＲＮＡ分子组成，分子量约为２．２×１０￣６和１．５×１０￣６。电泳分析表明，ＢＢＷＶ病毒粒子电泳后产生类似于豇豆花叶病毒组（Ｃｏｍｏｖｉｒｕｓｅｓ）的两个电泳型。

酸沉法和超滤法制备蚕豆分离蛋白的功能性比较

分别采用碱溶酸沉法和超滤法制备蚕豆分离蛋白,比较了用两种方法制备的分离蛋白在功能性质上的区别.结果表明:超滤法生产的分离蛋白其溶解性、吸水性、乳化性及乳化稳定性均优于酸沉法制备的分离蛋白.而吸油性则比酸沉法制备的分离蛋白差.

响应面法优化蚕豆蛋白酶解工艺条件的研究

考察了碱性蛋白酶、胰蛋白酶和中性蛋白酶对蚕豆蛋白的酶解效果,探讨了水解度（DH）与酶解产物抗氧化活性间的关系.通过单因素试验和响应面分析法,得到碱性蛋白酶酶解工艺的最佳条件.结果表明,温度50℃、pH8.0、酶底比8％、底物浓度3％条件下酶解3h,水解度0～22％内,碱性蛋白酶较胰蛋白酶和中性蛋白酶水解蚕豆蛋白效果好;DH与还原能力（R2 =0.68 ～0.81）及ABTS清除能力（R2 =0.98 ～0.99）具有较好的相关性,碱性蛋白酶酶解液较其他2个酶解液有较好的还原能力和ABTS清除能力;优化后的最佳酶解工艺参数为：酶底比8％,温度50℃、pH 7.6,对蚕豆蛋白还原能力的影响顺序为酶底比＞pH＞温度;在此条件下,蚕豆蛋白酶解液的还原能力理论值为0.174,验证试验测得还原能力为0.173,与理论值接近.

氮磷钾、密度最优组合对蚕豆蛋白质和总黄酮及产量的影响

以蚕豆品种青海12号为材料,通过筛选出的施肥量和密度的最优组合试验,研究其对蚕豆蛋白质和总黄酮及产量的影响。结果表明,最优组合为:N34.50kg/hm2、P2O5138.60kg/hm2、K2O135.00kg/hm2、密度13.50万株/hm2,与常规施肥相比:单产增加18.77%,蛋白质含量增加2.59%,总黄酮含量增加16.23%。

几种豆类蛋白质组成和结构比较

该文比较分析大豆、蚕豆和豌豆三种豆类蛋白质的组成和结构,并重点对这三种豆类7S和11S球蛋白的氨基酸组成.亚基结构及在溶液中缔合-解离性质进行比较和分析。

蚕豆萎蔫病毒2号VP37蛋白在BY-2细胞内的定位

将绿色荧光蛋白(GFP)连接于蚕豆萎蔫病毒2号(Broad bean wilt virus2,BBWV-2)VP37蛋白的N-端,构建融合基因GFP-VP37,用农杆菌法在BY-2悬浮细胞内进行表达,激光共聚焦显微镜观察融合蛋白的分布。结果显示:GFP-VP37主要定位于细胞核的周围呈网络状,并在细胞边缘形成点状结构;ER-tracker标记显示VP37在细胞内与内质网共定位;电镜免疫金标记显示VP37蛋白主要定位在细胞质中;用BFA处理转染细胞后,VP37在细胞质及细胞边缘的定位受到抑制。推测内质网参与VP37的细胞内转运和分布。