青花菜雄性不育杂交制种技术

青花菜目前大多采用雄性不育杂交制种,前期由于缺乏经验,制种产量低,种子品质差,一定程度上制约了新品种的推广应用。通过多年的试验与摸索,台州市农业科学研究院西兰花课题组总结出了一套“三控一补”青花菜高产制种技术,提高了制种产量和种子品质,加速了新品种的推广速度。

不同剂量长双歧杆菌联合西兰花种子水提物对结肠炎的缓解作用

长双歧杆菌CCFM1206分离自健康成人粪便,可将萝卜硫苷转化成萝卜硫素(sulforaphane,SFN),该文研究了西兰花种子水提物(broccoli seed extract,BSE)以及其联合不同剂量的长双歧杆菌CCFM1206(10^(8)、10^(9)和10^(10)CFU)对小鼠肠内SFN水平的调控以及对右旋糖酐硫酸酯钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导结肠炎的缓解作用。研究发现,与BSE组相比,补充10^(9)和10^(10)CFU长双歧杆菌CCFM1206后,小鼠粪便中SFN和N-乙酰萝卜硫素(sulforaphane N-acetyl-L-cysteine,SFN-NAC)总量由30.84μmol/g分别提高至45.48和49.32μmol/g(P<0.05);仅摄入BSE(200 mg/kg小鼠体重),能有效缓解小鼠结肠缩短、降低炎症因子水平(IL-6、IL-1β和TNF-α)、增强抗氧化酶活力(GSH、SOD)、上调紧密连接蛋白的基因转录水平和蛋白表达水平,激活Nrf2信号通路并抑制NF-κB信号通路;补充10^(8)CFU长双歧杆菌CCFM1206效果与BSE无显著差异,而补充10^(9)和10^(10)CFU长双歧杆菌CCFM1206在激活Nrf2和抑制NF-κB信号通路方面更加优异,这可能与产生更多SFN有关。该研究可为开发缓解结肠炎的膳食制剂提供理论依据和剂量参考。

硫代葡萄糖苷浸种对青花菜种子萌发及生理特性的影响

以青花菜种子为试验材料,采用培养皿进行发芽试验,设置蒸馏水、200 mmol/L NaCl和15%PEG-60003种培养条件,研究不同质量浓度[0μg/mL(CK)、0.94μg/mL、1.88μg/mL、3.75μg/mL、7.50μg/mL、15.00μg/mL]硫代葡萄糖苷浸种对青花菜种子萌发指标、幼苗形态指标及生理指标的影响。研究结果表明,与CK相比,蒸馏水培养下,硫代葡萄糖苷浸种对青花菜种子的发芽率和发芽势没有显著影响,7.50μg/mL硫代葡萄糖苷浸种的青花菜根冠比显著提高;1.88~7.50μg/mL硫代葡萄糖苷浸种的青花菜POD活性显著高于对照,其中3.75μg/mL硫代葡萄糖苷浸种能显著提高青花菜的SOD和CAT活性,且MDA含量显著低于对照。盐胁迫下,7.50μg/mL硫代葡萄糖苷浸种能显著提高青花菜的SOD、POD活性,显著降低MDA含量。干旱胁迫下,硫代葡萄糖苷浸种均能显著提高青花菜种子萌发指标,显著降低青花菜MDA含量;0.94μg/mL硫代葡萄糖苷浸种能显著增加青花菜的主根长,1.88μg/mL和3.75μg/mL硫代葡萄糖苷浸种能显著提高青花菜的根冠比;15.00μg/mL硫代葡萄糖苷浸种能显著增加青花菜的POD活性。隶属函数分析结果表明,蒸馏水培养和干旱胁迫下3.75μg/mL硫代葡萄糖苷浸种及盐胁迫下7.50μg/mL硫代葡萄糖苷浸种的隶属函数值最高。综上所述,硫代葡萄糖苷浸种能有效缓解青花菜种子萌发期和幼苗期旱害和盐害,干旱胁迫下浸种最适质量浓度为3.75μg/mL,盐胁迫下浸种最适质量浓度为7.50μg/mL。

秋水仙素处理对青花菜种子萌发及幼苗生长的影响

为探究秋水仙素处理对青花菜种子萌发及幼苗生长的影响,本试验以青花菜种子为材料,采用不同质量分数(0.03%、0.05%、0.07%、0.10%、0.20%、0.30%)秋水仙素浸种不同时间(12、24 h),以蒸馏水浸种处理为对照(CK),测定种子萌发指标及幼苗的形态和生理生化指标。结果表明:与CK相比,浸种12 h时,各处理组发芽率、发芽势无显著性差异,0.20%、0.30%秋水仙素处理组的活力指数显著增加;浸种24h时,各处理组各发芽指标均降低;0.10%~0.30%秋水仙素处理使青花菜幼苗鲜质量、茎粗增加,株高、叶长、叶宽降低,抗氧化酶(SOD、CAT)活性及渗透调节物质、硫苷含量升高,而丙二醛含量下降;对青花菜测定指标进行隶属函数分析得出,0.30%秋水仙素浸种12和24 h的平均隶属函数值排名均为第一。综合分析得出,0.30%秋水仙素浸种12 h为促进青花菜种子萌发和幼苗生长的最佳处理组合。

盐驯化青花菜种子提高幼苗耐盐性的研究

通过研究盐驯化青花菜种子对提高其幼苗耐盐性的影响,为青花菜耐盐栽培提供理论支撑。本研究采用0、10、25、50、75、100 mmol/L NaCl对青花菜种子进行盐驯化7 d,以发芽指标为标准筛选出75、100 mmol/L为盐驯化浓度,测定其幼苗在高盐处理(225 mmol/L NaCl)下的光合色素含量、抗氧化酶活性及渗透调节物质含量。结果表明:盐驯化青花菜种子使其幼苗在高盐胁迫下的SOD、CAT活性及光合色素、脯氨酸和可溶性蛋白含量较CK2(盐对照)显著增加,可溶性糖和MDA含量显著下降。其中75 mmol/L驯化组与CK2相比,总叶绿素、叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素显著提高283.95%、289.22%、277.13%、276.64%,SOD活性显著增加16.64%,脯氨酸含量显著增加120.76%,POD活性显著增加414.75%。综合分析表明,盐驯化青花菜种子可以提高其幼苗的耐盐性,隶属函数分析结果得出,75 mmol/L NaCl驯化青花菜种子的驯化效果最佳。

SP850树脂分离萝卜硫素

为了提高萝卜硫素的纯度,研究了大孔树脂分离纯化萝卜硫素工艺。通过静态吸附和静态洗脱实验,从8种不同性质的树脂中筛选出适合分离萝卜硫素SP850树脂,并对其动态吸附和动态洗脱条件进行了研究。结果表明:SP850树脂处理约20 BV(1BV=10mL)萝卜硫素溶液时才开始泄漏,并且动态吸附曲线可以用Bo-hart-Adams数学模型描述。SP850树脂纯化萝卜硫素的适宜的工艺条件为:上柱液体积为20 BV,上柱流速为5BV/h,洗脱液乙醇的体积分数为50%,洗脱液体积为6BV,洗脱速度为3 BV/h,在此条件下,吸附量为32.83 mg/mL树脂,洗脱率高达91.84%,萝卜硫素产品纯度可达88.7%。

西兰花种子酶解生成萝卜硫素的条件研究

萝卜硫素是蔬菜中发现的具有很强抗癌活力的一类异硫代氰酸盐.采用绿玉西兰花种子为原料,研究了脱脂、pH值、温度、时间、缓冲液质量分数(w)、Vc质量浓度(ρ)等,对西兰花种子酶解生成萝卜硫素的影响.通过实验得到酶解的较优条件是:用石油醚脱脂,在pH为5.0的Tris-HCl缓冲液中,温度为15℃,质量比m(种子)∶m(缓冲液)=1∶3.33,缓冲液的ρ(Vc)为0.07 kg/m3,酶解时间为16 h.

西兰花种子及其愈伤组织中萝卜硫素含量比较

采用高效液相色谱法对西兰花种子及其不同器官诱导的愈伤组织中萝卜硫素的含量进行比较。结果表明供试的9个品种的种子中萝卜硫素含量差异显著,"玉皇"含量最高,达942.758μg/g;"中青9号"含量最低,为172.808μg/g。不同器官诱导的愈伤组织中萝卜硫素平均含量子叶>胚轴>胚根,种子中的平均含量分别为各器官获得愈伤组织平均含量的1.45、2.37和2.92倍。

西兰花种子中萝卜硫素的提取工艺研究

以西兰花种子为原料,提取其中的萝卜硫素,考察了水解pH值、水解时间、萃取溶剂对提取率的影响。结果表明,在水解pH值为4.0、水解时间为12h、萃取溶剂为乙酸乙酯时,萝卜硫素提取率达3.5%,提取纯度超过95%。

西兰花籽中萝卜硫苷的提取、分离及结构鉴定

研究一种从西兰花籽中提取分离萝卜硫苷(4-甲基亚磺酰丁基硫代葡萄糖苷)的方法。用甲醇溶液从西兰花籽中提取硫苷,经弱阴离子交换树脂纯化得到萝卜硫苷粗品,通过半液相制备色谱进一步分离纯化,制得萝卜硫苷纯品。利用液-质联用、核磁共振、红外光谱检测、紫外光谱检测等方法对其进行结构确定,结果符合萝卜硫苷的分子结构。此方法适用于萝卜硫苷的简单有效提取。

SSR分子标记鉴定青花菜杂交种‘津青一号’的纯度

以青花菜新品种‘津青一号’及其亲本为试验材料,用SSR分子标记技术鉴定杂交种种子纯度,从50对SSR引物中,筛选出了1对在杂交种和父、母本之间存在显著差异的引物(L21),该引物扩增片段电泳条带清晰可辨,且杂交种含有父、母本的特异互补带型。利用该引物对108株‘津青一号’杂交种进行纯度鉴定,结果为96.30%,与大田形态鉴定结果 98.15%相比,SSR标记与大田种植鉴定结果基本一致。这表明,引物L21可用于‘津青一号’的纯度鉴定。

利用模型方法研究西兰花种子萌发的温度特性

为研究西兰花种子萌发对不同温度的响应,以西兰花‘台绿1号’为材料,在4~38℃温度区间进行种子萌发实验,结合Logistic函数和积温模型公式计算种子萌发的最低温度、最适温度和积温。结果表明：西兰花‘台绿1号’种子在16~32℃温度区间发芽率在93%以上,发芽率较高,而4、10℃低温条件下平均发芽时间最长,发芽势为0,38℃高温发芽率较低,低温和高温明显抑制西兰花种子萌发;西兰花‘台绿1号’种子萌发适宜温度范围是20~32℃,最适温度为32℃,最低温度Tb为3.98℃;西兰花‘台绿1号’种子累积萌发率达50%所需要的积温值是22.70℃·d;西兰花种子萌发时间t可利用公式t=22.70/（T-3.98）进行预测（T代表萌发温度）。利用模型方法定量分析西兰花种子萌发对温度的需求是可行的。

低温处理青花菜萌动种子对花芽分化的促进作用

低温(0～2℃)处理萌动种子可使青花菜的花芽分化提前。种子萌动时期经低温处理10d(T10)和20d(T20)的青；它菜植株花芽分化开始时的节位分别比对照(CK)低0．86个节位和1．03个节位。花芽分化临界期、第1级侧花茎原基分化期和第2～3级侧花茎原基分化期经低温处理10d和20d均分别比对照提前5d和6d。当进入花芽分化临界期时，叶片中GA3、可溶性蛋白质含量以及POD和转化酶活性均开始剧增，在第1级侧花茎原基分化期和第2～3级侧花茎原基分化期，叶片中POD、转化酶活性和GA、均有一高峰值。萌动种子经一段时间的低温处理后，首先诱导了GA3的合成，从而提高POD和转化酶等酶的活性，而这两种酶活性的升高对花芽分化有利。

西兰花籽中完形硫代葡萄糖苷的HPLC-MS-MS鉴定

[目的]建立一种简单、快速、经济的鉴定蔬菜中硫代葡萄糖苷的方法。[方法]用70%甲醇从西兰花籽中提取硫代葡萄糖苷,以甲酸作为离子调节剂,采用梯度洗脱的方法对提取物进行分离,并采用液相色谱-质谱-质谱联用技术对提取物成分进行鉴定。[结果]从西兰花籽中成功鉴定出8种硫代葡萄糖苷,其保留时间分别为5.9、7.7、8.8、9.5、13.6、16.0、19.3、28.6min,分子量分别为422、468、438、436、372、406、420、402;该鉴定方法所测样品不需经过脱硫等预处理,大大节省了试验时间,且样品需要量较少,试验效率较高。[结论]该研究建立了一种鉴定蔬菜中硫代葡萄糖苷的新方法。

8种杀菌剂对西兰花菌核病的防治效果及对制种产量的影响

本文开展了8种杀菌剂对制种西兰花菌核病的防治效果试验。结果表明8种杀菌剂均有防治效果,以40%菌核净可湿性粉剂的防治效果最好,防效为99.19%,比空白对照增产167.05%,千粒重最高,达到5.38g;其次为2亿活孢子/g木霉菌可湿性粉剂和50%腐霉利可湿性粉剂,防效分别为82.39%和81.69%,比空白对照分别增产147.44%和151.70%,千粒重分别为5.34和5.36g。其他杀菌剂的防治效果为51.06%~73.23%,比对照增产76.99%~107.39%,千粒重为4.73~5.28g,空白对照的千粒重为3.23g。综合分析认为,制种西兰花菌核病的防治可选用40%菌核净可湿性粉剂、2亿活孢子/g木霉菌可湿性粉剂和50%腐霉利可湿性粉剂等3种杀菌剂,并交替轮流使用。

西兰花籽中萝卜硫苷的HPLC分析

建立了西兰花籽中萝卜硫苷的高效液相色谱测定方法。色谱条件为：Ecosil C18（200 mm×4.6 mm,5μm）为色谱柱;0.1%甲酸水溶液-甲醇溶液（98：2,V/V）为流动相,等梯度洗脱;检测波长225 nm;流速为1.0 m L/min;柱温30℃。在该色谱条件下萝卜硫苷与其他物质得到了有效的分离,且萝卜硫苷在0.196~7.84μg范围内与峰面积有良好的线性关系,R=0.99997,萝卜硫苷回收率在97.91%~101.02%之间。该方法重复性好、精密度高、回收率较好,可作为西兰花籽提取物中萝卜硫苷的定量测定方法。

西兰花种子中萝卜硫素酶解浸提工艺研究

西兰花中含有丰富的抗癌物质,对大多数癌症都有较强的作用。本文研究了从西兰花种子中酶解浸提萝卜硫素的工艺,确定其最佳的酶解浸提参数。通过单因素梯度实验研究,采用自身芥子苷酶酶解以及密封浸提方式提取西兰花种子中萝卜硫素,主要对酶解时间,酶解料液比,酶解p H,超声浸提乙醇浓度,超声浸提时间,超声浸提次数几种浸提参数进行研究。结果表明:西兰花种子中萝卜硫素酶解浸提最佳条件为:酶解时间为8 h以上,酶解料液比为1∶2,酶解p H为7,超声浸提溶剂为80%乙醇,超声浸提时间为30 min,超声浸提的次数为2次。西兰花种子中萝卜硫素的酶解浸提工艺参数达到最佳时,其提取率可以大大的提高。

同源四倍体青花菜花粉活力及结籽性研究

以二、四倍体青花菜为材料,采用TTC法、离体和原位萌发法研究其花粉活力,并用正交设计法研究其结籽性。结果表明:1)TTC染色试验中四倍体与二倍体花粉可染率分别为48.6%和60.8%,差异显著。2)离体萌发试验中4X花粉在4 h时萌发率最大,达66.45%,4 h后萌发率稳定;2X在5h时萌发率最大,达69.4%,5 h后萌发率稳定;4X花粉中有大小异常的未萌发花粉,2X花粉中未发现,花粉粒大小均一。3)花粉原位萌发试验中四倍体花粉管较短并有较多异常生长现象,与二倍体杂交相比,四倍体花粉萌发不整齐,一致性较差;四倍体杂交、自交及二倍体自交等3组合花粉原位萌发结果近似,显著低于二倍体杂交组合。4)结籽性测定试验中二倍体杂交与自交组合结籽指数显著高于四倍体杂交与自交组合,经过选择,四倍体自交结籽指数2009年比2008年提高62.1%。

不同遗传背景的青花菜对异源胞质雄性不育材料结实性的影响

以萝卜胞质甘蓝雄性不育源为供体，用１９ 份不同来源的青花菜材料进行杂交、回交，观察这些后代材料的花器形态特征和结实性。结果发现不同来源的杂交及回交后代材料之间结实性有很大的差异，平均每角种子数４．１～２０．８ 粒；不育材料的结实能力与回交父本相近；同一父本来源不同世代的结实性差异不明显；此外，不同来源的不育材料花器形态结构也存在较大的不同。

响应面法优化超声波辅助提取西兰花籽油及其对运动大鼠红细胞的保护作用

采用响应面法优化超声波辅助提取西兰花籽油的工艺,并研究其对运动大鼠红细胞的影响。结果表明:最佳工艺条件为料液比1∶8.48(g/mL)、超声温度55.48℃、超声时间191.60 min、超声功率123.03 W,此时西兰花籽油的提取率为24.36%;大鼠试验表明,西兰花籽油可以增强SOD酶和GSH-Px酶的活性,降低MDA含量,减少对红细胞的损伤,从而对运动大鼠的红细胞起到保护作用。