Bmil基因在内皮细胞促进胶质瘤细胞干性表型中的作用

目的探讨B细胞特异的莫洛尼病毒插入位点1（Bmil）基因在内皮细胞促进胶质瘤细胞干性表型中的可能作用。方法以小鼠胶质瘤细胞系GL261和小鼠脑内皮细胞系b．END3为材料，采用Transwell双室细胞共培养、极限稀释法成球实验、实时定量PCR、Western印迹、流式细胞术、体内移植瘤实验以及siRNA基因干扰等方法，检测内皮细胞对胶质瘤细胞体外成球能力和体内成瘤能力、CD133阳性细胞比例、Bmil基因表达的影响以及抑制Bmil基因表达对上述现象的影响。结果与胶质瘤细胞单独培养的对照组相比：（1）胶质瘤细胞与内皮细胞共培养后其体外成球能力明显增强，形成干细胞球数目明显增多（40个细胞／孔的浓度时为62．5％±1．5％比25．0％±4．6％，P=0．000），体积明显增大；内皮细胞与胶质瘤细胞共同移植后所形成的移植瘤出现早、体积更大[（0．798±0．297）比（0．362±0．123）cm2，P=0．000]。（2）胶质瘤细胞与内皮细胞共培养后其CDl33阳性细胞群比例增大（8．48％±0．78％比4．81％±0．37％，P=0．000）。（3）胶质瘤细胞与内皮细胞共培养后Broil基因的mRNA（2．72±0．18比1．00±0．15，P=0．000）和蛋白表达明显增加。（4）利用siRNA干扰胶质瘤细胞Bmil基因表达后，内皮细胞促进胶质瘤细胞干性表型的上述作用明显减弱，敲低Bmil基因的GL261细胞共培养的CDl33阳性比例显著低于共培养的普通GL261细胞（0．34％±0．21％比1．70％±0．69％，P=0．025）。结论内皮细胞可能通过上调胶质瘤细胞Bmil基因表达促进胶质瘤细胞的干性表型。