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多价抗虫水稻外源Bt基因的多引物多重PCR检测方法 被引量:2
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作者 方欣怡 阳菁 +1 位作者 王井章 李阳生 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期175-183,共9页
旨在研究多价Bt抗虫转基因水稻的简便有效的检测方法。根据3个Bt转基因事件的插入位置,设计引物,通过多重引物PCR技术,利用9条引物得到6条大小存在明显差异的条带,同时检测3个Bt基因的转基因情况。水稻3个Bt抗虫基因(cry1Ab/Ac、cry2A、... 旨在研究多价Bt抗虫转基因水稻的简便有效的检测方法。根据3个Bt转基因事件的插入位置,设计引物,通过多重引物PCR技术,利用9条引物得到6条大小存在明显差异的条带,同时检测3个Bt基因的转基因情况。水稻3个Bt抗虫基因(cry1Ab/Ac、cry2A、cry1C)分别来源TT51-1、T2A-1和T1C-19,其中代表TT51-1事件插入的阳性、阴性条带大小分别为937 bp、718 bp;代表T2A-1事件插入的阳性、阴性条带大小分别为600 bp、434 bp;代表T1C-19事件插入的阳性、阴性条带大小分别为495 bp、792 bp;通过琼脂糖凝胶电泳能快速对转Bt基因插入事件水稻的纯合、杂合、阴性进行检测。该技术克服了多重引物之间可能存在的引物间的相互干扰的技术难度,对不同的PCR试剂有很好的兼容性,可配合水稻DNA的快速提取,迅速对大量选育后代进行分析。该方法的建立为利用多价Bt基因进行抗螟虫水稻分子育种提供了一个简便高效的基因检测技术,有助于提高Bt基因检测效率,加快抗螟虫水稻的育种进程。 展开更多
关键词 bt抗性基因 基因 多引物多重PCR 分子检测
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转Bt基因棉花生态风险评价的研究进展 被引量:14
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作者 魏伟 裴克全 +2 位作者 桑卫国 钱迎倩 马克平 《植物生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第z1期127-132,共6页
转Bt基因抗虫棉 (Gossypiumspp .)是目前国内释放面积最大的转基因作物 ,其生态风险问题从一开始就受到密切的关注。从生态风险评价的角度 ,分转基因棉花中Bt杀虫蛋白的时空表达及其对害虫的控制效果、Bt基因通过花粉传播而扩散的风险... 转Bt基因抗虫棉 (Gossypiumspp .)是目前国内释放面积最大的转基因作物 ,其生态风险问题从一开始就受到密切的关注。从生态风险评价的角度 ,分转基因棉花中Bt杀虫蛋白的时空表达及其对害虫的控制效果、Bt基因通过花粉传播而扩散的风险、害虫对Bt棉花抗性的进化风险、Bt棉花对非目标生物体影响的风险等几个方面 ,综述了Bt棉安全性评价的最新研究进展 ,为生物安全管理提供咨询意见 ,并提出了目前针对Bt棉亟待研究的内容。 展开更多
关键词 bt 生态风险 基因逃逸 进化 非目标效应
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Transgenic Bt cotton driven by the green tissue-specific promoter shows strong toxicity to lepidopteran pests and lower Bt toxin accumulation in seeds 被引量:5
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作者 Qing Wang Yi Zhu +3 位作者 Lin Sun Lebin Li Shuangxia Jin Xianlong Zhang 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2016年第2期172-182,共11页
A promoter of the PNZIP (Pharbitis nil leucine zipper) gene (1.459 kb) was cloned from Pharbitis nil and fused to the GUS(^-glucuronidase) and Bacillus thuringiensis endotoxin (Cry9C) genes. Several transgenic... A promoter of the PNZIP (Pharbitis nil leucine zipper) gene (1.459 kb) was cloned from Pharbitis nil and fused to the GUS(^-glucuronidase) and Bacillus thuringiensis endotoxin (Cry9C) genes. Several transgenic PNZIP::GUS and PNZIP::Cry9C cotton lines were developed by Agrobacterium-mediated transformation. Strong GUS staining was detected in the green tissues of the transgenic PNZIP::GUS cotton plants. In contrast, GUS staining in the reproductive structures such as petals, anther, and immature seeds of PNZIP::GUS cotton was very faint. Two transgenic PNZIP::Cry9C lines and one trans- genic cauliflower mosaic virus (CaMV) 35S::Cry9C line were selected for enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and insect bioassays. Expression of the Cry9C protein in the 35S::Cry9C line maintained a high level in most tissues ranging from 24.6 to 45.5 ~tg g-I fresh weight. In green tissues such as the leaves, boll rinds, and bracts of the PNZIP::Cry9C line, the Cry9C protein accumulated up to 50.2, 39.7, and 48.3 jag g-a fresh weight respectively. In contrast, seeds of the PNZIP::Cry9C line (PZ1.3) accumulated only 0.26 ~ag g-~ fresh weight of the Cry9C protein, which was 100 times lower than that recorded for the seeds of the CaMV 35S::Cry9C line. The insect bioassay showed that the transgenic PNZIP::Cry9C cotton plant exhibited strong resistance to both the cotton bollworm and the pink bollworm. The PNZIP promoter could effectively drive Bt toxin ex- pression in green tissues of cotton and lower accumulated levels of the Bt protein in seeds. These features should allay public concerns about the safety of transgenic foods. We propose the future utility of PNZIP as an economical, environmentally friendly promoter in cotton biotechnology. 展开更多
关键词 tissue-specific promoter GUS expression bt toxin transgenic cotton plants
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