花粉管通道法将Bt毒蛋白基因导入优良玉米自交系

以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系为材料 ,用花粉管通道法介导质粒pGBIL0 4(actin Bt 35S bar)DNA的转化 ,经对T0 代 1 4 0 3株植株Basta抗性筛选和PCR分子鉴定 ,共获得 5株PCR阳性植株 ,分别为授粉后 8,1 2 ,1 4 ,1 8h导入所得 ,总的平均转化率为 0 36 %。结果表明 :只要掌握好导入时机 。

农杆菌介导将Bt杀虫蛋白基因导入优良玉米自交系的研究

以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系 34 0、4112为材料 ,用带有质粒pGBIL0 4(Pactin -Bt-Tnos)的根癌农杆菌LBA44 0 4转化其幼胚及其初始愈伤组织 ,共培养 3天后 ,在含PPT的培养基上连续筛选培养 3代 ,然后分化获得再生植株。PCR检测证明目的基因已整合到再生植株的基因组中。实验结果表明幼胚预培养后形成的新鲜的初始愈伤组织是比较适宜的转化受体 ,结果还发现将共培养温度降到 2 2℃可以提高农杆菌介导的玉米遗传转化的筛选频率。

转基因抗虫油菜中Bt杀虫蛋白基因稳定遗传和高效表达及抗虫性研究

通过对转 Bt杀虫蛋白基因油菜植株的后代进行卡那霉素抗性分析和 PCR技术检测 ,结果表明 :Bt杀虫蛋白基因是以单拷贝、杂合地整合到转基因植株 (T0 1、T0 2、T0 3、T0 5、T0 6、T0 7、T0 8)的基因组中 ,并稳定地遗传。EL ISA检测表明 :在第 3～第 9叶期 Bt杀虫蛋白基因在转基因油菜植株中高效地表达 ,Bt杀虫蛋白的表达量为 170～ 2 6 0 ng/ 2 5mg鲜叶 ,占植物可溶性蛋白的 0 .0 6 7%～ 0 .10 5 % ,其抗虫效果高达 72 .0 %～ 94 .4 %。但从第 11叶期后 Bt杀虫蛋白表达量显著地降低 ,只有 7～ 5 0 ng/ 2 5 mg鲜叶 ,占植物可溶性蛋白的 0 .0 0 3%～ 0 .0 2 %。

转Bt杀虫蛋白基因的抗棉铃虫棉花新种质

采用花粉管通道途径,将合成的 Bt 杀虫蛋白基因导入棉花优良品种泗棉3号和中棉所12号,获得了转基因植株。组织化学分析表明,GUS 标记基因已在 R_1代植株中得到表达。据对 GUS 阳性转基因棉株的 PCR 分析结果,证明 Bt 杀虫蛋白基因出现在 R_1代中,并通过自交传递至 R_2代。经鉴定,获得了5株对棉铃虫幼虫有高度毒杀作用的 R_1代单株S545、S591、S636、S1001(泗棉3号+Bt/GUS)及 Zh1109(中棉所12号+Bt/GUS),棉铃虫幼虫致死率分别达到91.6%、93.8%、92.3%、85.7%、75.0%。并由 R_1代自交后形成 R_2代抗虫棉群体,表明获得了抗棉铃虫棉花新种质。

转基因烟草中Bt毒蛋白基因的表达行为

构建了高效植物表达载体pBinMoBc ,该载体携带超强表达复合启动子OM及Ω因子控制下的CryIA(c)基因。采用根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens (SmithetTownsend)Conn)介导的方法转化烟草 (NicotianatabacumL .) ,ELISA检测表明 ,大多数转基因烟草中CryIA(c)基因表达量均超过 0 .1% ,最高可达 0 .2 5 5 % ;转基因烟草中CryIA(c)基因表达水平与植株发育的时间和空间有关。抗虫检测结果表明 ,转基因烟草具有很强的抗棉铃虫 (He liothisarmigevaHubner)效果。上述结果表明 ,pBinMoBc是一个高效抗虫植物表达载体。

转Bt毒蛋白基因玉米的研究进展

此文首先回顾了国内外抗虫转基因玉米研究发展历程,归纳总结了转Bt毒蛋白基因玉米的常用转化方法和转基因玉米转化体的鉴定方法,对转Bt毒蛋白基因玉米后续实验的抗虫性分析鉴定及遗传稳定性评价与利用也进行了介绍。进而探讨了Bt毒蛋白基因在玉米遗传转化上善待解决的问题以及未来的发展方向。认为应加大力度对瓶颈技术进行深入研究,以期转Bt毒蛋白基因玉米能够获得更好的发展。

以基因枪法将Bt杀虫蛋白基因导入常规玉米自交系的研究

以生产上大面积使用的优良玉米自交系 792 2为材料 ,以来源于其幼胚的Ⅱ型胚性愈伤为受体 ,经预实验选择标准制弹用量一半的金粉 ,通过基因枪轰击法 ,将Bt杀虫蛋白基因转入其细胞中 ,并再生了大量的转基因植株。抗性植株再生频率为 78 40 % ,PCR分子检测证明目的基因已转入玉米中 ,转化频率为 3 0 9%。

欧美杨108号转蜘蛛杀虫肽与Bt毒蛋白嵌合基因的研究

以欧美杨108号为外植体材料,利用农杆菌介导法成功地将抗虫基因(蜘蛛杀虫肽+B t毒蛋白的嵌合基因)导入受体中。通过PCR检测,凝胶电泳结果显示8个卡那霉素抗性芽中,6个存在目的基因;经PCR-Southern印迹杂交检测,阳性率为50%,进一步表明目的基因成功整合到欧美杨108号基因组内。

Bt毒蛋白基因与植物抗虫基因工程

Ｂｔ毒蛋白基因与植物抗虫基因工程林良斌官春云（作物基因工程湖南省重点实验室，湖南农业大学长沙４１０１２８）在世界范围内，害虫造成的损失约占农作物总收获量的１３％，每年大约损失数千亿美元。目前，防治害虫仍然是主要地使用化学农药，但随着时间推移，由此而引...

Bt杀虫蛋白基因导入新疆棉花获得抗虫转基因植株

通过花粉管通道法将人工全序合成的Ｂｔ杀虫蛋白基因导入新陆早４号和Ｃ６５２４两品种中，收获注射过Ｂｔ杀虫蛋白基因的棉花种子２万余粒。经棉铃虫饲喂的抗虫性生物检测，得到高抗虫的１８株新陆早４号转化苗和３６株Ｃ６５２４转化苗；以Ｂｔ基因的一对引物进行ＰＣＲ分析，５４株抗棉铃虫的转化棉苗均扩增出部分Ｂｔ杀虫蛋白基因的目标带。未转化的对照棉苗则无此条带，证实Ｂｔ杀虫蛋白基因已整合到转化抗虫棉株的染色体上，首次获得了新疆转目的基因的高效抗虫棉。

农杆菌介导法将Bt杀虫蛋白基因导入玉米自交系的研究

利用β 葡萄糖苷酸酶(gus)基因的瞬时表达和稳定表达对农杆菌转化玉米愈伤组织的条件进行优化,通过用带有Bt抗虫基因和bar抗除草剂基因的根癌农杆菌LBA4404(ACT)转化玉米自交系7922、H99和P2的胚性愈伤组织,获得了抗性愈伤组织,并分化出植株。PCR检测初步证明Bt杀虫蛋白基因已整合到玉米再生植株中。

转Bt杀虫蛋白基因植物及其抗虫性研究进展

利用遗传工程技术将苏云金杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ Ｂｅｒｌｉｎｅｒ简称Ｂｔ）杀虫蛋白基因导入植物是近年来的研究热点，本文就Ｂｔ基因的转化及其在植物中的表达与抗虫效果、转Ｂｔ基因植物的产量及品质以及存在的风险与安全性等方面的研究进展作一综述．

Bt毒蛋白基因及其在水稻上的应用

苏云金芽孢杆菌δ—内毒素基因是目前在植物抗虫基因工程研究领域广泛应用的一类抗虫基因。本文介绍了其抗虫机理、综述了Ｂｔ毒蛋白基因在水稻上的应用现状，并指出了Ｂｔ基因工程出现的问题和解决的途径。

转Bt毒蛋白基因玉米及其抗虫性研究进展

本文从转Bt毒蛋白基因玉米的培育及商品化 ,Bt毒蛋白基因在转基因玉米中的遗传分离与整合、对玉米螟及其它害虫的杀虫效果、对天敌种群数量和玉米病害发生程度的影响、玉米螟对转Bt毒蛋白基因玉米产生抗性及解决措施。

Bt毒蛋白基因工程研究进展

近三十年来，以苏云金杆菌为基础的生物杀虫剂已在世界范围内商业化用于防治重要经济作物的害虫，有关Ｂｔ毒Ｐｒ基因的遗传，分子生物学和基因工程已取得显著进展。本文对Ｂｔ毒蛋白基因杀虫作用机理、基因分类，该基因的转基因植物研究状况作一简要综述。

玉米Bt转基因植株抗虫性量化分析

对 8 7- 1,80 85 ,综 3,N80 8等 4个回交一代Bt转基因材料进行田间抗虫性接卵鉴定的结果表明 ,成株期转基因材料群体茎秆的平均抗虫性较对照提高 45 %以上 ,差异达显著或极显著水平 ,叶片的抗虫性提高 30 %以上 ,不同遗传背景的转基因材料 ,抗性表现不一 .回交一代群体内 ,不同单株的抗虫性差异悬殊 。

用花粉管通道法将Bt杀虫基因导入玉米自交系的研究

本文利用花粉管通道技术 ,以生产上优良玉米自交系 792 2、3 4 0、4 4 4、4 112、吉 85 3、890 2、吉 83 5、吉 84 6、Mo17为材料 ,将Bt杀虫蛋白基因导入这 9个玉米自交系中 ,在D1代对转基因的 80 0株植株进行PPT( 3 0 0X)筛选 ,转基因植株成活率为 3 0 % ,对其中 60株进行PCR分子检测 ,得到 3株抗性转化植株 ,证明目的基因已转入玉米中 ,转化率为 0 3 75 %。

回交二代玉米转Bt基因材料抗虫性鉴定研究

采用室内喂虫和田间接卵两种方法对4个玉米回交二代转基因材料进行了抗虫性鉴定。结果表明 ,不同转基因材料的抗虫性不同 ;同一材料的不同单株间的抗虫性各异 ,有的表现高抗性 ,有的几乎没有抗性 ;正反双向回交的结果 ,其抗虫性存在显著差异 ,外源Bt基因通过雌配子的传递率显著高于通过雄配子的传递率。因此 。