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基于Bt毒素的杀虫蛋白理性设计与创新应用策略
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作者 徐重新 金嘉凤 +5 位作者 孙晓明 沈成 张霄 陈澄宇 刘贤金 刘媛 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期96-125,共30页
Bt毒素是源于苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)的具有特殊杀虫功能的大分子蛋白,其制剂和转基因作物已广泛用于害虫防治,产生了巨大的经济和社会生态效益。围绕Bt毒素挖掘和提升其应用价值是持续研究的热点,特别是随着Bt毒素结构... Bt毒素是源于苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)的具有特殊杀虫功能的大分子蛋白,其制剂和转基因作物已广泛用于害虫防治,产生了巨大的经济和社会生态效益。围绕Bt毒素挖掘和提升其应用价值是持续研究的热点,特别是随着Bt毒素结构功能和作用机制日趋明晰,为其功能修饰和创新应用创造了条件,相关研究蓬勃发展,成效显著。大量研究表明,采用定点突变、结构域替换或融合以及抗独特型抗体模拟等策略,是理性设计活性更高、稳定性更强、杀虫谱更广、非靶标生物安全性更高甚至是可用于害虫抗药性治理的有别于母体Bt毒素的突变体、结构杂合体乃至功能效应物抗体等新型杀虫蛋白的有效手段;此外,采用催化毒素活化、驱动毒素靶向受体结合、促进毒素表达以及同源或异源杀虫材料复配或共表达的协同促效等创新增效策略,也是助推Bt毒素应用价值的重要手段。本文总结了Bt毒素结构功能和作用机制,梳理了基于Bt毒素功能修饰的突变体、结构杂合体以及功能效应物抗体等新型杀虫蛋白理性设计和基于Bt毒素功能增效的创新应用策略等相关研究进展,并结合作者团队在模拟Bt毒素杀虫功能效应物抗体靶向设计研发方面的最新成果,探讨了基于Bt毒素的杀虫蛋白理性设计与创新应用策略未来发展动向及潜在可行捷径,为相关研究提供较为全面的最新有价值的文献资料和启发思路。 展开更多
关键词 BT毒素 苏云金芽孢杆菌 杀虫蛋白 定点突变 抗独特型抗体 蛋白融合表达 杀虫增效物
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土壤真菌群落和潜在功能对施加外源Bt毒素的响应 被引量:1
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作者 李玉洁 葛蕾 +11 位作者 胡聪 王璐瑶 郭官清 武国干 王翠 宋丽莉 孙宇 王金斌 曾海娟 徐勤青 全哲学 李鹏 《土壤学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期848-861,共14页
转Bt(Bacillus thuringiensis)基因植物和Bt重组菌生物农药释放的Bt毒素是一类具有生物毒性的潜在环境外源污染物,Bt毒素环境行为和生态效应是转基因植物和植物用转基因微生物安全风险评价的重要内容,但是外源Bt毒素对土壤真菌群落和潜... 转Bt(Bacillus thuringiensis)基因植物和Bt重组菌生物农药释放的Bt毒素是一类具有生物毒性的潜在环境外源污染物,Bt毒素环境行为和生态效应是转基因植物和植物用转基因微生物安全风险评价的重要内容,但是外源Bt毒素对土壤真菌群落和潜在功能的影响还不清楚。以施加不同浓度Bt毒素处理土壤和未施加Bt毒素对照土壤为研究对象,分析Bt毒素在土壤中的持留动态;同时采用真菌18S rRNA基因高通量测序技术,分析施加Bt毒素对土壤真菌群落和功能多样性的影响。结果表明,Bt毒素施加量和培养时间均可以显著影响土壤真菌群落组成,且随着Bt毒素施加量增加和土壤培养时间延长,土壤真菌群落差异性逐渐变大。施加Bt毒素提高了土壤真菌群落香农指数和关联网络的负相关性比例及模块数,因而没有对土壤真菌群落的多样性和稳定性产生负面影响。上述结果表明,评估Bt毒素的环境行为及微生态效应要关注Bt毒素施加量及其长期影响。随着Bt毒素施加量增加,Phymatotrichopsis、Homalogastra、Geosmithia和Apiotrichum等真菌以及参与蛋白质降解、碳素代谢和磷素代谢的功能基因编码酶相对丰度显著升高,推测上述真菌物种和潜在功能参与了Bt毒素在土壤中的降解和转化过程。研究结果为转Bt基因植物、Bt重组菌生物农药以及Bt毒素的生态安全风险评价提供了科学参考和理论依据。 展开更多
关键词 BT毒素 转Bt基因植物 Bt菌生物农药 群落多样性 生物安全风险评价
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苏云金芽孢杆菌Cry毒素共性结构短肽串联表达及功能分析
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作者 金嘉凤 沈成 +4 位作者 孟萌 陈蔚 徐重新 刘媛 刘贤金 《河南农业科学》 北大核心 2024年第1期96-104,共9页
苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)Cry毒素是一类具有抗虫功能的微生物蛋白。将前期基于Bt Cry毒素家族氨基酸序列及结构信息设计获得的呈现Cry毒素共性结构的3个短肽,拼接成为具有免疫原性的长链多肽(Bt Cry-GXJG-11),以期研... 苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)Cry毒素是一类具有抗虫功能的微生物蛋白。将前期基于Bt Cry毒素家族氨基酸序列及结构信息设计获得的呈现Cry毒素共性结构的3个短肽,拼接成为具有免疫原性的长链多肽(Bt Cry-GXJG-11),以期研发Bt Cry毒素杀虫功能的模拟物及制备Bt Cry毒素检测用广谱抗体的免疫原。分子建模预测结果显示,Bt Cry-GXJG-11与Bt Cry毒素靶标害虫棉铃虫(Helicoverpa armigera)钙黏蛋白受体(HaCad-TBR)存在互作效应,并初步明确了两者互作的关键氨基酸位点为244TYR。经原核表达,获得了质量浓度为0.5 mg/mL的Bt Cry-GXJG-11纯蛋白,测得其与HaCad-TBR的亲和力常数(KD)为2.151×10^(-7)mol/L。室内生测试验表明,Bt Cry-GXJG-11对棉铃虫具有一定杀虫活性,校正死亡率为27.5%;且以其免疫的小鼠血清能同时识别6种Bt Cry毒素(Cry1Ab、Cry1Ac、Cry1Ah、Cry1B、Cry1C、Cry1F)。 展开更多
关键词 Bt Cry毒素 共性结构 分子互作 杀虫活性 广谱抗体 棉铃虫
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Transfer of Bt-toxin protein gene into maize by high-velocity microprojectile bombardments and regeneration of transgenic plants 被引量:4
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作者 王国英 杜天兵 +7 位作者 张宏 谢友菊 戴景瑞 米景九 李太源 田颖川 乔利亚 莽克强 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 1995年第7期817-824,共8页
Bt-toxin protein gene was successfully transferred into maize by the microprojectile bombard-ments of cell suspension,embryogenic calli and immature embryos with a Chinese-made particle gun(JQ-700).Although the bombar... Bt-toxin protein gene was successfully transferred into maize by the microprojectile bombard-ments of cell suspension,embryogenic calli and immature embryos with a Chinese-made particle gun(JQ-700).Although the bombarded embryogenic calli and immature embryos produced less mean transformants per dishthan the cell suspensions,they were the suitable materials for maize transformation because their culture andregeneration have been achieved in most maize cultivars.The evaluation on the resistance of transgenic plantsto corn borer shows the significant difference between them,from highly resistant to susceptible. 展开更多
关键词 MAIZE transformation particle GUN bt-toxin protein gene insect resistance.
原文传递
具杀虫功能的蛋白类生物材料研究进展 被引量:1
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作者 徐重新 金嘉凤 +4 位作者 沈成 朱庆 张霄 刘媛 刘贤金 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期990-1003,共14页
害虫是威胁农作物生长发育及产品品质的主要风险因素,对其有效防治是保障农作物稳定生产的重要环节。传统依赖化学农药对害虫防治效果显著,但化学农药本身对非靶标生物以及生态环境所造成的持久性危害风险也同样突出。害虫绿色防治是农... 害虫是威胁农作物生长发育及产品品质的主要风险因素,对其有效防治是保障农作物稳定生产的重要环节。传统依赖化学农药对害虫防治效果显著,但化学农药本身对非靶标生物以及生态环境所造成的持久性危害风险也同样突出。害虫绿色防治是农业可持续发展的必然要求,其中具杀虫功能的蛋白类生物材料因兼具安全性高、可量产药剂及可在转基因抗虫作物应用的多重优势,是害虫绿色防治创新研发和应用的热点。如具备杀虫功能的Bt毒素、凝集素、动物毒素、防御素、蛋白酶抑制剂等蛋白类生物材料在害虫防治上已有深入研究和广泛应用;此外,近年来包括杀虫抗体在内的一些新型杀虫蛋白和相应创新技术也不断涌现,发展极为迅猛。基于此,本文在系统梳理当前成熟的具杀虫功能的蛋白类生物材料研发和应用现状的基础上,结合作者团队在杀虫抗体靶向设计上取得的原创性研究成果和经验,对蛋白类生物杀虫材料潜在的创新研发与应用进行展望,旨在为农业害虫绿色防治研究提供最新文献资料和技术参考。 展开更多
关键词 杀虫蛋白 BT毒素 凝集素 动物毒素 防御素 蛋白酶抑制剂
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表达苏云金杆菌δ-内毒素基因的转基因烟草的抗虫性 被引量:39
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作者 田颖川 秦晓峰 +8 位作者 许丙寅 李太元 方荣祥 莽克强 李文谷 符文俊 丽一平 张书芳 谢强江 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第1期1-10,共10页
苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)HD-1的δ-内毒素基因原始克隆TH12和TH48分别含有5.3kb和6.6kb型两类同源异族基因。经定点突变改造其5′端,酶切对3′端进行缺失后,在大肠杆菌中仍能表达出有杀虫活性的被修饰的毒蛋白。将上述加工... 苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)HD-1的δ-内毒素基因原始克隆TH12和TH48分别含有5.3kb和6.6kb型两类同源异族基因。经定点突变改造其5′端,酶切对3′端进行缺失后,在大肠杆菌中仍能表达出有杀虫活性的被修饰的毒蛋白。将上述加工过的基因插入到双元载体pBin437(pBin19的派生质粒)中,借助辅助Ti质粒pAL4404转入烟草,获得了抗卡那霉素的再生植株。经Southern印迹和狭槽印迹(Slot blot)杂交证明有1—5个拷贝的毒素基因整合至烟草染色体中。Northern印迹法分析结果表明这两类基因都在转基因植株中得到表达。有4株5.3kb类型,3株6.6kb类型的转基因植株对烟青虫有高抗性,与对照相比,这7株转基因烟草植株的杀虫率可达40—50%,并能显著抑制昆虫蜕皮和生长发育,表现明显的抗虫作用。结果表明这两类毒蛋白基因都可在植物中表达并赋于转基因植株以抗虫性。 展开更多
关键词 BT毒蛋白基因 转基因烟草 抗虫性
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转Bt基因棉Bt毒蛋白表达量的时空变化 被引量:59
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作者 陈松 吴敬音 +2 位作者 周宝良 黄骏麒 张荣铣 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2000年第4期189-193,共5页
采用抗体夹心 EL ISA技术 ,对转 Bt基因抗虫棉植株中 Bt毒蛋白含量进行了测定。结果表明 ,Bt基因在所有检测到的器官中均有表达 ,但是不同器官中的 Bt毒蛋白含量明显不同。在苗期全展功能叶中 Bt毒蛋白含量最高 ,根、茎和叶柄中 Bt毒蛋... 采用抗体夹心 EL ISA技术 ,对转 Bt基因抗虫棉植株中 Bt毒蛋白含量进行了测定。结果表明 ,Bt基因在所有检测到的器官中均有表达 ,但是不同器官中的 Bt毒蛋白含量明显不同。在苗期全展功能叶中 Bt毒蛋白含量最高 ,根、茎和叶柄中 Bt毒蛋白含量较低 ;在花铃期当日开花的子房中 Bt毒蛋白含量较高 ,雌雄蕊中 Bt毒蛋白较低 ,花瓣及苞叶 Bt毒蛋白含量最低。表明 Bt基因在不同器官中的表达强度存在差异。不同生育期的功能叶中 Bt毒蛋白含量差异显著 ,Bt毒蛋白含量在苗期叶片中最高 ,蕾期次之 ,花铃期最低。随着棉花生长发育进程的推进 ,Bt基因在叶片中的表达强度逐渐减弱。Bt基因在棉花体内的表达随着器官的不同、生育时期的不同而表现出时空动态变化。这可能是人们所观察到的转 Bt基因抗虫棉对棉铃虫抗性呈时空动态变化的根本原因。 展开更多
关键词 转BT基因棉 BT毒蛋白 时空表达 棉花
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转Bt基因作物Bt毒蛋白在土壤中的安全性研究 被引量:31
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作者 白耀宇 蒋明星 +1 位作者 程家安 姜永厚 《应用生态学报》 CAS CSCD 2003年第11期2062-2066,共5页
商业化的转Bt基因作物获准在田间大面积种植 ,使其释放的Bt毒蛋白对土壤生态系统的生态风险性问题成为人们关注的焦点 .本文综述了转Bt抗虫作物以植株残体、根系分泌物、花粉等形式释放的Bt毒蛋白通过田间耕作等方式进入土壤后的一些安... 商业化的转Bt基因作物获准在田间大面积种植 ,使其释放的Bt毒蛋白对土壤生态系统的生态风险性问题成为人们关注的焦点 .本文综述了转Bt抗虫作物以植株残体、根系分泌物、花粉等形式释放的Bt毒蛋白通过田间耕作等方式进入土壤后的一些安全性问题 ,包括土壤活性颗粒对Bt毒蛋白的吸附作用 ,Bt毒蛋白在土壤中的杀虫活性、存留 。 展开更多
关键词 BT毒蛋白 杀虫活性 存留 生物降解 土壤生物
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转Bt基因棉Bt毒蛋白的ELISA检测方法的研究(英文) 被引量:32
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作者 陈松 吴敬音 +2 位作者 程德荣 张荣铣 黄骏麒 《棉花学报》 CSCD 北大核心 1999年第5期259-267,共9页
利用纯化的Bt毒素蛋白(67kDa)作为标准蛋白和免疫抗原,建立了检测转基因抗虫棉植株内Bt毒蛋白含量的抗体夹心ELISA方法。检测极限1μg·L- 1,线性范围1- 15μg·L- 1,板内误差C.V.< 5%... 利用纯化的Bt毒素蛋白(67kDa)作为标准蛋白和免疫抗原,建立了检测转基因抗虫棉植株内Bt毒蛋白含量的抗体夹心ELISA方法。检测极限1μg·L- 1,线性范围1- 15μg·L- 1,板内误差C.V.< 5% ,板间误差C.V.< 5% ,平均样品回收率94.94% 。经稀释度试验等质量控制试验,表明所建立的ELISA方法是可靠的,可用于转基因棉花植株中Bt毒素蛋白含量的测定。 展开更多
关键词 BT毒蛋白 ELISA 检测 转基因棉
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抗虫转基因欧洲黑杨的Western印迹法分析 被引量:21
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作者 陈颖 李强 +2 位作者 李玲 韩一凡 田颖川 《林业科学》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期274-276,共3页
抗虫转基因欧洲黑杨的Western印迹法分析陈颖,李强,李玲,韩一凡,田颖川(中国林业科学研究院林业研究所北京100091)(中国科学院微生物研究所北京100080)关键词Bt.基因,转基因欧洲黑杨,Western印... 抗虫转基因欧洲黑杨的Western印迹法分析陈颖,李强,李玲,韩一凡,田颖川(中国林业科学研究院林业研究所北京100091)(中国科学院微生物研究所北京100080)关键词Bt.基因,转基因欧洲黑杨,Western印迹法WESTERNBLOTANAL... 展开更多
关键词 转基因 黑杨 Western 印迹法 抗虫性
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Bt毒素诱导下小菜蛾实时定量PCR内参基因的筛选 被引量:22
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作者 符伟 谢文 +3 位作者 张卓 吴青君 王少丽 张友军 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1406-1412,共7页
【目的】筛选出Bt毒素诱导后的小菜蛾Plutella xylostella(L.)的实时定量PCR最适内参基因。【方法】选取核糖体18S rRNA(18S rRNA)、肌动蛋白(ACTB)、延伸因子(EF1)、3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)、核糖体蛋白L32(RPL32)、核糖体蛋白S13(R... 【目的】筛选出Bt毒素诱导后的小菜蛾Plutella xylostella(L.)的实时定量PCR最适内参基因。【方法】选取核糖体18S rRNA(18S rRNA)、肌动蛋白(ACTB)、延伸因子(EF1)、3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)、核糖体蛋白L32(RPL32)、核糖体蛋白S13(RPS13)、核糖体蛋白S20(RPS20)和β-微管蛋白(TUB)基因作为候选内参基因,以geNorm、Normfinder和BestKeeper软件分析这8个基因在Bt毒素诱导后的小菜蛾不同品系中肠组织中的表达稳定性。并应用筛选出来的内参基因分析小菜蛾氨肽酶2(aminopeptidase N2,APN2)基因的表达水平。【结果】geNorm软件以RPS13和EF1为最稳定内参基因,NormFinder和BestKeeper软件均以RPS13和RPL32为最稳定基因。使用3种不同内参基因分析Bt毒素诱导后的小菜蛾Bt抗性和敏感品系中ANP2表达水平时,新的内参基因EF1和传统内参基因RPL32表现了良好的稳定性,二者作为标准化因子,ANP2表达量结果基本一致,而使用18S rRNA作为内参基因,却导致部分表达量分析结果有所误差。【结论】筛选出PRS13,RPL32和EF1可以作为小菜蛾某些试验条件下的内参基因,对小菜蛾基因表达研究奠定了一定基础,也对其他昆虫内参基因的筛选具有参考价值。 展开更多
关键词 小菜蛾 实时定量PCR 内参基因 抗药性 BT毒素
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转Bt基因棉不同品种杀虫蛋白季节性表达及其对棉铃虫的控制作用 被引量:31
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作者 沈平 林克剑 +2 位作者 张永军 吴孔明 郭予元 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2010年第5期393-397,共5页
实验室条件下研究了不同品种转Bt基因棉花对棉铃虫抗性的差异、不同生育期棉花抗虫性的变化及Bt毒蛋白季节性表达。结果显示,不同品种转Bt基因棉在不同发育阶段,其棉叶均有阻止棉铃虫取食的作用,表现了明显的抗性,但其抗性强弱存在明显... 实验室条件下研究了不同品种转Bt基因棉花对棉铃虫抗性的差异、不同生育期棉花抗虫性的变化及Bt毒蛋白季节性表达。结果显示,不同品种转Bt基因棉在不同发育阶段,其棉叶均有阻止棉铃虫取食的作用,表现了明显的抗性,但其抗性强弱存在明显差异。DP 99B抗性表现最好,Hanza154抗性相对较差,6 d平均校正死亡率分别为89.23%和75.91%。转基因棉不同品种对棉铃虫的抗性在时间上呈现动态变化,以植株发育阶段划分,表现为蕾期>盛花期>花铃期>铃期。ELISA测定结果表明,Bt毒蛋白在转基因棉不同器官中的含量差异显著,叶片中Bt毒蛋白的表达量显著大于其它组织器官。随着棉花生长发育的推进,叶片(鲜重)中Bt毒蛋白含量则明显降低,表现为七叶期>三叶期>蕾期>铃期>花铃期。 展开更多
关键词 转基因棉 BT毒蛋白 抗虫性 ELISA
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欧洲黑杨转Bt毒蛋白基因植株大田抗虫性测定 被引量:25
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作者 胡建军 刘庆一 +3 位作者 王克胜 张宝恩 田颖川 韩一凡 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 1999年第2期202-205,共4页
近几年,基因工程发展很快,通过基因工程已获得了各种各样的转基因植物,如抗虫转基因农作物的棉花(GosypiumhirsutumL.)、水稻(OryzasativaL.)、马铃薯(SolanumtuberosumL.)... 近几年,基因工程发展很快,通过基因工程已获得了各种各样的转基因植物,如抗虫转基因农作物的棉花(GosypiumhirsutumL.)、水稻(OryzasativaL.)、马铃薯(SolanumtuberosumL.)、玉米(ZeamaysL.)、小麦... 展开更多
关键词 欧洲黑杨 Bt毒 蛋白基因 抗虫 育种
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转Bt基因作物Bt毒素在土壤中的环境去向及其生态效应 被引量:28
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作者 王建武 骆世明 +1 位作者 冯远娇 Cindy Nakatsu 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期797-804,共8页
综述了转 Bt基因作物的 Bt毒素在土壤中的环境去向及其生态效应的研究进展。重点阐述了 :1 Bt毒素与土壤表面活性颗粒结合及其与土壤理化性质的关系 ;2 Bt毒素微生物利用与降解 ;3Bt毒素的杀虫活性 ;4后茬作物和土壤动物对 Bt毒素的吸... 综述了转 Bt基因作物的 Bt毒素在土壤中的环境去向及其生态效应的研究进展。重点阐述了 :1 Bt毒素与土壤表面活性颗粒结合及其与土壤理化性质的关系 ;2 Bt毒素微生物利用与降解 ;3Bt毒素的杀虫活性 ;4后茬作物和土壤动物对 Bt毒素的吸收与利用 ;5 Bt毒素的垂直运移 ;6 Bt毒素对土壤生物和生态过程的影响。转 Bt基因作物的 Bt毒素对土壤生态系统的影响急需在生态系统水平进行深入细致的长期定位研究。 展开更多
关键词 转BT基因作物 BT毒素 土壤 环境去向 生态效应 土壤生物 土壤生态系统
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转Bt基因作物毒素土壤存活特性及与土壤性质的关系研究进展 被引量:15
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作者 孙彩霞 陈利军 武志杰 《应用生态学报》 CAS CSCD 2002年第11期1478-1482,共5页
随着转Bt基因作物的推广和应用 ,其对生态环境及其它方面可能产生的影响越来越受到重视 .加之Bt毒素蛋白检测技术的发展 ,国外学者们围绕纯化毒素蛋白与土壤的相互关系等方面开展了大量研究 ,并取得了一些结果 .本文介绍了转Bt基因作物... 随着转Bt基因作物的推广和应用 ,其对生态环境及其它方面可能产生的影响越来越受到重视 .加之Bt毒素蛋白检测技术的发展 ,国外学者们围绕纯化毒素蛋白与土壤的相互关系等方面开展了大量研究 ,并取得了一些结果 .本文介绍了转Bt基因作物产生的毒素蛋白的杀虫特性 ,杀虫蛋白的测定方法 ,转Bt基因作物向大田释放存在的潜在风险及土壤矿物质、有机质、有机矿质复合体对纯化Bt毒素存活的影响 ,毒素在根际土壤中的行为等方面的研究现状 .最后 ,提出了今后有关研究中应注意的几个问题 . 展开更多
关键词 转BT基因作物 土壤存活特性 土壤性质 关系 研究进展 转基因作物 Bt毒素蛋白
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Bt毒蛋白Cry1Ac在人造土壤中对赤子爱胜蚓毒理及生化影响 被引量:18
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作者 肖能文 戈峰 刘向辉 《应用生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1523-1526,共4页
Bt毒素能通过转基因作物的花粉、根和残株进入土壤.为评估转基因作物对土壤动物的影响,本文模拟转基因棉的Bt毒素进入土壤的发生程度,用含不同浓度Bt毒蛋白Cry1Ac的人造土壤处理蚯蚓,测定蚯蚓存活率、重量变化及体内总蛋白含量和过氧化... Bt毒素能通过转基因作物的花粉、根和残株进入土壤.为评估转基因作物对土壤动物的影响,本文模拟转基因棉的Bt毒素进入土壤的发生程度,用含不同浓度Bt毒蛋白Cry1Ac的人造土壤处理蚯蚓,测定蚯蚓存活率、重量变化及体内总蛋白含量和过氧化氢酶(CAT)、乙酰胆碱酯酶(AchE)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)和纤维素酶活性.结果表明,Bt毒蛋白对蚯蚓的生物量和生理水平影响均不明显,不存在急毒性和亚致死毒性影响,对蚯蚓比较安全. 展开更多
关键词 赤子爱胜蚓 BT毒蛋白 总蛋白含量 过氧化氢酶 乙酰胆碱酯酶 纤维素酶 谷胱甘肽-S-转移酶
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Bt毒蛋白在转Bt基因棉中的表达及其在害虫天敌间的转移 被引量:25
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作者 张桂芬 万方浩 +1 位作者 郭建英 侯茂林 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期334-341,共8页
以常规棉泗棉 3号作为对照 ,采用酶联免疫生测法 (ELISA)和室内生物测定法 ,研究了转Bt基因棉新棉 33B和GK 12不同组织器官中Cry1Ac或Cry1Ab毒蛋白的表达及其向靶标害虫 (棉铃虫 )、非靶标害虫 (棉蚜 )以及天敌 (龟纹瓢虫 )的传递和影... 以常规棉泗棉 3号作为对照 ,采用酶联免疫生测法 (ELISA)和室内生物测定法 ,研究了转Bt基因棉新棉 33B和GK 12不同组织器官中Cry1Ac或Cry1Ab毒蛋白的表达及其向靶标害虫 (棉铃虫 )、非靶标害虫 (棉蚜 )以及天敌 (龟纹瓢虫 )的传递和影响。研究结果表明 ,新棉 33B各组织器官中Bt毒蛋白的表达量较高 ,为 79 7~ 1390 0ng g鲜重 ,GK 12较低为 16 5~ 2 6 4 0ng g鲜重。在花盛期 ,新棉 33B各组织器官中Bt毒蛋白的表达量依次为 :柱头、花药 >子房、花瓣 >群尖 ;而 5~ 7叶期的初展嫩叶、现蕾初期的幼蕾及花铃期的幼铃表达量相当 ,而且与花盛期群尖的表达量没有明显区别。同样处于花盛期的GK 12 ,其各组织器官中Bt毒蛋白的表达量依次为 :花药 >柱头 >花瓣 >群尖 >子房 ;而 5~ 7叶期的初展嫩叶、现蕾初期的幼蕾及花铃期的幼铃表达量相当 ,而且与花盛期群尖的表达量没有明显差异。常规对照棉的幼铃、花药、柱头以及子房中痕量Bt毒蛋白的存在可能与传粉昆虫等的活动有关。在转Bt基因棉田采集的棉蚜和棉铃虫老龄幼虫 ,其体内均可检测到Bt毒蛋白 ;在新棉33B棉田采集的龟纹瓢虫幼虫和成虫体内也可检测出Bt毒素。当以Bt棉田的棉蚜饲喂龟纹瓢虫时 ,龟纹瓢虫的生长发育、存活以及繁殖等基本没有受到影响。 展开更多
关键词 转BT基因棉 BT毒蛋白 棉铃虫 棉蚜 龟纹瓢虫 毒素转移
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害虫对转基因Bt作物的抗性及其管理对策 被引量:24
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作者 魏伟 钱迎倩 马克平 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 1999年第2期215-218,共4页
至今为止,已经有26种植物成功地转入了Bt毒蛋白基因,它们将在防治害虫中发挥重要作用.Bt作物释放的潜在风险是害虫的抗性进化.害虫对Bt毒蛋白产生抗性的机制包括行为躲避、生理生化机制及遗传机制.抗性等位基因的初始频率... 至今为止,已经有26种植物成功地转入了Bt毒蛋白基因,它们将在防治害虫中发挥重要作用.Bt作物释放的潜在风险是害虫的抗性进化.害虫对Bt毒蛋白产生抗性的机制包括行为躲避、生理生化机制及遗传机制.抗性等位基因的初始频率和抗性的遗传稳定性等特性影响着抗性管理对策的实施和效用.抗性管理对策包括Bt作物的轮作、转入多个杀虫基因、Bt毒蛋白高剂量表达、低剂量表达和目标特异表达以及避难所策略等,它们是互为补充的.其中,“高剂量/避难所”策略受到广泛的重视.但是,这些策略来自理论数学模型和实验室数据。 展开更多
关键词 Bt作物 Bt抗性 抗性机制 转基因
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南方主要土壤中铁铝氧化物对土壤吸附Bt蛋白的影响 被引量:7
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作者 付庆灵 邓雅丽 +3 位作者 胡红青 蔚霞 韩晓芳 李妍 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第23期4836-4843,共8页
【目的】研究Bt蛋白与南方主要土壤(砖红壤、赤红壤、红壤和黄壤)的相互作用,探讨不同形态铁铝氧化物对吸附的影响。【方法】采用平衡吸附法研究Bt蛋白在不同土壤上的吸附特征,并用Langmuir方程进行拟合。【结果】Bt蛋白在去游离态铁铝... 【目的】研究Bt蛋白与南方主要土壤(砖红壤、赤红壤、红壤和黄壤)的相互作用,探讨不同形态铁铝氧化物对吸附的影响。【方法】采用平衡吸附法研究Bt蛋白在不同土壤上的吸附特征,并用Langmuir方程进行拟合。【结果】Bt蛋白在去游离态铁铝砖红壤和红壤表面吸附曲线为H型,而在其它供试土壤表面的吸附曲线均为L型,可用Langmuir方程拟合;去除络合态铁铝土壤对Bt蛋白吸附量增加,而去除其它形态铁铝氧化物土壤上的吸附量均有不同程度的降低,且游离态铁铝对Bt蛋白吸附的影响最大;Bt蛋白在去除络合态铁铝土壤表面吸附亲和力最大,在去除游离态铁铝的供试土壤表面亲和力最小。【结论】除络合态铁铝外,游离态、非晶形态等铁铝氧化物能促进土壤对Bt蛋白的吸附,这将为Bt蛋白在土壤中环境风险评价提供参考。 展开更多
关键词 BT蛋白 吸附 土壤 铁铝氧化物
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Bt玉米杀虫蛋白含量的时空表达及对亚洲玉米螟的杀虫效果 被引量:35
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作者 王冬妍 王振营 +3 位作者 何康来 丛斌 白树雄 文丽萍 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期1155-1159,共5页
利用ELISA方法对2个转Cry1Ab基因抗虫玉米品种MON810和Bt11在不同生育期、不同组织器官中杀虫蛋白的表达量进行了分析,利用室内生测方法研究了不同组织器官对亚洲玉米螟初孵幼虫杀虫效果,并分析了杀虫蛋白表达量与杀虫效果的相关性。结... 利用ELISA方法对2个转Cry1Ab基因抗虫玉米品种MON810和Bt11在不同生育期、不同组织器官中杀虫蛋白的表达量进行了分析,利用室内生测方法研究了不同组织器官对亚洲玉米螟初孵幼虫杀虫效果,并分析了杀虫蛋白表达量与杀虫效果的相关性。结果表明,Cry1Ab杀虫蛋白在Bt玉米MON810和Bt11的不同生育期和组织中的表达量呈明显的时空动态变化,以营养生长阶段的心叶组织表达最高,分别为1880.6和1473.1ng·g-1,生殖生长阶段的花粉含量最低,分别为52.3和73.3ng·g-1。随着叶片的生长,叶片中的杀虫蛋白含量明显下降,生殖生长阶段的各组织器官的杀虫蛋白的含量因组织而异。不同Bt玉米品种间同一组织器官的杀虫蛋白表达量也存在一定差异。室内生测结果表明,2个Bt玉米各组织对亚洲玉米螟初孵幼虫具有很好的杀虫效果,心叶、苞叶、雌穗尖和籽粒中Bt杀虫蛋白表达量及取食的幼虫死亡率呈显著正相关,但Bt11花丝以及MON810和Bt11的雄穗中Bt杀虫蛋白的含量与杀虫效果不一致,说明Bt玉米杀虫活性的表达还会受到其它一些因素的影响。 展开更多
关键词 BT玉米 杀虫蛋白 含量 时空表达 亚洲玉米螟 杀虫效果
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