budR表达水平对克雷伯氏菌甘油代谢的影响

通过过量表达和反义RNA抑制改变budR表达水平,考察budR表达水平对克雷伯氏菌甘油代谢的影响。过表达budR使得Bud B和Bud C的酶活提高了48.7%和69.7%,1,3-丙二醇产量降低了12.6%,2,3-丁二醇含量增加了73.3%,同时乙酸含量显著降低。反义RNA抑制budR表达后,Bud B和Bud C酶活分别降低了56%和78%,重组菌的生物量、2,3-丁二醇(BDO)、乙酸、乳酸等均表现为略有降低,1,3-丙二醇含量达到23.4g/L,提高约10%。上述结果进一步丰富了budR基因在调控bud操纵子的表达水平、2,3-丁二醇合成及克雷伯氏菌甘油代谢中的作用,为后续代谢改造克雷伯氏菌合成1,3-丙二醇提供了新的思路。

人实体瘤BUdR离体标记BUdR/DNA双参数FCM测定Tpot的初步研究

目的 :探索人实体瘤标本BUdR离体标记BUdR/DNA双参数FCM测定Tpot的方法。方法 :选用头颈肿瘤活检标本及直肠癌手术标本行离体溴脱氧尿嘧啶核苷 (bromodeoxyuridine ,BUdR)标记双参数流式细胞术(flowcytometry ,FCM )测定肿瘤潜在倍增时间 (Potentialdoublingtime,Tpot)。 结果 :头颈肿瘤活检标本标记结果为阴性 ,直肠癌手术标本离体标记结果与文献报道的在体标记的结果有较大的差异。结论 :Tpot测定应尽可能采用在体BUdR标记 。

BudR和CHM对花椰菜幼苗下胚轴根芽分化的抑制效应

研究ＤＮＡ生物合成抑制剂５－溴－２－脱氧尿嘧啶（ＢｕｄＲ）和蛋白质生物合成抑制剂放线菌酮（ＣＨＭ）对花椰菜幼苗下胚轴切段离体培养中器官分化的抑制作用，结果表明：１）ＢｕｄＲ和ＣＨＭ对根的分化有一定的抑制效应，达到一定浓度时，能造成根分化的停止．ＣＨＭ的抑制作用较明显而强烈，表明根的分化对蛋白质的依赖性高于核酸；２）ＢｕｄＲ和ＣＨＭ对芽的分化均有抑制作用，达到一定浓度时，能造成芽分化的停止．ＢｕｄＲ的抑制效应较ＣＨＭ的明显，这表明芽分化过程对核酸合成的依赖性高于蛋白质．

浣熊痘病毒TK基因对5-BUdR药物不敏感性的研究

本文在Rat-2(TK^-)细胞上,对浣熊痘病毒TK基因作为病毒筛选标记的作用进行了研究。发现浣熊痘病毒虽然具有TK基因的序列和功能,但对5-溴脱氧尿嘧啶(5-BUdR)药物的选择压力并不敏感。即使采用HAT培养基挑选的单斑病毒对5-BUdR也具有抵抗力。

一种显示姊妹染色单体互换的简易技术BUdR—Giemsa技术

姊妹染色单体互换最早是Taylor(1957年)在植物细胞中使用~3H-放射自显影技术时发现的。1973年Latt等发现,在含有5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromodeoxyuridine,以下简称BUdR)的培养基中,生长两个周期的细胞,其中期染色体用Hoechst 33258萤光染料染色。

BUdR标记BUdR/DNA双参数流式细胞仪测定肿瘤潜在倍增时间的方法学研究

目的探讨溴脱氧尿嘧啶核苷（ＢＵｄＲ）标记ＢＵｄＲ／ＤＮＡ双参数流式细胞仪（ＦＣＭ）测定肿瘤潜在倍增时间Ｔｐｏｔ的方法，比较ＢＵｄＲ在体（ｉｎｖｉｖｏ）、离体（ｉｎｖｉｔｒｏ）标记结果的差异。材料与方法实验采用人鼻咽癌裸小鼠移植瘤模型分别进行ＢＵｄＲ在体、离体标记；离体标记时分别将样本制成组织块和细胞悬液在０．５ｍＭ、０．１ｍＭＢＵｄＲ的含２０％胎牛血清ＲＰＭＩ１６４０培养基、５％ＣＯ２、３７℃、ＣＯ２孵箱中开放培养不同时间后收集样本。在体标记：腹腔注射ＢＵｄＲ０．１ｍｇ／ｇ体重，６小时后处死小鼠取瘤剪碎，在７０％的冷乙醇固定冰箱保存；全部样本用ＦＩＴＣＰＩ染色后行ＦＣＭ测定。结果（１）本实验室的ＢＵｄＲ离体培养条件下，组织块标记较理想。（２）用ＢＵｄＲ在体标记法测定不同大小的肿瘤（直径０．３～１．２ｃｍ），结果表明：直径＜０．５ｃｍ的肿瘤的标记效果比较理想。（３）相同体积的肿瘤在体（ｎ＝９）、离体（ｎ＝７）标记两种不同标记方法的结果显示，相同体积的肿瘤用ＢＵｄＲ离体标记法时ＬＩ比在体标记低５３％，其它各项细胞动力学参数两者均有明显差异，但离体标记法的组内变异很小。结论本实验室成功建立了在体ＢＵｄＲ标记ＢＵ?

植物细胞突变体及其应用前景

一、前言 突变是自然界中生物进化的基础,然而,自发突变的频率极低,而且不易选择有益的变异。1927年,Muller首先用X射线处理果蝇,发现X射线有提高突变频率的作用。此后,科学工作者开始探索采用各种物理化学因素来作为环境诱变剂以提高生物的突变率,以期从中选出具有稳定遗传性状的突变体后代。 70年代以前,大多以整体植物为材料,通过诱变。筛选突变体,直接或间接地用于作物育种或生物遗传规律的研究。由于科学技术的发展,人们建立并逐步完善了植物组织和细胞培养技术。应用细胞培养技术。

脑胶质瘤SHG-44细胞动力学特征的实验研究

目的 探讨脑胶质瘤潜在倍增时间 (Tpot)实验条件。方法 采用荷脑瘤动物模型 ,溴脱氧尿嘧啶核苷(BudR)掺入法测定Tpot。结果 所建立的Wistar脑胶质瘤大鼠模型实用、可靠。在体潜在倍增时间、有效倍增时间 (Teff)分别为 8.15天和 18.4 6天。BudR掺入率、细胞标记指数 (LI)均在BudR掺入后 8h达最高 ,>6Gy辐射其潜在倍增时间明显缩短。结论 在体、离体BudR掺入标记率存在明显差异。辐射吸收剂量 >12Gy,其实际倍增时间、潜在倍增时间、有效倍增时间降至最低点。提示脑胶质瘤放疗过程中存在细胞加速再增殖 。