Screening for Anti-tumor Activity of Fractions from Buddleja officinalis Maxim

[Objectives]The anti-tumor activity of fractions from Buddleja officinalis Maxim.by petroleum ether,ethyl acetate,n-butanol and water solvent was studied.[Methods]The ethanol extract from B.officinalis Maxim.was extracted and then concentrated with petroleum ether,ethyl acetate,n-butanol and water,respectively,and the extracts were obtained.The inhibitory effects of the four different fractions on the growth of three tumor cell lines in vitro were detected by CCK-8 method,and the median inhibitory concentration(IC 50 value)was calculated.[Results]The four fractions inhibited the growth of the three tumor cell lines in vitro,among which the n-butanol fraction had the best anti-tumor activity.The IC 50 values of the n-butanol fraction on human gastric cancer(SGC-7901),human breast cancer(MCF-7)and human liver cancer(BEL-7404)cell lines were 0.08,1.58 and 0.12 mg/mL,respectively.[Conclusions]Petroleum ether,ethyl acetate,n-butanol and water fractions from the ethanol extract of B.officinalis Maxim.had certain anti-tumor effects,and the n-butanol fraction had the best anti-tumor activity.

沙漠腹地醉鱼草(Buddleja alternifolia)栽培苗对水盐胁迫的响应

为了研究盐、旱及其交互胁迫下植物生长和生理特性的变化,了解沙漠腹地极端生境下互叶醉鱼草(Buddleja alternifolia)幼苗的适应性,确定合理的灌溉方式,为沙漠腹地醉鱼草的引种提供理论依据。通过大田控制实验,设计了3个水分梯度和4个盐分梯度随机结合实验,定位测量生长量和生化指标,最后基于隶属函数法综合评价醉鱼草的抗旱耐盐性。结果表明:(1)在干旱胁迫或低浓度盐胁迫下,醉鱼草的地径、新枝和冠幅生长量均呈上升趋势,而在高盐浓度胁迫下均降低;水盐交互胁迫下,不同的盐浓度与干旱交互胁迫效果不同,低盐浓度与干旱交互胁迫时(W1S1、W2S1),植物生长量均上升,高盐浓度与干旱交互胁迫时(W1S3、W2S3),植物生长量均降低。(2)无论是盐胁迫、干旱胁迫还是盐、旱交互胁迫,醉鱼草游离脯氨酸(Pro)含量随着胁迫程度的增加均呈显著上升的趋势。(3)醉鱼草的超氧化物歧化酶(SOD)活性和过氧化物酶(POD)活性变化相对复杂,除了在干旱胁迫时,SOD活性和POD活性都显著下降外,在盐胁迫和交互胁迫时它们各自的变化并不一致。醉鱼草在盐胁迫、交叉胁迫和干旱胁迫时,渗透调节物质和酶活性各自对应的发生了变化,没有明显的同步性,存在相互协调的可能,同时植物细胞的敏感性远远强于表型生长的变化,高盐浓度的伤害并没有表现在植物外部形态上,但酶活性及渗透调节物质却有显著变化。通过隶属函数分析显示,醉鱼草最佳的生长水盐条件是盐浓度为8 g·L^-1、灌水量为25 L·次^-1,对水盐胁迫的抗旱耐盐性为:干旱胁迫>交互胁迫>盐胁迫。

不同产地密蒙花指纹图谱研究

目的:建立UPLC指纹图谱结合化学模式识别以及化学成分分析的密蒙花药材质量评价方法。方法:建立密蒙花药材UPLC指纹图谱,采用化学计量法分析不同产地的密蒙花药材质量差异,采用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)对指纹峰进行鉴别。结果:20批密蒙花药材指纹图谱相似度在0.9以上,确定了11个共有峰并得到鉴定,各批样品之间的相似度在0.9以上。聚类分析将20批密蒙花分为3类;主成分分析表明主成分1、2、3是影响密蒙花药材质量的主要因子,OPLS-DA分析筛选出6个差异性标志物。结论:该研究为深入密蒙花药材质量控制研究提供科学依据。

不同基质对互叶醉鱼草扦插繁殖的影响

为了寻找出适合西藏自治区的互叶醉鱼草扦插繁殖基质,采用沙子、腐殖质、沙壤土、珍珠岩、蛭石分别组合成不同扦插基质配比处理,实施了互叶醉鱼草扦插试验。结果表明,不同基质配比组合对互叶醉鱼草插穗的生根率﹑生根数﹑生根长度和新生枝条长度都有促进作用;其中珍珠岩∶蛭石=1∶1组合的效果最好,成活率达到了76.8%,单穗生根数有4.1条,生根长度为5.43 cm,新生枝条长度为8.36 cm;分别比对照沙壤土提高了91.04%、115.79%、130.08%、134.83%。其次是沙壤土∶腐殖质∶沙子=1∶1∶1组合,成活率达到了73.2%,单穗生根数有3.7条,生根长度为5.17 cm,新生枝条长度为8.35 cm;分别比对照提高了82.09%、94.74%、119.07%、134.55%。从经济角度考虑,在西藏自治区采用沙壤土∶腐殖质∶沙子=1∶1∶1的基质配比组合效果最佳,既实用又经济,并且方法简单、技术易掌握、育苗成本低,便于在当地大面积推广。

高效液相色谱法测定密蒙花中蒙花苷的含量

目的 :建立高效液相色谱法测定密蒙花中蒙花苷的含量。方法 :采用RP -C1 8色谱柱 ,甲醇 -水 -醋酸 (4 5∶5 4 5∶0 5 )为流动相 ,流速 0 8mL·min- 1 ,32 6nm为检测波长 ,室温下对密蒙花中的蒙花苷进行含量测定。结果 :蒙花苷在 0 4～ 2 9μg范围内 ,面积与其浓度线性关系良好 (r=0 9991) ;样品平均回收率为 97 0 2 % ,RSD为 1 5 % (n =4)。结论 :该法简单、快速、结果准确可靠。

密蒙花化学成分及其活性研究

目的 为了进一步揭示中药密蒙花药理活性物质基础,研究发现活性成分,对中药密蒙花的化学成分及其活性进行系统的研究。方法 经过正相、反相硅胶柱,Sephadex LH-20,制备液相等色谱方法反复分离。利用各种波谱数据分析鉴定了11个化合物的结构,并有针对性地对分离得到的化合物进行了醛糖还原酶抑制活性测试和以DNA拓扑异构酶Ⅳ为靶点的抑菌活性筛选。结果 分离得到的化合物中,黄酮及其苷类4个,分别是Ⅰ(芹菜素,apigenin)、Ⅱ(蒙花苷,linarin)、Ⅲ(芹菜素-7-O-芸香糖苷,apigenin-7-O-α-L-rhamnopyranosyl(1-6)-β-D-glucopyra-noside)和Ⅳ(木犀草素-7-O-葡萄糖苷,luteolin-7-O-β-D-glucopyranoside);苯乙醇苷4个,分别是Ⅴ(毛蕊花苷,ver-bascoside,即洋丁香苷,acteoside)、Ⅵ(异洋丁香苷,isoacteoside)、Ⅶ-1&2(cistanoside F a＆b)、Ⅷ-1＆2(campneosideⅡa&b);三萜皂苷3个,分别是Ⅸ(密蒙花苷A,mimengoside A)、Ⅹ(密蒙花苷B,mimengoside B)、Ⅺ(songarosideA)。活性测试结果表明:Ⅲ、Ⅱ、Ⅵ具有较强醛糖还原酶抑制活性,抑制率均高于阳性对照槲皮素;Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ和Ⅺ对DNA拓扑异构酶Ⅳ均有不同程度的抑制作用,在与环丙沙星相同质量浓度下(1 mg/mL),产生类似的抑制效果。结论 11个化合物中,化合物Ⅲ。

密蒙花化学成分及生物活性研究进展

密蒙花为马钱科醉鱼草属植物密蒙花的干燥花蕾及花序。研究报道密蒙花中主要含有黄酮类、苯乙醇苷类、三萜类等化学成分。对密蒙花的化学成分及其治疗眼部疾病、抗炎、降糖等生物活性等研究进展进行综述,旨在更好的开发利用该植物。

密蒙花总黄酮清除自由基活性研究

为了解密蒙花总黄酮清除自由基的能力,利用紫外-可见分光光度法对比研究了密蒙花总黄酮对1,1-二苯基-2-苦基肼自由基(DPPH.)、羟基自由基(.OH)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS+.)和超氧阴离子自由基(O2-.)的清除作用。结果表明,密蒙花总黄酮能有效清除DPPH.、.OH、ABTS+.和O2-.。当密蒙花总黄酮质量浓度达到4.8 mg/L时,对DPPH.、.OH、ABTS+.和O2-.清除率分别可达77.88%、35.42%、85.08%和56.91%。

HPLC法测定密蒙花中3种黄酮类成分的含量

目的建立HPLC法测定密蒙花中蒙花苷、木犀草素、芹菜素含量的方法。方法色谱柱:Phenomenex Gemini C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.1%磷酸水(57∶43);流速:0.8 mL/min;检测波长:350 nm;柱温:30℃。结果蒙花苷、木犀草素、芹菜素分别在0.098～1.23μg(r=0.999 8),0.014 8～0.185μg(r=0.999 7)和0.012 6～0.158μg(r=0.999 8)范围内呈良好的线性关系。所测8个不同产地密蒙花药材中,蒙花苷、木犀草素和芹菜素的含量范围分别为0.68%～1.41%,0.018%～0.078%和0.049%～0.107%。结论本法简便可行,可用于密蒙花中3种黄酮的含量测定。结果表明8个产地中密蒙花以四川简阳的药材总黄酮含量最高。

赤苍藤和密蒙花多糖的含量测定及抗氧化研究

采用苯酚-硫酸比色法测定两种药食同源植物赤苍藤和密蒙花多糖的含量,并采用DPPH法、水杨酸法、ABTS法以及FRAP法测定其粗多糖的抗氧化性能。结果表明,赤苍藤和密蒙花的多糖含量分别为30.78、190.89 mg/g;赤苍藤多糖和密蒙花多糖清除·OH和ABTS+·的能力均强于VE,其Fe3+还原/抗氧化能力均强于VC,且赤苍藤多糖的清除DPPH·能力和Fe3+还原/抗氧化能力均强于VE,密蒙花多糖清除·OH能力强于VC。

响应面分析法优化超声波提取密蒙花黄色素工艺

以水为介质、密蒙花黄色素水溶液的吸光度为考察指标,优化超声波强化提取密蒙花黄色素的工艺。选取超声波功率、提取时间和液料比为影响因素,在单因素试验基础上,进行三因素三水平的Box-Behnken中心组合试验设计,以密蒙花黄色素的吸光度为响应值进行响应面(RSM)分析,优化超声波强化提取密蒙花黄色素的提取条件。结果表明:超声波处理密蒙花有利于黄色素的浸出,超声波强化提取最佳条件为提取功率800W、提取时间24min、液料比27:1(mL/g);在最佳提取条件下,密蒙花黄色素吸光度理论值可达0.257,验证值为0.259,验证值与理论值间的相对误差为0.78%。密蒙花黄色素得率达5.95%。

互叶醉鱼草组织培养快速繁殖技术研究

以互叶醉鱼草的带腋芽茎段为外植体进行组织培养试验,结果表明,互叶醉鱼草的最佳启动培养基为MS+BA0.8 mg/L+NAA0.3 mg/L;增殖培养基为MS+BA0.4 mg/L+NAA0.2 mg/L;生根培养基为1/2 MS+IBA0.5 mg/L+NAA0.2 mg/L,生根率达100%,平均生根条数最多,为5.5条/株,根长最长,为2.2cm/条。

密蒙花黄色素性质研究

对密蒙花黄色素的性质进行了研究。结果表明，密蒙花黄色素易溶于水，难溶于石油醚，在不同溶剂中的溶解性为水＞无水乙醇＞丙酮＞石油醚。密蒙花黄色素在4、30℃、pH4.92～9.18范围内稳定，但高温、光和EDTA对其色价有一定影响。密蒙花黄色素具有较强DPPH自由基清除能力，每毫克密蒙花黄色素与10.01μg Trolox自由基清除能力相当。在10 g/L的浓度下，密蒙花黄色素对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、副溶血性弧菌、酿酒酵母、匍枝根霉、黑曲霉和桔青霉均没有抗菌活性。

正交设计优选密蒙花总黄酮提取工艺研究

目的:研究云南当地密蒙花总黄酮的提取工艺.方法:采用乙醇溶液浸提,在单因素基础上,通过正交试验法,考察乙醇浓度、浸提温度、浸提时间3个因素对密蒙花中总黄酮提取率的影响,并用紫外可见分光光度计对密蒙花中总黄酮进行含量测定,得到最佳的提取工艺.结果:本实验对密蒙花中总黄酮提取最佳方法为A3B3C3,即乙醇浓度为70%,浸提温度为75℃,浸提时间为3 h,总黄酮提取率为14.50%.结论:采用乙醇溶液浸提法可以用于云南当地密蒙花总黄酮的提取,其中浸提温度对总黄酮提取率影响最大.

RP-HPLC法测定密蒙花中毛蕊花苷的含量

目的 测定密蒙花中毛蕊花苷的含量 ,为药材及其制剂的质量控制提供依据。方法 采用 RP- HPL C法测定药材中毛蕊花苷含量。色谱条件 :Inertsil ODS- 3C1 8色谱柱 ( 5μm,2 5 0 m m× 4 .6 m m) ;流动相 :甲醇 -乙腈 - 1%醋酸水溶液 ( 8∶ 16∶ 76 ) ;检测波长 :2 5 4 nm。通过正交实验确定最优提取方案为 :2 0倍量的 70 %乙醇回流提取 1.0h。结果 该分析方法可以使样品达到基线分离 ,毛蕊花苷的保留时间约 14 min。该方法具有良好的精密度、重现性和稳定性 ,平均回收率为 10 0 .71% ,RSD=1.4 1% ;线性关系良好 ,相关系数为 0 .9999。用同样方法测定了 10个不同产地密蒙花药材中毛蕊花苷的含量 ,在 0 .79%～ 2 .30 %。结论 该分析方法快速 ,简单 ,无需对样品进行太多柱前处理 ,即可达到基线分离 ,测量结果准确 ,适用于密蒙花药材中毛蕊花苷的含量测定 。

正交试验对密蒙花总黄酮分离纯化工艺的优化

优选密蒙花(Buddleja officinalis Maxim)总黄酮的分离纯化工艺条件。以总黄酮含量为指标,通过静态和动态试验确定较佳树脂,并通过单因素试验和正交试验优化密蒙花中总黄酮的分离纯化工艺。结果表明,采用AB-8型吸附树脂纯化效果较佳,其优化的密蒙花总黄酮分离纯化工艺为上样浓度2.24mg/m L,用3 BV 50%乙醇洗脱,洗脱流速为1.5 m L/min;处理后所得干膏中总黄酮的纯度为71.31%。其优选的工艺条件简单可行,可为工业化纯化密蒙花总黄酮提供参考。

密蒙花黄色素的提取及其稳定性研究

研究了密蒙花中天然黄色素提取的最佳工艺条件及其在不同条件下的稳定性。采用单因素和正交实验研究黄色素的最优提取工艺条件;分析其在不同p H值、温度、光线条件以及与常见金属离子、氧化剂、还原剂、糖等物质共存时黄色素的稳定性。结果表明,最佳的提取条件为:乙醇体积分数是60%,提取温度为60℃,提取时间为2.5 h,液料比为1∶50。密蒙花黄色素在p H2~8时较稳定,对高温比较敏感,在日光下较不稳定;对还原剂较敏感,有一定的抗氧化能力;对金属离子K+、Na+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、Al3+、Cu2+比较稳定,对Fe3+和Pb2+不稳定;葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、苯甲酸钠等常用食品添加剂对黄色素的稳定性无明显影响。可为密蒙花黄色素作为食用色素提供科学依据。

安顺地区密蒙花植物种群数量调查

应用数理统计方法,从种群层次上对安顺地区密蒙花植物生长的大小级、密度和年龄结构等进行了分析。结果表明:密蒙花植物幼苗成活率低,成年树种数量小,种群发展趋于衰退。该结果可为安顺地区密蒙花野生资源的保护和开发利用提供科学依据。

不同生境中密蒙花黄酮类化合物质量分数的差异

对不同生境和不同部位密蒙花的黄酮类化合物进行了测定以及相关环境因子分析,结果表明:林隙(生境Ⅱ)中密蒙花的3种黄酮类化合物质量分数均显著高于林内(生境Ⅰ)和林缘(生境Ⅲ),林内(生境Ⅰ)最低。不同部位中,密蒙花盛开花的黄酮类化合物质量分数最高;不同的开花时期,盛开花的黄酮类化合物质量分数也显著高于花蕾。影响半阴生植物密蒙花黄酮类化合物质量分数的主要限制因子是光照,栽培中应提供适宜的光照条件,且应在密蒙花的盛花期对开放花朵进行及时采收。

密蒙花总黄酮的抗氧化及免疫调节作用

为研究密蒙花总黄酮(TFB)对D-半乳糖所致衰老小鼠的抗氧化和免疫调节作用,以200 mg/(kg·d)的剂量对昆明雄性小鼠皮下注射D-半乳糖建立衰老模型小鼠,对模型小鼠分别灌胃TFB 25、50、100 mg/(kg·d)或维生素E 50 mg/(kg·d),正常对照组及模型对照组灌服等剂量的蒸馏水,连续灌胃40 d,取血清测定谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)及总胆红素(TBIL)和总蛋白(TP)含量,取肝脏与脾脏计算脏器指数并测定肝及脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力及谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量,并做组织切片观察肝脏组织病理学变化。结果表明,与模型对照组比较,50、100 mg/(kg·d)剂量的TFB能显著抑制衰老小鼠血清AST、AST、ALP、LDH活力和TBIL含量的升高;并且能使小鼠肝和脑组织中的SOD活力和GSH含量显著升高,使MDA含量降低。其中,50 mg/(kg·d)剂量组使肝和脑组织中SOD活力分别显著升高10.49%和26.16%,使GSH含量分别显著升高42.10%和31.64%,使MDA含量分别显著降低55.03%和20.86%。各剂量组TFB均能明显提高衰老小鼠的脾脏指数和胸腺指数,50 mg/(kg·d)TFB剂量组使胸腺指数显著升高23.08%。肝组织切片病理学检查显示,TFB各剂量均可以减轻肝脏组织病理性改变。综上,TFB对D-半乳糖损伤模型小鼠的损伤具有改善作用。