Screening for Anti-tumor Activity of Fractions from Buddleja officinalis Maxim

[Objectives]The anti-tumor activity of fractions from Buddleja officinalis Maxim.by petroleum ether,ethyl acetate,n-butanol and water solvent was studied.[Methods]The ethanol extract from B.officinalis Maxim.was extracted and then concentrated with petroleum ether,ethyl acetate,n-butanol and water,respectively,and the extracts were obtained.The inhibitory effects of the four different fractions on the growth of three tumor cell lines in vitro were detected by CCK-8 method,and the median inhibitory concentration(IC 50 value)was calculated.[Results]The four fractions inhibited the growth of the three tumor cell lines in vitro,among which the n-butanol fraction had the best anti-tumor activity.The IC 50 values of the n-butanol fraction on human gastric cancer(SGC-7901),human breast cancer(MCF-7)and human liver cancer(BEL-7404)cell lines were 0.08,1.58 and 0.12 mg/mL,respectively.[Conclusions]Petroleum ether,ethyl acetate,n-butanol and water fractions from the ethanol extract of B.officinalis Maxim.had certain anti-tumor effects,and the n-butanol fraction had the best anti-tumor activity.

Effects of extract of Buddleja officinalis on partial inflammation of lacrimal gland in castrated rabbits with dry eye

AIMTo assess the effects of extract of Buddleja officinalis on tear secretion volume, tear film stability, expressions of TGF-β1, IL-1β, TNF-α in lacrimal gland of castrated rabbits with dry eye.

两种醉鱼草属植物根内真菌多样性和功能特征

为了解醉鱼草属Buddleja广布物种的根内真菌多样性异同和功能特征,对密蒙花Buddleja officinalis和白背枫B.asiatica的根内真菌进行了高通量测序和相关生物信息学分析。结果表明,从密蒙花和白背枫根内分别获得429和267个真菌扩增子序列变异(amplicon sequence variants,ASVs)特征序列,但两者在α-多样性指数上无显著性差异;通过物种注释发现,子囊菌门Ascomycota和担子菌门Basidiomycota物种均为两种植物根内真菌的主要成分,但白背枫根系中担子菌门物种(主要为伞菌纲Agaricomycetes)明显占优势,可见它们在物种组成上有明显差别;通过生态功能注释发现,密蒙花和白背枫根内分别有87个真菌和94个真菌ASVs被注释到生态功能,且共生(Symbiotroph)、腐生(Saprotroph)和寄生(Pathotroph)真菌均能在两种植物的根内被探测到,但类群存在异同;共生菌方面,在两种植物根内均检测到外生菌根真菌类的蜡壳耳科Sebacinaceae真菌,而丛枝菌根真菌类的多孢囊霉目Diversisporales仅见于密蒙花根内,丛枝菌根真菌类的球囊霉科Glomeraceae物种仅见于白背枫根内等。上述研究结果表明,密蒙花和白背枫在根内真菌多样性上无显著差异,但其根系对真菌的偏好性可能不同。

不同产地密蒙花指纹图谱研究

目的:建立UPLC指纹图谱结合化学模式识别以及化学成分分析的密蒙花药材质量评价方法。方法:建立密蒙花药材UPLC指纹图谱,采用化学计量法分析不同产地的密蒙花药材质量差异,采用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)对指纹峰进行鉴别。结果:20批密蒙花药材指纹图谱相似度在0.9以上,确定了11个共有峰并得到鉴定,各批样品之间的相似度在0.9以上。聚类分析将20批密蒙花分为3类;主成分分析表明主成分1、2、3是影响密蒙花药材质量的主要因子,OPLS-DA分析筛选出6个差异性标志物。结论:该研究为深入密蒙花药材质量控制研究提供科学依据。

高效液相色谱法测定密蒙花中蒙花苷的含量

目的 :建立高效液相色谱法测定密蒙花中蒙花苷的含量。方法 :采用RP -C1 8色谱柱 ,甲醇 -水 -醋酸 (4 5∶5 4 5∶0 5 )为流动相 ,流速 0 8mL·min- 1 ,32 6nm为检测波长 ,室温下对密蒙花中的蒙花苷进行含量测定。结果 :蒙花苷在 0 4～ 2 9μg范围内 ,面积与其浓度线性关系良好 (r=0 9991) ;样品平均回收率为 97 0 2 % ,RSD为 1 5 % (n =4)。结论 :该法简单、快速、结果准确可靠。

密蒙花化学成分及其活性研究

目的 为了进一步揭示中药密蒙花药理活性物质基础,研究发现活性成分,对中药密蒙花的化学成分及其活性进行系统的研究。方法 经过正相、反相硅胶柱,Sephadex LH-20,制备液相等色谱方法反复分离。利用各种波谱数据分析鉴定了11个化合物的结构,并有针对性地对分离得到的化合物进行了醛糖还原酶抑制活性测试和以DNA拓扑异构酶Ⅳ为靶点的抑菌活性筛选。结果 分离得到的化合物中,黄酮及其苷类4个,分别是Ⅰ(芹菜素,apigenin)、Ⅱ(蒙花苷,linarin)、Ⅲ(芹菜素-7-O-芸香糖苷,apigenin-7-O-α-L-rhamnopyranosyl(1-6)-β-D-glucopyra-noside)和Ⅳ(木犀草素-7-O-葡萄糖苷,luteolin-7-O-β-D-glucopyranoside);苯乙醇苷4个,分别是Ⅴ(毛蕊花苷,ver-bascoside,即洋丁香苷,acteoside)、Ⅵ(异洋丁香苷,isoacteoside)、Ⅶ-1&2(cistanoside F a＆b)、Ⅷ-1＆2(campneosideⅡa&b);三萜皂苷3个,分别是Ⅸ(密蒙花苷A,mimengoside A)、Ⅹ(密蒙花苷B,mimengoside B)、Ⅺ(songarosideA)。活性测试结果表明:Ⅲ、Ⅱ、Ⅵ具有较强醛糖还原酶抑制活性,抑制率均高于阳性对照槲皮素;Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ和Ⅺ对DNA拓扑异构酶Ⅳ均有不同程度的抑制作用,在与环丙沙星相同质量浓度下(1 mg/mL),产生类似的抑制效果。结论 11个化合物中,化合物Ⅲ。

密蒙花化学成分及生物活性研究进展

密蒙花为马钱科醉鱼草属植物密蒙花的干燥花蕾及花序。研究报道密蒙花中主要含有黄酮类、苯乙醇苷类、三萜类等化学成分。对密蒙花的化学成分及其治疗眼部疾病、抗炎、降糖等生物活性等研究进展进行综述,旨在更好的开发利用该植物。

密蒙花总黄酮清除自由基活性研究

为了解密蒙花总黄酮清除自由基的能力,利用紫外-可见分光光度法对比研究了密蒙花总黄酮对1,1-二苯基-2-苦基肼自由基(DPPH.)、羟基自由基(.OH)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS+.)和超氧阴离子自由基(O2-.)的清除作用。结果表明,密蒙花总黄酮能有效清除DPPH.、.OH、ABTS+.和O2-.。当密蒙花总黄酮质量浓度达到4.8 mg/L时,对DPPH.、.OH、ABTS+.和O2-.清除率分别可达77.88%、35.42%、85.08%和56.91%。

HPLC法测定密蒙花中3种黄酮类成分的含量

目的建立HPLC法测定密蒙花中蒙花苷、木犀草素、芹菜素含量的方法。方法色谱柱:Phenomenex Gemini C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.1%磷酸水(57∶43);流速:0.8 mL/min;检测波长:350 nm;柱温:30℃。结果蒙花苷、木犀草素、芹菜素分别在0.098～1.23μg(r=0.999 8),0.014 8～0.185μg(r=0.999 7)和0.012 6～0.158μg(r=0.999 8)范围内呈良好的线性关系。所测8个不同产地密蒙花药材中,蒙花苷、木犀草素和芹菜素的含量范围分别为0.68%～1.41%,0.018%～0.078%和0.049%～0.107%。结论本法简便可行,可用于密蒙花中3种黄酮的含量测定。结果表明8个产地中密蒙花以四川简阳的药材总黄酮含量最高。

赤苍藤和密蒙花多糖的含量测定及抗氧化研究

采用苯酚-硫酸比色法测定两种药食同源植物赤苍藤和密蒙花多糖的含量,并采用DPPH法、水杨酸法、ABTS法以及FRAP法测定其粗多糖的抗氧化性能。结果表明,赤苍藤和密蒙花的多糖含量分别为30.78、190.89 mg/g;赤苍藤多糖和密蒙花多糖清除·OH和ABTS+·的能力均强于VE,其Fe3+还原/抗氧化能力均强于VC,且赤苍藤多糖的清除DPPH·能力和Fe3+还原/抗氧化能力均强于VE,密蒙花多糖清除·OH能力强于VC。

响应面分析法优化超声波提取密蒙花黄色素工艺

以水为介质、密蒙花黄色素水溶液的吸光度为考察指标,优化超声波强化提取密蒙花黄色素的工艺。选取超声波功率、提取时间和液料比为影响因素,在单因素试验基础上,进行三因素三水平的Box-Behnken中心组合试验设计,以密蒙花黄色素的吸光度为响应值进行响应面(RSM)分析,优化超声波强化提取密蒙花黄色素的提取条件。结果表明:超声波处理密蒙花有利于黄色素的浸出,超声波强化提取最佳条件为提取功率800W、提取时间24min、液料比27:1(mL/g);在最佳提取条件下,密蒙花黄色素吸光度理论值可达0.257,验证值为0.259,验证值与理论值间的相对误差为0.78%。密蒙花黄色素得率达5.95%。

密蒙花中苯乙醇甙的分离和鉴定

从密蒙花中分离得到４个苯乙醇甙类化合物，经光谱等方法鉴定为毛柳甙（１），毛蕊花甙（２），异毛蕊花甙（３）和仙人球甙（４），除化合物２外均为首次从该植物获得。

密蒙花黄色素性能研究

对西双版纳密蒙花进行色素提取和性能测试。结果表明，密蒙花黄色素水溶性好，对光、热有一定耐受性，当ｐＨ为４～７ 时，色素稳定性好，适于食品的ｐＨ范围。当色素溶液中添加ＮａＣｌ、ＣｕＳＯ４ ＦｅＣｌ３ 及苯甲酸、柠檬酸、蔗糖等化合物时，它们的协同和拮抗作用不显著。色素对氧化剂Ｈ２Ｏ２ 的耐受能力较弱。密蒙花资源丰富，黄色素提取工艺简单，食用安全、无毒副作用。

密蒙花茶治疗更年期女性中重度干眼症疗效观察

目的探讨密蒙花茶对更年期女性中重度干眼症的治疗效果。方法采用前瞻性随机双盲对照研究方法,将2010年6月至2011年3月在江西省中医院眼科门诊确诊为中重度干眼症的72例(72眼)、年龄40～50岁女性患者随机分为2组:口服密蒙花茶组36例和口服维生素C安慰剂对照组36例。2组均加用5g·L-1羧甲基纤维素钠眼液滴眼治疗;分别在治疗前和治疗后3d、7d、28d检测并评定患者干眼症主观症状、视力、角膜荧光素染色(corneal fluorescent staining,Fl)、泪膜破裂时间(break-up time,BUT)及基础泪液分泌试验(Schirmer I test,SIT),治疗前后及2组间均进行统计学分析。结果 2组在治疗前干眼症主观症状及各项临床指标均无明显差别(均为P<0.05);治疗3d2组在干眼症主观症状、视力、角膜Fl、BUT及SIT均较治疗前无明显差别(均为P>0.05);治疗7d,密蒙花茶组均较治疗前明显改善[20.90(视疲劳)、21.60(干涩感)、17.80(异物感)、26.80(烧灼感)、19.60(畏光)、34.40(疼痛)、14.70(眼红);10.54(视力)、206.81(Fl染色)、277.93(BUT)、321.21(SIT);均为P<0.05]。在全部28d观察期间内,安慰剂组中重度干眼症均较治疗前无明显改善[1.98(视疲劳)、1.79(于涩感)、1.53(异物感)、3.28(烧灼感)、3.13(畏光)、4.26(疼痛)、3.21(眼红);1.39(视力)、4.19(角膜Fl)、2.98(BUT)、3.59(SIT);均为P>0.05]。密蒙花茶组SIT值较安慰剂组改善更为明显(F=16.54,P<0.05),SIT值达正常范围。结论密蒙花茶可显著改善中重度女性更年期干眼症的症状和体征,具有重要的临床应用价值。

光温对3种醉鱼草属植物种子萌发的影响

密蒙花、七里香和大序醉鱼草3种醉鱼草的种子细小,千粒重仅12￣58mg,但形态有差异,可以进行种类区分。种子充分吸水后,在20￣25℃条件下于5￣10d内就能迅速萌发,15d时发芽率达到75%以上。光照强度21.6￣32.4μmol·m-2·s-1和光照时间12￣16h·d-1均可显著提高七里香种子的发芽率,但光照抑制密蒙花种子萌发,而对大序醉鱼草种子萌发没有明显影响。种子苗移栽后3￣5d,真叶转绿,90%的幼苗可形成健壮植株。

密蒙花黄色素性质研究

对密蒙花黄色素的性质进行了研究。结果表明，密蒙花黄色素易溶于水，难溶于石油醚，在不同溶剂中的溶解性为水＞无水乙醇＞丙酮＞石油醚。密蒙花黄色素在4、30℃、pH4.92～9.18范围内稳定，但高温、光和EDTA对其色价有一定影响。密蒙花黄色素具有较强DPPH自由基清除能力，每毫克密蒙花黄色素与10.01μg Trolox自由基清除能力相当。在10 g/L的浓度下，密蒙花黄色素对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、副溶血性弧菌、酿酒酵母、匍枝根霉、黑曲霉和桔青霉均没有抗菌活性。

密蒙花总黄酮对去势雄鼠干眼症泪腺TGF-β_1及其基因表达的影响

目的观察密蒙花总黄酮对去势雄鼠导致干眼症泪腺TGF-β1及其基因表达的影响。方法90只健康1月龄SPF级Wistar雄性大鼠切除双侧睾丸及附睾建立干眼症模型;30只匹配大鼠切开阴囊而不切除睾丸作为假手术组。手术1周后,雄激素治疗组用丙酸睾酮注射液1 mg/kg股四头肌内注射,每3日1次(30只模型鼠);密蒙花总黄酮治疗组以密蒙花总黄酮0.02 g/kg与生理盐水混悬液灌胃,每日1次(30只模型鼠);正常组(30只正常鼠)、假手术组、模型组(30只)以生理盐水灌胃,每日1次。造模1、3、5个月后各组随机抽取10只大鼠处死,取双眼泪腺组织免疫组织化学法检测TGF-β1的表达,采用实时定量PCR(real-time PCR)法荧光定量检测TGF-β1mRNA的表达。结果造模5个月后,正常组和假手术组大鼠泪腺组织细胞中几乎无TGF-β1阳性表达,而模型组、雄激素治疗组和密蒙花总黄酮治疗组大鼠泪腺组织细胞中TGF-β1大量阳性表达,表现为大量棕黄色颗粒沉着。正常组、假手术组大鼠泪腺组织细胞中TGF-β1的平均光密度值(OD)高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);密蒙花总黄酮治疗组和雄激素治疗组大鼠泪腺组织细胞中TGF-β1的平均OD值大于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);密蒙花总黄酮治疗组的大鼠泪腺组织细胞中TGF-β1的平均OD值小于雄激素治疗组,差异有统计学意义(P<0.05)。TGF-β1mRNA在不同组大鼠泪腺组织细胞中的表达差异比较与TGF-β1表达相同(P<0.05)。结论密蒙花总黄酮可抑制去势雄鼠干眼症泪腺炎症反应,上调TGF-β1mRNA的表达以增加TGF-β1的合成是其作用途径之一。

密蒙花提取物滴眼剂对实验性干眼症鼠泪腺组织细胞凋亡的影响

目的:观察密蒙花提取物滴眼剂对去势所致干眼症雄鼠基础泪液分泌量、泪膜稳定性、泪腺凋亡相关基因蛋白Bax和Bcl-2表达的影响。方法:将45只Wister雄性大鼠随机分为空白组(A1,A2,A3)、模型组(B1,B2,B3)、密蒙花提取物滴眼剂治疗组(C1,C2,C3),共9组,1:饲养1mo,2:饲养2mo,3:饲养3mo,每组5只。B,C组行去势术建立动物模型,C组以密蒙花提取物滴眼剂连续滴眼治疗,对全部实验大鼠行SchirmerⅠ试验、测量泪膜破裂时间,采用免疫组织化学的方法,对大鼠泪腺组织中凋亡相关基因蛋白Bax和Bcl-2进行检测。结果:C组SchirmerⅠ试验测量值明显高于B组(P<0.01),泪膜破裂时间明显长于B组(P<0.01)。泪腺导管及腺泡上皮细胞中Bax阳性表达的细胞数均明显低于B组,而Bcl-2阳性表达的细胞数均明显高于B组(P<0.01)。结论:密蒙花提取物滴眼剂可显著抑制雄激素水平降低后大鼠干眼症的发生,抑制泪腺细胞凋亡,维持泪腺基础分泌量和泪膜的稳定性。

正交设计优选密蒙花总黄酮提取工艺研究

目的:研究云南当地密蒙花总黄酮的提取工艺.方法:采用乙醇溶液浸提,在单因素基础上,通过正交试验法,考察乙醇浓度、浸提温度、浸提时间3个因素对密蒙花中总黄酮提取率的影响,并用紫外可见分光光度计对密蒙花中总黄酮进行含量测定,得到最佳的提取工艺.结果:本实验对密蒙花中总黄酮提取最佳方法为A3B3C3,即乙醇浓度为70%,浸提温度为75℃,浸提时间为3 h,总黄酮提取率为14.50%.结论:采用乙醇溶液浸提法可以用于云南当地密蒙花总黄酮的提取,其中浸提温度对总黄酮提取率影响最大.

密蒙花提取物滴眼剂对实验性干眼症大鼠泪腺组织细胞凋亡的影响(英文)

目的:通过检测密蒙花提取物滴眼剂对去势所致干眼症大鼠泪腺凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达的影响,探讨密蒙花提取物滴眼剂治疗干眼症的作用机制。方法:将45只Wistar雄性大鼠随机分为假手术组、模型组和密蒙花提取物滴眼剂治疗组(简称治疗组)。模型组和治疗组大鼠行双侧去势术建立大鼠干眼症模型。治疗组大鼠用密蒙花提取物滴眼剂滴眼治疗,每次1滴,每天3次,模型组和假手术组大鼠用生理盐水滴眼。分别于治疗1、2和3个月后每组处死5只,取材用于相关指标检测。采用免疫组织化学法检测泪腺组织中凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达,并计数凋亡细胞数量。结果:治疗组治疗1、2和3个月后,泪腺导管及腺泡上皮细胞中Bax表达阳性的细胞数均明显低于模型组,Bcl-2表达阳性的细胞数均明显高于模型组,细胞凋亡数量均明显低于模型组(P<0.01)。结论:密蒙花提取物滴眼剂中主要成分为黄酮类。密蒙花提取物滴眼剂可显著抑制雄激素水平降低后大鼠干眼症的发生,抑制泪腺细胞凋亡。